Нові аналоги глюкагон-подібний пептид, композиція та спосіб застосування

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНІКИ

Даний винахід відноситься до нових аналогам глюкагоно-подібний пептид і композиціям, які корисні для активації експресії інсуліну у ссавців і для лікування цукрового діабету. Зокрема, ці пептидні похідні забезпечують тривалий термін дії при лікуванні діабету та інших захворювань, пов'язаних з инсулинотропними пептидами, гастроінтестинальної функцією і активностями, пов'язаними з рівнями глюкагону.

ПЕРЕДУМОВИ СТВОРЕННЯ ВИНАХОДУ

Ендокринна секреція панкреатичних острівців регулюється складним контрольним механізмом, керованим не тільки принесеними рідиною метаболітами, такими як глюкоза, амінокислоти і катехоламіни, а також місцевим паракринним впливом. Основні гормони підшлункових острівців - інсулін, глюкагон і соматостатин - взаємодіють з певними типами клітин підшлункової залози (клітини A, B і D, відповідно), щоб регулювати секреторний відповідь. Незважаючи на те, що секреція інсуліну контролюється переважно рівнем глюкози в крові, соматостатин інгібує глюкозоопосредованную секрецію інсуліну. На додаток до регуляції секреції інсуліну всередині острівців поджелункретиновая концепція виходить з спостереження, прийом їжі або ентеральне введення глюкози викликало більше стимулювання вивільнення інсуліну порівняно з аналогічним кількістю енергії (глюкози), введений внутрішньовенно (Elrick, H., et al., J Clin. Endocrinol. Metab., 24, 1076-1082, 1964; McIntyre, N., et al., J Clin. Endocrinol. Metab., 25, 1317-1324, 1965). Тому було постулировано, що отримані від кишечника сигнали, що стимулюють пероральним прийомом поживних речовин всередину, представляють ефективні стимулятори секреції інсуліну, відповідальні за аугментацію вивільнення інсуліну у випадку, коли енергія вводиться через кишечник, порівняно з парентеральним шляхом (Dupre, J., et al., Diabetes. 15, 555-559, 1966). Незважаючи на те, що деякі нейромедіатори і гормони кишечника мають инкретин-подібною активністю, важливі свідчення, отримані з імунологічних досліджень, досліджень з антагоністами і досліджень з використанням нокаутів, показують, що глюкозозависимий инсулинотропний поліпептид (GIP) і глюкагон-подібний пептид (GLP)-1 представляють основні пептиди, відповідальні за основну кількість секреції інсуліну, стимульоване поживними речовинами. Зауваження про те, що пацієнт з цукровим діабетом 2 типу демонструє значне зниження величини секр�ует чи вивільнення дефектного инкретина або стійкість до дії инкретина патофізіології β-клітинної дисфункції у суб'єктів з діабетом.

Глюкагон-подібний пептид-1 (GLP-1) був вперше ідентифікований в 1987 році як инкретиновий гормон, пептид, секретируемий в кишечнику після прийому їжі. GLP1 секретується L-клітинами кишечника після протеолітичного процесингу 160-амінокислотного білка-попередника, препроглюкагона. Розщеплення препроглюкагона спочатку дає GLP-1, 37-амінокислотний пептид, GLP-1(1-37), який є слабоактивним. Подальше розщеплення по положенню 7 призводить до утворення біологічно активного GLP-1(7-37). Приблизно 80% синтезованого в L-клітці GLP-1(7-37)ВІН амидируется з C-кінця після видалення кінцевого залишку гліцину. Біологічні ефекти та метаболічний оборот вільної кислоти GLP-1(7-37)ВІН і аміда GLP-1(7-37)NH2відрізняються.

Відомо, що GLP-1 стимулює секрецію інсуліну, що викликає засвоєння глюкози клітинами, що зменшує рівень глюкози в сироватці крові (Mojsov, S., et al., J Clin. Invest., 79, 616-619, 1987; Kreymann, B., et al., Lancet ii,1300-1304, 1987; Orskov, C., et al., Endocrinology, 123, 2009-2013, 1988). Екстрена интрацеребровентрикулярная ін'єкція агоністів рецепторів GLP-1 або GLP-1 викликає тимчасове зниження споживання їжі (Turton М. Д., et al., Nature, 379, 60-72, 1996 р.), тоді як більш тривалий интрацеребровентрикулярное або парентеральне введення агон� Obes. Res., 6, 147-156, 1998; Szayna, M., et al., Endocrinology, 141, 1936-1941, 2000; Larsen, P. J., et al., Diabetes, 50, 2530-2539, 2001). У розглянутій області відомі численні аналоги GLP-1, демонструють инсулинотропное дію. Ці аналоги, включають, наприклад, GLP-1(7-36), Gln9-GLP-1(7-37), D-Gln9-GLP-1(7-37), ацетил-Lys9-GLP-1(7-37), Thr16-Lys18-GLP-1(7-37) і Lys18-GLP-1(7-37). Похідні GLP-1 включають, наприклад, солі з додаванням кислот, карбоксилатні солі, нижні алкиловие естери та аміди (W091/11457; EP0733644; Патент США 5512549).

Велика частина активності GLP-1, описаної в доклінічних експериментах, також була продемонстрована в дослідженнях на людях. Інфузія GLP-1(7-36)NH2 нормальному суб'єкту-людині стимулювала секрецію інсуліну, істотно знижувала рівень глюкози в крові натще після введення глюкози або прийому їжі (Orskov, C, et al., Diabetes, 42, 658-661, 1993; Qualmann, C., et al., Acta.Diabetol, 32, 13-16, 1995).

Пептиди на основі GLP-1 породили великі перспективи в якості альтернативи інсулінотерапії у пацієнтів з цукровим діабетом, для яких не був досягнутий успіх при лікуванні сульфонілсечовиною (Nauck, М. А. et al., Diabetes Care, 21, 1925-1931, 1998). GLP-1 стимулює секрецію інсуліну, але тільки під час періоду гіперглікемії. Безпека GLP-1 порівняно з інсуліном підвищена за рахунок цієї властивості GLP-1 та спостереження про те,�на призводити до вивільнення інсуліну підшлунковою залозою і пресистемному дії інсуліну в печінці. Це призводить до зниження циркулюючих рівнів інсуліну в периферії, порівняно з рівнями при підшкірних ін'єкціях інсуліну. GLP-1 уповільнює спорожнення шлунка, що переважно тому, що це подовжує поглинання поживних речовин протягом тривалого періоду часу, знижуючи постпрандиальний глюкозний пік. Кілька повідомлень дозволяють припустити, що GLP-1 може підвищувати чутливість до інсуліну в периферичних тканинах, таких як м'язова і жирова тканини та тканину печінки. Нарешті, було показано, що GLP-1 є потенційним регулятором апетиту.

Терапевтичний потенціал GLP-1 і його аналогів ще більше зростає, якщо розглядати його застосування у пацієнтів з цукровим діабетом 1 типу. Кілька досліджень показали ефективність нативного GLP-1 при лікуванні інсулінозалежного цукрового діабету (ИЗСД). Схожим чином, для пацієнтів з інсулінонезалежний цукровий діабет (ИНСД) GLP-1 є ефективним для зменшення гіперглікемії при голодуванні завдяки його глюкагоностатическим властивостями. Додаткові дослідження показали, що GLP-1 також зменшує діапазон постпрандіальної глікемії при ИЗСД, швидше за все, завдяки затримці випорожнення шлунка. Ці спостереження�історичний період напіврозпаду нативних молекул GLP-1, який визначається активністю дипептидил-пептидази IV (DPP IV), є досить коротким. Наприклад, біологічний період напіврозпаду GLP-1(7-37)ВІН складає усього лише від 3 до 5 хвилин (патент США 5118666). Стійке зниження концентрації глюкози в крові спостерігається тільки при безперервній інфузії, як показують дослідження, в яких GLP-1 вводили шляхом внутрішньовенної інфузії протягом курсу тривалістю 24 години (Larsen, J.; et al. Diabetes Care, 24, 1416-1421, 2001). Фермент DPP-IV, сериновая протеаза, яка гідролізує переважно пептиди після передостаннього NH2-кінцевого проліну (Хаа-Pro-) або аланіну (Хаа-Ala-) (Mentlein, R., Regul. Pept., 85, 9-25, 1999), як було показано, швидко метаболізує GLP-1 in vitro. Тому пептиди на основі GLP-1 пролонгованої дії, які стійкі до DPP IV, можуть володіти більшим терапевтичним потенціалом для лікування цукрового діабету.

ОПИС ВИНАХОДУ

Даний винахід надає нові аналоги GLP-1, які мають збільшений час дії порівняно з нативним GLP-1 і повністю стійкі до гідролізу DPP-IV.

Винахід включає в себе з'єднання з загальною формулою I:

Xaa7-Q-Gly-Thr-Phe-Thr-Xaa14-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaa

Xaa7являє собою природну або відмінну від природного амінокислоту, обрану з групи, що складається з L-His, D-гістидину, дезаминогистидина, 2-аминогистидина, β-гидроксигистидина, гомогистидина, α-фторметилгистидина і α-метилгистидина;

Q вибирають з таких линкеров (II), (III) та (IV):

,

де

R1являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси;

R2являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси;

R3являє собою водень, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;

X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень;

Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C1-C6)алкіл;

Z являє собою азот, вуглець, кисень або сірку;

В разі, коли Z являє собою азот, кисень або сірку, W відсутня; Якщо Z є вуглецем, W являє собою водень або фтор.

Xaa14являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину і гістидину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної аминокию або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з валіну, лізину і лейцину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами. Або Xaa16являє собою лізин, пов'язаний з T-U.

Xaa18являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину, аргініну і лізину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами.

Xaa22і Xaa23являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, Aib і глутамінової кислоти, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами.

Xaa26, Xaa27, Xaa34, Xaa35і Xaa36являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами. Або Xaa26являє собою лізин, або вільну кислоту кінцевої амінокислоти? або

у разі, коли Xaa26являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), не пов'язану з T-U, B переважно вибирають з пептидних фрагментів, що складаються з двох-п'яти природних або не зустрічаються в природі амінокислот, і однією амінокислотою повинен бути цистеїн, таких як, як неограничивающих прикладів, цистеїн-серин-гліцин або цистеїн-аланін, і з цистеїном пов'язаний монометоксиполиэтиленгликольмалеимид.

T вибирають із групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти HOOC(CH2)nCOOH;

n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;

T вибирають із групи, що складається з

,

і де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U присутній тільки у випадку, коли T являє собою амінокислоту, обрану з групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти; або коли T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 �е одним кращим з'єднанням є з'єднання, продемонстроване Формулою V:

,

де

R1являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R2являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси;

R3являє собою водень, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2.

X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень.

D являє собою Gly-Phe-Thr-Xaa14-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Thr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Xaa34-Xaa35-Xaa36-B.

Xaa7являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану від групи, що складається з L-His, D-гістидину, дезаминогистидина, 2-аминогистидина, β-гидроксигистидина, гомогистидина, α-фторметилгистидина і α-метилгистидина;

Xaa14являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину і гістидину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами.

Хаа16являє собою природну або не встлее атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами. Або Xaa16являє собою лізин, пов'язаний з T-U.

Xaa18являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину, аргініну і лізину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами.

Xaa22і Xaa23являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, Aib і глутамінової кислоти, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами.

Xaa26, Xaa27, Xaa34, Xaa35і Xaa36являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщений однієї або більше алкільних групами. Або Xaa26являє собою лізин, пов'язаний з T-U.

B вибирають із групи, що складається з гліцину, NH2і OH, які представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти, або

у разі, когдостоящей з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), не пов'язану з T-U, B переважно вибирають з пептидних фрагментів, що складаються з двох-п'яти природних або не зустрічаються в природі амінокислот, і однією амінокислотою повинен бути цистеїн, таких як, як неограничивающих прикладів, цистеїн-серин-гліцин або цистеїн-аланін, і з цистеїном пов'язаний монометоксиполиэтиленгликольмалеимид.

T вибирають із групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти HOOC(CH2)nCOOH;

n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;

або T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U присутній тільки тоді, коли T являє собою амінокислоту, обрану з групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти; або, коли T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U являє собою жирну кислоту з довжиною від 8 до 20 вуглеців.

В якості пріоритетного техничеср>

В якості кращого технічного рішення, X являє собою водень, фтор або-трифторметил.

В якості кращого технічного рішення, R1, R2і R3являють собою водень або метил.

В якості кращого технічного рішення, R1являє собою метил, R2і R3являють собою водень.

В якості кращого технічного рішення, R1і R3являють собою водень і R2являє собою метил.

В якості кращого технічного рішення, R3утворює 5-8-членное кільце з R1і R2являє собою водень; або R3утворює 5-8-членное кільце з R2і R1являє собою водень.

Найбільш бажані сполуки являють собою сполуки, як показано у Формулі VI,

,

де

R1являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R2являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R3являє собою водень, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2.

Y пр�ub>-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Thr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Xaa34-Xaa35-Xaa36-B.

Xaa7являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану від групи, що складається з L-His, D-гістидину, дезаминогистидина, 2-аминогистидина, β-гидроксигистидина, гомогистидина, α-фторметилгистидина і α-метилгистидина;

Xaa14являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину і гістидину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;

Хаа16являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану від групи, що складається з валіну, лізину і лейцину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами. Або Xaa16являє собою лізин, пов'язаний з T-U.

Xaa18являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину, аргініну і лізину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені щиеся в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, Aib і глутамінової кислоти, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa26, Xaa27, Xaa34, Xaa35і Xaa36являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами. Або Xaa26являє собою лізин, пов'язаний з T-U.

B вибирають із групи, що складається з гліцину, NH2і OH, які представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти, або

у разі, коли Xaa26являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), не пов'язану з T-U, B переважно вибирають з пептидних фрагментів, що складаються з двох-п'яти природних або не зустрічаються в природі амінокислот, і однією амінокислотою повинен бути цистеїн, таких як, як неограничЌмалеимид.

T вибирають із групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти HOOC(CH2)nCOOH;

n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;

або T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U присутній тільки тоді, коли T є амінокислотою, обраної з групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти; або коли T обрана з групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U являє собою жирну кислоту з довжиною від 8 до 20 вуглеців.

В якості кращого технічного рішення, R3являє собою водень.

В якості кращого технічного рішення, Y являє собою водень або (C1-C6)алкіл.

Ще одні бажані сполуки являють собою сполуки, як показано Формулою VII

,

де

R1являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R2представляетд, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2.

Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C1-C6)алкіл.

W являє собою водень або фтор.

D являє собою Gly-Phe-Thr-Xaa14-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Thr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Xaa34-Xaa35-Xaa36-B.

Xaa7являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану від групи, що складається з L-His, D-гістидину, дезаминогистидина, 2-аминогистидина, β-гидроксигистидина, гомогистидина, α-фторметилгистидина і α-метилгистидина;

Xaa14являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину і гістидину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Хаа16являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану від групи, що складається з валіну, лізину і лейцину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами. Або Xaa16являє собою лізин, связанн� групи, складається з серину, аргініну і лізину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa22і Xaa23являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, Aib і глутамінової кислоти, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa26, Xaa27, Xaa34, Xaa35і Xaa36являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами. Або Xaa26являє собою лізин, пов'язаний з T-U.

B вибирають із групи, що складається з гліцину, NH2і OH, які представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти, або

у разі, коли Xaa26являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспар�складаються з двох-п'яти природних або не зустрічаються в природі амінокислот, і однією амінокислотою повинен бути цистеїн, таких як, як неограничивающих прикладів, цистеїн-серин-гліцин або цистеїн-аланін, і з цистеїном пов'язаний монометоксиполиэтиленгликольмалеимид.

T вибирають із групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти HOOC(CH2)nCOOH;

n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;

або T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U присутній тільки тоді, коли T є амінокислотою, обраної з групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти; або коли T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U являє собою жирну кислоту з довжиною від 8 до 20 вуглеців.

В якості кращого технічного рішення, R3являє собою водень або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;

В якості кращого технічного рішення, Y являє собою водень або фтор;

Як предпочтительнедставляют собою з'єднання, як показано Формулою VIII

або фармацевтично прийнятну сіль цього, де:

Xaa7являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану від групи, що складається з L-His, D-гістидину, дезаминогистидина, 2-аминогистидина, β-гидроксигистидина, гомогистидина, α-фторметилгистидина і α-метилгистидина;

Q вибирають з таких линкеров (II), (III) або (IV):

,

де

R1являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R2являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R3являє собою водень, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2.

X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень.

Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C1-C6)алкіл.

Z являє собою азот, вуглець, кисень або сірку.

Коли Z являє собою азот, кисень або сірку, W відсутня. Якщо Z є вуглецем, W являє собою водень, фтор.

Xaa14являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту,оти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Хаа16являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану від групи, що складається з валіну, лізину і лейцину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa18являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину, аргініну і лізину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами

Xaa22і Xaa23являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, Aib і глутамінової кислоти, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa27, Xaa34, Xaa35і Xaa36являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

B вибираю�євою амінокислоти.

T вибирають із групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти HOOC(CH2)nCOOH;

n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;

або T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U присутній тільки тоді, коли T є амінокислотою, обраної з групи, що складається з γ-глутамінової кислоти, β-аланіну, γ-аміномасляної кислоти; або, коли T вибирають із групи, що складається з

,

де k вибирають з групи 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 та m вибирають з 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

U являє собою жирну кислоту з довжиною від 8 до 20 вуглеців;

Ще одні бажані сполуки являють собою сполуки, як показано Формулою IX

Xaa7-Q-Gly-Thr-Phe-Thr-Xaa14-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Xaa34-Xaa35-Xaa36-Gly-Xaan-Xaan+1-Xaan+2-Xaan+3-Xaan+4-Cys(ПЕГ)-Xaam-Xaam+1-Xaam+2-Xaam+3-Xaam+4

IX

або фармацевтично прийнятну сіль цього, де:

Xaa7являє собозаминогистидина, 2-аминогистидина, β-гидроксигистидина, гомогистидина, α-фторметилгистидина і α-метилгистидина;

Q вибирають з таких линкеров (II), (III) або (IV):

,

де

R1являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R2являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C1-C6)алкокси.

R3являє собою водень, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2.

X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень.

Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C1-C6)алкіл.

Z являє собою азот, вуглець, кисень або сірку.

В разі, коли Z являє собою азот, кисень або сірку, W відсутня. Якщо Z є вуглецем, W являє собою водень, фтор.

Xaa14являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину і гістидину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Хаа16являє собою природну або не зустрічається в природі аминокиѹ амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa18являє собою природну або не зустрічається в природі амінокислоту, обрану з групи, що складається з серину, аргініну і лізину, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa22і Xaa23являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, Aib і глутамінової кислоти, де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Xaa26, Xaa27, Xaa34, Xaa35і Xaa36являють собою природні або не зустрічаються в природі амінокислоти, вибрані з групи, що складається з гліцину, лізину, аргініну, лейцину і аспарагіну, Aib (α-аминоизомасляной кислоти), де один або більше атомів вуглецю зазначеної амінокислоти необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами.

Всі разом Xaan, Xaan+1, Xaan+2, Xaan+3, Xaan+4, Xaam, Xaam+1, Xaam+2, Xaam+3, Xaam+4можуть являти собою одну, або дві, або три, або чотири амінокислоти, вибрані з природних або штучних амінокислот. В іншій групі сіаm+4все разом з цистеїном утворюють фрагменти від двох до п'яти амінокислотних, і цистеїн, пов'язаний з монометоксиполиэтиленгликольмалеимидом.

Щоб дати читачеві можливість розуміння сполук, охоплених винаходом, далі надані наступні з'єднання по винаходу:

- [Q-лінкер-d8,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид;

- [Q-лінкер-a8-9,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид;

- [Q-лінкер-b8-9,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид;

- [Q-лінкер-c8,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид;

- [Q-лінкер-e8-9,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид;

- [Q-лінкер-f8-9,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-c8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-d8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-e8-9,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-f8-9,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-a8-9,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-b8-9,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[(Nε-ω-карбоксигептадеканоил)]-[Q-лінкер-c8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- N-ε26-[(Nε-ω-карбоксинонадеканоил)]-[Q-лінкер-c8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид;

- [Q-лінкер-d8]GLP-1-(7-37)-Cys(ПЕГ)-Ala-NH2;

- [Q-лінкер-c8]GLP-1-(7-37)-Cys(ПЕГ)< 2;

- [Q-лінкер-e8-9]GLP-1-(7-37)-Cys(ПЕГ)-Ala-NH2;

- [Q-лінкер-f8-9]GLP-1-(7-37)-Cys(ПЕГ)-Ala-NH2.

Ключовим моментом цього винаходу є заміна амідній зв'язку Ала8аміно кінця GLP-1, який представляє собою ділянку впізнавання DPP-IV, імітують пептидний зв'язок линкерами. Линкери, що імітують пептидний зв'язок, являють собою класичний підхід при пошуку ліків, шляхом імітації зв'язку природного пептиду, який зберігає здатність взаємодіяти з біологічними мішенями і надає такий же біологічний ефект (Curr Chem Bio, 12, 292-296, 2008). На основі того ж принципу, аналоги GLP-1, модифіковані імітують пептидний зв'язок линкерами, повинні зберігати ту ж біологічну активність і мати тривалий термін дії инсулинотропних агентів.

З'єднання по винаходу можуть мати один або більше асиметричних центрів, таких як А-лінкер у Формулі I. Такі сполуки можуть бути представлені в одній або декількох стереоизомерних формах. Ці сполуки можуть бути, наприклад, рацематами, оптично активними формами або енантіомерно збагаченими сумішами стереоизомеров. Там, де це потрібно, окремі энантиомери, тобто, оптично активн�синтезу оптично активних вихідних матеріалів або шляхом поділу рацематов. Поділ рацематов можна досягти за допомогою традиційних способів, таких як, наприклад, кристалізація в присутності розділяє агента; отримання похідного з энантиомерной чистотою або збагаченого розділяє реагентом з подальшим виділенням потрібного ізомеру; або хроматографія, використовуючи, наприклад, хиральную ВЕРХ-колонку.

Термін «поліпептид» і «пептид», що використовується в цьому документі, означає з'єднання, що складається щонайменше з п'яти складових амінокислот, пов'язаних пептидними зв'язками. Складові амінокислоти можуть відноситься до групи амінокислот, що кодуються генетичним кодом, і вони можуть являти собою природні амінокислоти, які не кодуються генетичним кодом, а також синтетичні амінокислоти. Природні амінокислоти, які не кодуються генетичним кодом, являють собою, наприклад, γ-карбоксиглутамат, орнітин, фосфосерин, D-аланін, D-глутамін. Синтетичні амінокислоти складаються з амінокислот, виготовлених шляхом хімічного синтезу, тобто D-ізомерів амінокислот, що кодуються генетичним кодом, таких як D-аланін, D-лейцин, Aib (α-аминоизомасляная кислота), Abu (α-аміномасляна кислота), Tie (трет-бутилглицин), β-аланін, 3-аминометилгинин, аспарагін, аспарагінову кислоту, цистеїн, цистин, глутамін, глутамінову кислоту, гліцин, гістидин, гідроксипролін, ізолейцин, лейцин, лізин, метіонін, фенілаланін, пролін, серин, треонін, триптофан, тирозин, валін.

Таким чином, непротеогенная амінокислота являє собою молекулу, яку можна включити в пептид допомогою пептидних зв'язків, але не є протеогенной амінокислотою. Прикладами є γ-карбоксиглутамат, орнітин, фосфосерин, D-амінокислоти, такі як D-аланін, D-глутамін, синтетичні непротеогенние амінокислоти, що містять амінокислоти, виготовлені шляхом хімічного синтезу, тобто D-ізомери амінокислот, що кодуються генетичним кодом, такі як D-аланін, D-лейцин, Aib (α-аминоизомасляная кислота), Abu (α-аміномасляна кислота), Tie (трет-бутилглицин), 3-аминометилбензойная кислота, антраниловая кислота, дезаминогистидин, бета-аналоги амінокислот, такі як β-аланін і т. д. D-гістидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, Nα-ацетилгистидин, α-фторметилгистидин, α-метилгистидин, 3-пиридилаланин, 2-пиридилаланин або 4-пиридилаланин, (1-аминоциклопропил)карбонова кислота, (1-аминоциклобутил)карбонова кислота, (1-аминоциклопен�миноциклооктил) карбонова кислота;

Амінокислотна послідовність GLP була опублікована кількома дослідниками (Lopez, L. C. et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 80, 5485-5489, 1983; Bell, G. I., et al., Nature 302:716-718(1983); Heinrich, G., et al, Endocrinol, 115:2176-2181 (1984)). Структура мРНК пропроглюкагона і відповідна їй послідовність амінокислот добре відома. Був охарактеризований протеолітичний процесинг продукту гена попередника, проглюкагона, в глюкагони і два инсулинотропних пептиду. Як використовується в цьому документі, запис GLP-1(1-37) відноситься до поліпептиду GLP-1, який має всі амінокислоти від 1 (N-кінець) до 37 (C-кінець). Аналогічним чином, GLP-1(7-37) відноситься до поліпептиду GLP-1, який має всі амінокислоти від 7 (N-кінець) до 37 (C-кінець). Аналогічним чином, GLP-1(7-36) відноситься до поліпептиду GLP-1, який має всі амінокислоти від 7 (N-кінець) до 36 (C-кінець).

Цим винаходом також надані фармацевтичні композиції, що включають з'єднання по справжньому винаходу в поєднанні з одним або кількома фармацевтично прийнятними носіями, розчинниками або наповнювачами.

Принцип твердофазного синтезу поліпептидів добре відомий в розглянутій області і може бути знайдений в основних текстах в області, таких як Dugas, H. and Penney, C., Bioorganic Chemistry (1981) Springer�ептидний фрагмент по винаходу може бути синтезований за допомогою методики твердої фази, застосовується в пептидном синтезаторі Applied Biosystems 430 (Applied Biosystems, Inc., 850 Lincoln Centre Drive, Фостер-Сіті, CA 94404), та синтетичних циклів, наданих Applied Biosystems. Boc-захищені амінокислоти та інші реагенти комерційно доступні від Applied Biosystems та інших продавців хімічної продукції. Boc-хімію послідовностей, використовуючи протоколи подвійного приєднання, застосовують на початковому етапі п-метилбензгидриламинових смол для продукування C-кінцевих карбоксамидов. Для продукування C-кінцевих кислот можна використовувати відповідну PAM-смолу. Asp, Gln і Arg з'єднують з використанням заздалегідь підготовлених гідроксильних бензотриазолових ефірів.

Іншим предметом цього винаходу є надання фармацевтичного складу, що містить з'єднання по справжньому винаходу, яке присутнє в концентрації від 0,1 мг/мл до 25 мг/мл, і де зазначений склад має рН від 3,0 до 9,0. Склад може додатково включати буферну систему, консервант(и), тонічний агент(и), хелатний агент(и), стабілізатори та поверхнево-активні речовини. В одному варіанті здійснення винаходу фармацевтичний складу є водним складом, тобто складом, що включає воду. Такий склад, як правило, предссостав являє собою водний розчин. Термін «водний склад» визначається як склад, що містить, щонайменше, 50% маса/маса води. Аналогічним чином, термін «водний розчин» визначається як розчин, що містить, щонайменше, 50% маса/маса води, і термін «водна суспензія» визначається як суспензія, що містить, щонайменше, 50% маса/маса води.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичний склад являє собою ліофілізований склад, в який лікар і пацієнт додає розчинники та/або розріджувачі перед початком використання.

В іншому варіанті здійснення фармацевтичний склад являє собою висушений склад (наприклад, висушений сублімацією або висушений розпиленням), готовий для використання без будь-якого попереднього розчинення.

У ще одному аспекті винахід відноситься до фармацевтичного складу, що включає водний розчин з'єднання у відповідності з цим винаходом, і буфер, де зазначене з'єднання присутня в концентрації від 0,1 мг/мл або вище, і де зазначений склад має рН від 3,0 до приблизно 9,0. В іншому варіанті здійснення винаходу рН складу становить приблизно від 7,0 до приблизно 9,5. В іншому варіанті здійснення изобрет�ва становить приблизно від 5,0 до приблизно 7,5. В іншому варіанті здійснення винаходу рН складу становить приблизно приблизно 7,5 до 9,0. В іншому варіанті здійснення винаходу рН складу становить приблизно від 7,5 до приблизно 8,5. В іншому варіанті здійснення винаходу рН складу становить приблизно від 6,0 до приблизно 7,5.

В іншому варіанті здійснення винаходу рН складу становить приблизно від 6,0 до приблизно 7,0. В іншому варіанті здійснення винаходу рН складу становить від 8,0 до 8,5.

У додатковому варіанті здійснення винаходу буфер вибирають із групи, що складається з ацетату натрію, карбонату натрію, цитрату, глицилглицина, гістидину, гліцину, лізину, аргініну, однозаміщеного фосфату натрію, двозаміщений фосфат натрію, фосфату натрію та трис(гидрооксиметил)аминометана, бицина, трицина, яблучної кислоти, сукцинату, малеїнової кислоти, фумарової кислоти, винної кислоти, аспарагінової кислоти або їх сумішей. Кожен з цих специфічних буферів становить альтернативний варіант здійснення винаходу.

У додатковому варіанті здійснення винаходу складу додатково включає фармацевтично прийнятний консервант. У додатковому варіанті здійснення винаходу коопил-п-гидроксибензоата, 2-феноксиетанолу, бутил-п-гидроксибензоата, 2-фенилэтанола, бензилового спирту, хлорбутанолу і тимеросала, бронопола, бензойної кислоти, имидомочевини, хлоргексидину, дегидроацетата натрію, хлорокрезола, етил-п-гидроксибензоата, бензетониумхлорида, хлорфенезина (3п-хлорфеноксипропан-1,2-діола) або їх сумішей. У варіанті здійснення консервантом є фенол або м-крезол. У додатковому варіанті здійснення винаходу консервант присутній в концентрації від 0,1 мг/мл до 20 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу консервант присутній в концентрації від 0,1 мг/мл до 5 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу консервант присутній в концентрації від 5 мг/мл до 10 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу консервант присутній в концентрації 10 мг/мл до 20 мг/мл Кожен з цих конкретних консервантів являє собою альтернативний варіант здійснення винаходу. Використання консерванту у фармацевтичній композиції добре відомо фахівцям в даній області. Для зручності зроблено посилання на Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995.

У додатковому варіанті здійснення винаходу складу такжбирают з групи, складається з солі (наприклад, хлориду натрію), цукру або цукрового спирту, амінокислоти (наприклад, L-гліцину, L-гістидину, аргініну, лізину, ізолейцину, аспарагінової кислоти, триптофану, треоніна), альдитола (наприклад, гліцеролу (гліцерину), 1,2-пропанедиола (пропіленгліколю), 1,3-пропандіолу, 1,3-бутандіолу), поліетиленгліколю (наприклад, PEG400) або їх сумішей. У варіанті здійснення ізотонічний агент являє собою пропіленгліколь. Можна використовувати будь-цукор, такий як моно-, ди - або полісахариди, або водорозчинні глюкани, включаючи, наприклад, фруктозу, глюкозу, маннозу, сорбозу, ксилозу, мальтозу, лактозу, сахарозу, трегалозу, декстран, пуллулан, декстрин, циклодекстрин, розчинний крохмаль, гідроксиетилкрохмаль і карбоксиметилцелюлоза-Na. В одному варіанті здійснення адитивний цукор являє собою сахарозу. Цукровий спирт визначається як C4-C8-вуглеводень, що має, принаймні, одну групу ВІН, і включає, наприклад, маніт, сорбіт, інозит, галактит, дульцит, ксиліт і арабит. В одному варіанті здійснення адитивний цукровий спирт являє собою маніт. Цукор і цукрові спирти, згадані вище, можна використовувати окремо або в комбінації. Певного обмеження�м препараті і не чинить негативного впливу на стабілізуючий ефект, досягнутий за допомогою способів винаходу. В одному варіанті здійснення, концентрація цукру або цукрового спирту знаходиться в діапазоні від приблизно 1 мг/мл до приблизно 150 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу ізотонічний агент присутній в концентрації від 1 мг/мл до 50 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу ізотонічний агент присутній в концентрації від 1 мг/мл до 7 мг/мл У варіанті здійснення винаходу ізотонічний агент присутній в концентрації від 5 мг/мл до 7 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу ізотонічний агент присутній у концентрації 8 мг/мл до 24 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу ізотонічний агент присутній в концентрації від 25 мг/мл до 50 мг/мл Кожен з цих конкретних ізотонічних агентів являє собою альтернативний варіант здійснення винаходу. Застосування ізотонічного агента фармацевтичної композиції добре відомо фахівцям в даній області. Для зручності робиться посилання на Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995.

У додатковому варіанті здійснення винаходу складу також включає комплексообразующий аендиаминтетрауксусной кислоти (ЭДТК), лимонної кислоти і аспарагінової кислоти, і їх сумішей. У додатковому варіанті здійснення винаходу комплексообразующий агент присутній в концентрації від 0,1 мг/мл до 5 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу комплексообразующий агент присутній в концентрації від 0,1 мг/мл до 2 мг/мл В додатковому варіанті здійснення винаходу комплексообразующий агент присутній в концентрації від 2 мг/мл до 5 мг/мл Кожен з цих конкретних комплексоутворюючих агентів являє собою альтернативний варіант здійснення винаходу. Використання комплексоутворюючою агента фармацевтичної композиції добре відомо фахівцям в даній області. Для зручності робиться посилання на Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995.

У додатковому варіанті здійснення винаходу складу також містить стабілізатор. Використання стабілізатора фармацевтичної композиції добре відомо фахівцям в даній області. Для зручності робиться посилання на Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995.

Зокрема, композиції з винаходу являють собою стабілізовані рідкі фармацевтичні композиції, чиї терапевтично актиия рідких фармацевтичних складів. Під «утворенням агрегатів» мається на увазі фізична взаємодія між полипептидними молекулами, що призводить до утворення олігомерів, які можуть залишатися розчинними, або великих видимих агрегатів, які випадають в осад з розчину. Під «під час зберігання» мається на увазі рідка фармацевтична композиція або складу, яка, будучи підготовленою, не відразу вводиться суб'єкту. Переважно, після підготовки її упаковують для зберігання, або у рідкому вигляді, в замороженому стані, або у висушеної формі для подальшого відновлення в рідкому вигляді або в іншій формі, придатної для введення суб'єкту. Під «висушеної формою» мається на увазі рідка фармацевтична композиція і склад, висушений або шляхом сублімаційного висушування (тобто, ліофілізації; дивись, наприклад, Williams and Polli (1984) J. Parenteral Sci. Technol. 38:48-59), висушування розпиленням (дивись Masters (1991) in Spray-Drying Handbook (5th ed; Longman Scientific and Technical, Essez, U. K.), pp. 491-676; Broadhead et al. (1992) Drug Devel. Ind. Pharm. 18:1 169-1206; і Mumenthaler et al. (1994) Pharm. Res. 11: 12-20), або висушування на повітрі (Carpenter and Crowe (1988) Cryobiology 25:459-470; і Roser (1991) Biopharm. 4:47-53). Освіта агрегатів поліпептидом під час зберігання рідкої фармацевтичної композиції може негативно позначитися �фармацевтичної композиції. Крім того, утворення агрегатів може викликати інші проблеми, такі як забруднення трубок, мембран насосів або в разі, коли поліпептид-містить фармацевтичну композицію вводять з допомогою інфузійної системи.

Фармацевтичні композиції з винаходу можуть додатково містити кількість амінокислотного підстави, достатнього для зменшення формування агрегатів поліпептидом під час зберігання композиції. Під «амінокислотним підставою» мається на увазі амінокислота або поєднання амінокислот, де будь-яка дана амінокислота присутня або у формі вільного заснування, або в своїй сольовій формі. У разі використання поєднання амінокислот, всі амінокислоти можуть бути присутніми у своїх формах вільного підстави, всі можуть бути присутніми в їх сольових формах, або деякі з них можуть бути присутніми у своїх формах вільного підстави, в той час як інші перебувають у своїх сольових формах. В одному варіанті здійснення амінокислоти, використовувані при підготовці композиції щодо винаходу, являють собою амінокислоти, несучі заряджену бічний ланцюг, як, наприклад, аргінін, лізин, аспарагінова кислота глутамінова кислота. Будь стереоизома, ізолейцину, аспарагінової кислоти, триптофану, треоніна та їх сумішей) або комбінації цих стереоизомеров можуть бути присутніми у фармацевтичних композиціях щодо винаходу, за умови, що певна амінокислота присутній у своїй формі вільного заснування, або в своїй сольовій формі. В одному варіанті здійснення використовується L-стереоизомер. Композиції з винаходу також можна складати з аналогами цих амінокислот. Під «аналогом амінокислоти» мається на увазі похідний від існуючої в природі амінокислоти, що приносить бажаний ефект зниження утворення агрегатів поліпептидом під час зберігання рідкої фармацевтичної композиції з винаходу. Відповідні аналоги аргініну включають, наприклад, аминогуанидин, орнітин і N-моноэтил L-аргінін, відповідні аналоги метіоніну включають этионин і бутионин і відповідні аналоги цистеїну включають S-метил-L-цистеїн. Як і інші амінокислоти, аналоги амінокислот включені в композиції або в своїх формах вільного заснування, або в своїх сольових формах. У додатковому варіанті здійснення винаходу, амінокислоти і аналоги амінокислот використовуються в концентрації, яка є достатньою для запобігання�етионин (або інші сірковмісні амінокислоти та аналоги амінокислот) для інгібування окиснення залишків метіоніну до метионинсульфоксида у разі, коли поліпептид, що виступає в якості терапевтичного агента, являє собою поліпептид, що включає, щонайменше, один залишок метіоніну, сприйнятливий до такого окислення. Під «інгібуванням» розуміється мінімальне накопичення різновидів окисленого метіоніну з плином часу. Інгібування окислення метіоніну призводить до більшого збереження поліпептиду в його правильної молекулярній формі. Можна використовувати будь стереоизомер метіоніну (L або D) або їх комбінації. Кількість, яку слід додати, повинно являти собою кількість, достатню для інгібування окиснення залишків метіоніну, так, що кількість метионинсульфоксида є прийнятним для регулюючих факторів. Як правило, це означає, що композиція містить не більш ніж приблизно від 10% до приблизно 30% метионинсульфоксида. У більшості випадків цього можна домогтися шляхом додавання метіоніну, так, що відношення доданого метіонін до залишків метіоніну знаходиться в діапазоні приблизно від 1:1 до приблизно 1000:1 , таке як від 10:1 до приблизно 100:1.

У додатковому варіанті здійснення винаходу складу додатково містить стабілізатор, вибраний з групи полімерів з високою мо�абилизатор вибирають з поліетиленгліколю (наприклад, ПЕГ 3350), полівінілового спирту (PVA), полівінілпіролідону, карбокси-/гидроксицеллюлози або їх похідних (наприклад HPC, HPC-SL, HPC-L і HPMC), циклодекстринів, сірковмісних речовин, як монотиоглицерин, тиогликолевой кислоти і 2-метилтиоэтанол, і різних солей (наприклад, хлористого натрію). Кожен з цих конкретних стабілізаторів являє собою альтернативний варіант здійснення винаходу.

Фармацевтичні композиції також можуть містити додаткові стабілізуючі агенти, які додатково збільшують стабільність їх терапевтично активних поліпептидів. Представляють особливий інтерес стабілізуючі агенти по справжньому винаходу включають, як неограничивающих прикладів, метіонін і ЕДТА, які захищають поліпептид від окислення метіоніну, та неіонні поверхнево-активну речовину, яка захищає поліпептид від агрегації, пов'язаної з заморожуванням-відтаванням або механічним зрушенням.

У додатковому варіанті здійснення винаходу до складу додатково входить поверхнево-активна речовина. В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтична композиція містить два різних поверхнево-активні речовини. Термін «які містять водорозчинну (гідрофільну) частина, головку і жиророзчинний (ліпофільний) сегмент. Поверхнево-активні речовини накопичуються переважно на межах розділу, при цьому гідрофільна частина орієнтована на воді (гідрофільна фаза), а липофильная частина - до масляної або гідрофобної фазі (тобто скло, повітря, масло тощо). Концентрація, при якій поверхнево-активна речовина починає формувати міцели, відома як критична концентрація міцелоутворення або ККМ. Крім того, поверхнево-активні речовини знижують поверхневий натяг рідини. Поверхнево-активні речовини також відомі як амфипатические з'єднання. Термін «детергент» є синонімом, використовуваним для поверхнево-активних речовин в цілому.

Аніонні поверхнево-активні речовини можуть бути обрані з групи: хенодезоксихолевой кислоти, натрієвої солі хенодезоксихолевой кислоти, холиевой кислоти, дигидрохолевой кислоти, дезоксихолевой кислоти, метилового ефіру дезоксихолевой кислоти, дигітоніну, дигитоксигенина, N,N-диметилдодециламин N-оксиду, докузата натрію, натрийгликохенодезоксихолевой кислоти, гликохолевой кислоти гідрату, гликодезоксихолевой кислоти моногідрату, натрієвої солі гликодезоксихолевой кислотохолевой кислоти етилового ефіру, натрієвої солі N-лауроилсаркозина, натрієвої солі N-лауроилсаркозина, N-лауроилсаркозина, N-лауроилсаркозина, додецилсульфату літію, люголя, 1-октансульфоновой кислоти натрієвої солі, 1-октансульфоновой кислоти натрієвої солі, 1-бутансульфоната натрію, 1-декансульфоната натрію, 1-додекансульфоната натрію, 1-гептансульфоната натрію, 1-гептансульфонат натрію, 1-нонансульфоната натрію, 1-пропансульфоната натрію моногідрату, 2-бромэтансульфоната натрію, холата натрію гідрату, жовчі бика або вівці, холата натрію гідрату, холеата натрію, дезоксихолата натрію, додецилсульфату натрію додецилсульфату натрію, гексансульфоната натрію, октилсульфата натрію, пентансульфоната натрію, таурохолата натрію, таурохенодезоксихолевой кислоти натрієвої солі, тауродезоксихолевой кислоти солі натрію моногідрату, тауролитохолевой кислоти 3-сульфатдинатриевой солі, тауроурсодезоксихолевой кислоти натрієвої солі, Trizma®додецилсульфату, DSS (докузата натрію, номер реєстру CAS [577-1 1-7]), докузата кальцію, номер реєстру CAS [128-49-4]), докузата калію, номер реєстру CAS [7491-09-0]), SDS (додецилсульфату натрію або лаурилсульфату натрію), додецилфосфохолина (FOS-холін-12), децилфосфохолина (FOS-холін-10), нонилфосфохолина (FOS-хол�ві поверхнево-активні речовини можна вибрати з групи: алкилтриметиламмонийбромидбензалконийхлорида, бензалконийхлорида, бензилдиметилгексадециламмонийхлорида, бензилдиметилтетрадециламмонийхлорида, бензилтриметиламмонийтетрахлориодата, диметилдиоктадециламмонийбромида, додецилэтилдиметиламмонийбромида, додецилтриметиламмонийбромида, додецилтриметиламмонийбромида, этилгексадецилдиметиламмонийбромида, гексадецилтриметиламмонийбромида, гексадецилтриметиламмонийбромида, полиоксиэтилен(10)-N-жир-1,3 - диаминопропана, тронзонийбромида та/або триметил(тетрадеціл)аммонийбромида.

Неіонні поверхнево-активні речовини можна вибрати з групи: BigCHAP, Bis(полиэтиленгликольбиспмидазоилкарбонил]), блок-кополімерів, як блок-сополімери полиэтилэноксида/полипропилэноксида, таких як полоксамери, полоксамер 188 і полоксамер 407, Brij®35, Brij®56, Brij®72, Brij®76, Brij®92V, Brij®97, Brij®58P, Cremophor®EL, декаэтиленгликольмонододецилового ефіру, N-деканоил-N-метилглюкамина, н-деканоил-N-метилглюкамида, алкилполиглюкозидов, этоксилированного касторової олії, гептаэтиленгликольмонодецилового ефіру, гептаэтиленгликольмонододецилового ефіру, гептаэтиленгликольмонотетрадецилового ефіру, гексаэтиленгликольмонододецилового ефіру, гексаэтилетрадецилового ефіру, lgepal CA-630, lgepal CA-630, Метил-6-0-(N-гептилкарбамоил)-бета-D-гликопиранозид, нонаэтиленгликольмонододецилового ефіру, N-нонаноил-N-метилглюкамина, N-нонаноил-N-метилглюкамина, октаэтиленгликольмонодецилового ефіру, октаэтиленгликольмонододецилового ефіру, октаэтиленгликольмоногексадецилового ефіру, октаэтиленгликольмонооктадецилового ефіру, октаэтиленгликольмонотетрадецилового ефіру, октил-β-D - гликопиранозида, пентаэтиленгликольмонодецилового ефіру, пентаэтиленгликольмонододецилового ефіру, пентаэтиленгликольмоногексадецилового ефіру, пентаэтиленгликольмоногексилового ефіру, пентаэтиленгликольмонооктадецилового ефіру, пентаэтиленгликольмонооктилового ефіру, полиэтиленгликольдиглицидилового ефіру, полиэтиленгликолевого ефіру W-1, полиоксиэтилен 10 тридецилового ефіру, полиоксиэтилен 100 стеарату, полиоксиэтилен 20 изогексадецилового ефіру, ефіру полиоксиэтилена 20, полиоксиэтилена 40 стеарату, полиоксиэтилена 50 стеарату, полиоксиэтилена 8 стеарату, полиоксиэтилен біс(имидазолилкарбонила), полиоксиэтилен 25 пропиленгликольстеарата, сапоніну від Quillaja bark, Span®20, Span®40, Span®60, Span®65, Span®80, Span®85, тергитола, типу 15-S-12, тергитола, типу 15-S-30, т�типу NP-40, тергитола, типу NP-7, тергитола, типу NP-9, тетрадеціл-β-D-мальтозида, тетраэтиленгликольмонодецилового ефіру, тетраэтиленгликольмонододецилового ефіру, тетраэтиленгликольмонотетрадецилового ефіру, триэтиленгликольмонодецилового ефіру, триэтиленгликольмонододецилового ефіру, триэтиленгликольмоногексадецилового ефіру, триэтиленгликольмонооктилового ефіру, триэтиленгликольмонотетрадецилового ефіру, Triton CF-21 , Triton СР-32, Triton DF-12, Triton DF-16, Triton GR-5М, Triton QS-15, Triton QS-44, Triton Х-100, Triton Х-102, Triton X-15, Triton X-151, Triton X-200, Triton X-207, Triton®X-100, Triton®X-114, розчину Triton®X-165, розчину Triton®X-305, Triton®X-405, Triton®X-45, Triton®X-705-70, TWEEN®20, TWEEN®40, TWEEN®60, TWEEN®6, TWEEN®65, TWEEN®80, TWEEN®81, TWEEN®85, тилаксопола, сфингофосфолипидов (сфінгомієлін), і сфингогликолипидов (кераміди, ганглиозиди), фосфоліпідів та/або н-ундецил β-D - гликопиранозида.

Цвиттерионние поверхнево-активні речовини можна вибрати з групи: CHAPS, CHAPSO, 3-(децилдиметиламмонио)пропансульфоната внутрішньої солі, 3-(додецилдиметиламмонио)пропансульфоната внутрішньої солі, 3-(додецилдиметиламмонио)пропансульфоната внутрішньої солі, 3-(N,N-диметилмиристиламмонио)пропансульфоната3-(N,N-диметилпальмитиламмонио)пропансульфоната, N-алкіл-N,N-диметиламмонио-1-пропансульфонатов, 3-холамидо-1-пропилдиметиламмонио-1-пропансульфоната, додецилфосфохолина, миристоиллизофосфатидилхолина, Zwittergent 3-12 (N-додецил-N,N-диметил-3-аммонио-1-пропансульфонат), Zwittergent 3-10 (3-(децилдиметиламмонио)-пропансульфоната внутрішньої солі), Zwittergent 3-08 (3-(октилдиметиламмонио)пропансульфонат), глицерофосфолипидов (лецетин, кефаліни, фосфатидилсерин), глицерогликолипидов (галактопиранозид), алкила, алкоксила (алкиловий ефір), алкокси(алкиловий ефір)-похідних лизофосфатидила і фосфатидилхолинов, наприклад, лауроилових і миристоилових похідних лизофосфатидилхолина, дипальмитоилфосфатидилхолина, і модифікацій групи полярних головок, яка являє собою холіни, этаноламини, фосфатидную кислоту, серини, треонини, гліцерин, інозит, лизофосфатидилсерин і лизофосфатидилтреонин, ацилкарнитинов і похідних, Nбета-ацильованих похідних лізину, аргініну або гістидину, або похідних лізину чи аргініну з ацилированной бічній ланцюгом, Nбета-ацильованих похідних дипептидов, що включають будь-яку комбінацію з лізину, аргініну або гістидину і нейтральній або кислій амінокислоти, Nбета-ацильованих похідних �ностно-активну речовину можна вибрати з групи похідних имидазолина, довголанцюгових жирних кислот і солей цього C6-Ci2(наприклад, олеїнової кислоти і капринової кислоти), N-гексадецил-N,N-диметил-3-аммонио-1-пропансульфоната, аніонних (алкіл-арил-сульфонати) моновалентних поверхнево-активних речовин, пальмитоиллизофосфатидил-L-серину, лизофосфолипидов (наприклад, 1-ацил-sn-глицеро-3-фосфатних ефірів етаноламіну, холіну, серину або треоніна) або їх сумішей.

Термін «алкіл-полиглюкозиди», який використовується в цьому документі, належить до лінійної або розгалуженої C520-алкільного, -алкенильной або-алкинильной ланцюга, яка заміщена однієї чи більше глюкозидними частинами, такими як мальтозид, сахарид і т. д. Варіанти здійснення цих алкіл-полиглюкозидов включають C6-18-алкилполиглюкозиди. Конкретні варіанти здійснення цих алкилполиглюкозидов включають в себе ланцюги з парним числом вуглеців, таких як алкільні ланцюги C6, C8, C10, C12, C14, C16, C18і C20. Конкретні варіанти здійснення глюкозидних частин включають пиранозид, гликопиранозид, мальтозид, мальтотриозид і сахарозу. У варіантах здійснення винаходу до алкільного групі приєднані менше 6 глюкозидних �ариантах здійснення винаходу до алкільного групі приєднані менше 4 глюкозидних частин. У варіантах здійснення винаходу до алкільного групі приєднані менше 3 глюкозидних частин. У варіантах здійснення винаходу до алкільного групі приєднані менше 2 глюкозидних частин. Конкретні варіанти здійснення алкилполиглюкозидов являють собою алкилглюкозиди, такі як н-децил β-D-гликопиранозид, децил β-D-мальтопиранозид, додецил β-D-гликопиранозид, н-додецил β-D-мальтозид, н-додецил β-D-мальтозид, н-додецил β-D-мальтозид, тетрадеціл β-D-гликопиранозид, децил β-D-мальтозид, гексадецил β-D-мальтозид, децил β-D-мальтотриозид, додецил β-D-мальтотриозид, тетрадеціл β-D-мальтотриозид, гексадецил β-D-мальтотриозид, н-додецил-сахароза, н-децил-сахароза, монокапратсахароза, монолауратсахароза, мономиристатсахароза і монопальмитатсахароза. Використання поверхнево-активної речовини у фармацевтичних композиціях добре відомо фахівцям в даній області. Для зручності дається посилання на Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, 1995.

У додатковому варіанті здійснення винаходу складу додатково включає інгібітори протеаз, такі як ЕДТА (етилендиамінтетраоцтова кислота) і бензамидин HCl, а також можна використати інші доступні інгібітор�гени протеаз, щоб інгібувати автокатализ.

Цілком можливо, що в пептидном фармацевтичному складі по справжньому винаходу можуть бути присутніми інші компоненти. Такі додаткові інгредієнти можуть включати змочувальні речовини, емульгатори, антиоксиданти, блокуючі агенти, модифікатори тонусу, комплексоутворюючі агенти, іони металів, жирні наповнювачі, білки (наприклад, сироватковий альбумін людини, желатин або білки) і цвиттерион (наприклад, амінокислота, така як бетаїн, лізин, аргінін, гліцин, лізин і гістидин). Такі додаткові інгредієнти, звичайно, не повинні негативно впливати на загальну стабільність фармацевтичного складу по справжньому винаходу.

Фармацевтичні композиції, що містять з'єднання у відповідності з цим винаходом, можна вводити пацієнту, який потребує в такому лікуванні, на кілька ділянок, наприклад, у місцеві ділянки, наприклад, ділянки шкіри і слизової оболонки, ділянки, які дозволяють уникати поглинання, наприклад, введення в артерію, вену, в серце, і ділянки, які передбачають поглинання, наприклад, введення у шкіру, під шкіру, у м'яз або у живіт.

Введення фармацевтичних композицій у відповідності з винаходом можна здійс, �ублингвальним, буккальним, в рот, пероральним, в шлунок і кишечник, назальним, пульмональним, наприклад, в бронхіоли і альвеоли або їх поєднання, эпидермальним, дермальним, трансдермальним, вагінальним, ректальним, офтальмологічним, наприклад, через кон'юнктиву, уретальним і парентеральним.

Композиції з цим винаходу можна застосовувати в декількох лікарських формах, наприклад, у вигляді розчинів, суспензій, емульсій, микроэмульсий, серійної емульсії, пен, мазей, паст, пластирів, мазей, таблеток, вкритих оболонкою таблеток, полоскань, капсул, наприклад, твердих желатинових капсул і м'яких желатинових капсул, супозиторіїв, ректальних капсул, крапель, гелів, спреїв, порошку, аерозолів, інгалянтів, очних крапель, очних мазей, очних полоскань, вагінальних песаріїв, вагінальних кілець, вагінальних мазей, розчину для ін'єкцій, розчинів, готуються на місці, наприклад, підготовка гелю на місці, установка на місці, преципітація на місці, кристалізація на місці, інфузійного розчину і імплантатів. Композиції з винаходу можна також змішувати з, або приєднувати, наприклад, за рахунок ковалентних, гідрофобних та електростатичних взаємодій, до носія лекарс�их засобів в цілях додаткового підвищення стабільності з'єднання по справжньому винаходу, збільшення біодоступності, збільшення розчинності, зменшення побічних ефектів, досягнення хронотерапії, добре відомої фахівцям в даній області, і збільшення комплаентности пацієнтів, або будь-якої їх комбінації. Приклади носіїв, систем доставки лікарських засобів і вдосконалених систем доставки лікарських засобів включають, як неограничивающих прикладів, полімери, наприклад, целюлозу та похідні, полісахариди, наприклад декстран і похідні, крохмаль та його похідні, полівініловий спирт, акрилатні і метакрілатних полімери, полимолочную і полигликолевую кислоти та їх блок-сополімери, полиэтиленгликоли, білки-носії, наприклад, альбумін, гелі, наприклад, системи термогелей, наприклад, блок co-полімерні системи, добре відомі фахівцям в даній області, міцели, ліпосоми, мікросфери, наночастинки, рідкі кристали та дисперсії цього, фаза L2 і дисперсія цього, відомі фахівцям в області поведінки фаз в ліпідів-водних системах, полімерні міцели, складові емульсії, самоэмульгирующие, самомикроэмульгирующие циклодекстрини та їх похідні, та дендримери.

Композиції з цим винаходу корисні при складанні щему винаходу, використовуючи, наприклад, дозований інгалятор, порошковий інгалятор і небулайзер, всі пристрої добре відомі фахівцям в даній області. Композиції з цим винаходу особливо корисні при формуванні керованих, стійких, пролонгованих систем доставки і систем доставки з затримкою і уповільненим вивільненням лікарського засобу. Конкретніше, як неограничивающих прикладів, композиції є корисними при формуванні систем парентерального контрольованого вивільнення і стабільного вивільнення (обидві системи, що призводять до багаторазового скорочення кількості введень), добре відомих фахівців у даній області. Навіть більш переважно, системи контрольованого вивільнення і стабільного вивільнення вводять підшкірно. Не обмежуючи сферу застосування винаходи, корисні приклади системи контрольованого вивільнення і композицій являють собою гідрогелі, маслянисті гелі, рідкі кристали, полімерні міцели, мікросфери, наночастинки. Способи створення систем контрольованого вивільнення, корисні для композицій по справжньому винаходу, включають, як неограничивающих прикладів, кристалізацію, ко�і високому тиску, інкапсуляцію, висушування розпиленням, микроинкапсуляцию, коацервацию, поділ фаз, випаровування розчинника для виробництва мікросфер, видавлювати і надкритичні флюидние процеси. Загальна посилання робиться на Handbook of Pharmaceutical Controlled Release (Wise, D. L., ed. Marcel Dekker, New York, 2000) та Drug and the Pharmaceutical Sciences vol. 99: Protein Formulation and Delivery (MacNally, E. J., ed. Marcel Dekker, New York, 2000). Парентеральне введення можна виконувати за допомогою підшкірної, внутрішньом'язової, внутрибрюшинной або внутрішньовенної ін'єкції з використанням шприца, за бажанням, шприца зразок ручки. Альтернативно, парентеральне введення можна проводити з допомогою інфузійного насоса. Іншим варіантом є композиція, яка може представляти собою розчин або суспензію, або порошок для встановлення з'єднання по справжньому винаходу у формі назальної або пульмональной рідини або порошкового спрею. В якості ще одного варіанту, фармацевтичні композиції, що містять з'єднання по винаходу, також можна адаптувати для трансдермального введення, наприклад, шляхом безголкові ін'єкції або з патча, необов'язково ионтофоретического патча, або введення через слизову, наприклад, буккально. З'єднання по справжньому винаходу можна вводити при пом� типів пристроїв, придатних для пульмональной доставки лікарських засобів. Неограничивающие приклади цього включають три основних види аерозоль-утворюючих пристроїв для пульмональной доставки лікарських засобів і можуть включати в себе струменеві або ультразвукові розпилювачі, дозовані інгалятори або порошкові інгалятори (див. Yu J, Chien YW. Pulmonary drug delivery: Physiologic and mechanistic aspects. Crit Rev Ther Drug Carr Sys 14(4) (1997) 395-453).

На основі стандартизованої методології тестування, аеродинамічний діаметр (da) частинки визначається як геометричний еквівалентний діаметр еталонних стандартних сферичних частинок одиничної густини (1 г/см3). У найпростішому випадку, для сферичних частинок, daвідноситься до еталонного діаметру (d) як функція квадратного кореня із співвідношення щільності, як описано в:

Modifications to this relationship occur for non-spherical particles (cf. Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer R. Recent advances in pulmonary drug delivery using large, porous inhaled particles. J Appl Physiol 84(2) (1998) 379-385). Терміни «MMAD» і «MMEAD» добре описані і відомі в розглянутій області (cp. Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer R and represents a measure of the median value of an aerodynamic particle size distribution. Recent advances in pulmonary drug delivery using large, porous inhaled particles. J Appl Physiol 84(2) (1998) 379-385). Масовий середній аеродинамічний діаметр (MMAD) і масовий середній� параметри та емпірично описують розмір аерозольних частинок, щодо їх потенційної можливості осадження в легенях, незалежно від фактичної форми, розміру і щільності (пор. Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer R. Recent advances in pulmonary drug delivery using large, porous inhaled particles. J Appl Physiol 84(2) (1998) 379-385). MMAD зазвичай обчислюють за вимірюванням, проведеним з використанням інерційного сепаратора, інструменту, який вимірює інерційне поведінку частинок в повітрі. У додатковому варіанті здійснення, склад можна переводити в аерозольний стан за допомогою будь-якої відомої технології аэрозолизации, такий як аерозольне розпилення, для досягнення MMAD аерозольних частинок менше 10 мкм, більш переважно, від 1 до 5 мкм, і найбільш переважно від 1 до 3 мкм. Бажаний розмір частинок заснований на найбільш ефективному розмірі для доставки лікарського засобу в глибину легенів, де білок оптимально всмоктується (cp. Edwards DA, Ben-Jebria A, Langer A Recent advances in pulmonary drug delivery using large, porous inhaled particles. J Appl Physiol 84(2) (1998) 379-385).

Осадження в глибині легких пульмональних складів, що містять з'єднання по справжньому винаходу, можна необов'язково додатково оптимізувати за допомогою модифікацій методик інгаляції, таких як, як неограничивающих прикладів: повільний інгаляційний потік (�ится до складу зі збільшеною фізичною стабільністю, збільшеною хімічною стабільністю або збільшеними фізичної і хімічної стабильностями.

Термін «фізична стабільність» білкового складу, що використовується в цьому документі, стосується схильності білка утворювати біологічно неактивні та/або нерозчинні агрегати білка в результаті впливу на білок термо-механічних навантажень та/або взаємодії з межами розділу і поверхнями, які є дестабілізуючими, як, наприклад, гідрофобні поверхні кордону розділу. Фізична стабільність водних білкових сполук оцінюється шляхом візуального огляду та/або вимірювання каламутності після витримування складу, поміщеного у відповідні контейнери (наприклад, картриджі і флакони) для механічних/фізичних навантажень (наприклад, збовтування) при різних температурах протягом різних періодів часу. Візуальний огляд складів здійснюється в сильному фокусированном світлі на темному фоні. Каламутність склад характеризується шляхом візуальної оцінки, з ранжируванням за ступенем каламутності, наприклад, за шкалою від 0 до 3 (склад, не виявляє ніякої каламутності, відповідає візуальній оцінці 0, а склад, що демонструє візуальну каламутність прнии агрегації білків, якщо він демонструє візуальну каламутність при денному світлі. Альтернативно, каламутність складу можна оцінювати шляхом простого вимірювання каламутності, добре відомого фахівцям в даній області. Фізичну стабільність водних білкових сполук можна також оцінювати з допомогою спектроскопічного агента або зонда конформационного стану білка. Зонд являє собою переважно малу молекулу, яка в першу чергу пов'язується з відмінним від нативного конформером білка. Одним прикладом мало-молекулярного спектроскопічного зонда на структуру білка є тиофлавин Т. Тиофлавин T являє собою флуоресцентний барвник, який широко використовується для виявлення амілоїдних фібрил. У присутності фібрил, і, можливо, також інших білкових конфігурації, тиофлавин T дає початок новому максимуму збудження при приблизно 450 нм і розширеній емісії при приблизно 482 нм у випадку, коли пов'язаний з фибриллярной білкової формою. Незв'язаний тиофлавин T, по суті, не є флюоресцирующим при цих довжинах хвиль.

Інші малі молекули можуть бути використані в якості зондів змін у структурі білків від нативного стану до стану, відмінного від рофобними пэтчами білка. Гідрофобні пэтчи, як правило, втоплені в третинній структурі білка в його нативному стані, але стають експонованими в міру того, як білок починає розгортатися або денатурувати. Прикладами таких мало-молекулярних спектроскопічних зондів є ароматичні, гідрофобні барвники, такі як антрацен, акридин, фенантролин або подібні. Іншими спектроскопічними зондами є метал-амінокислотні комплекси, такі як кобальт-металеві комплекси гідрофобних амінокислот, таких як фенілаланін, лейцин, ізолейцин, метіонін і валін або подібні.

Термін «хімічна стабільність» білкового складу, що використовується в цьому документі, відноситься до хімічних ковалентним змін білкової структури, що ведуть до утворення продуктів хімічної деградації з потенційно меншою біологічною активністю і/або потенційно збільшеними імуногенними властивостями в порівнянні зі структурою нативного білка. Різні продукти хімічної деградації можуть утворюватися в залежності від типу і природи нативного білка і навколишнього середовища, впливу якої білок піддається. Усунення хімічної деградації, найбільш ймовірно, не вдасться полн� і застосування білкового складу, як відомо фахівцям в даній області. Більшість білків мають схильність до дезамидированию, процесу, в якому амідна група бічного ланцюга залишків глутаміну або аспарагіну гідролізується з утворенням вільної карбонової кислоти. Інші шляхи деградації передбачають формування трансформованих продуктів з високою молекулярною масою, де дві або більше білкових молекул ковалентно зв'язуються один з одним через переамидирование та/або дисульфідні взаємодії, приводячи до утворення ковалентно зв'язаного димерного, олігомерного і полімерного продукту деградації (Stability of Protein Pharmaceuticals, Ahem. T. J. & Manning M. C, Plenum Press, New York 1992). Окислення (наприклад, залишків метіоніну) можна назвати ще одним варіантом хімічної деградації. Хімічна стабільність білкових сполук може бути оцінена шляхом вимірювання кількості продуктів хімічної деградації в різних часових точках після витримки при різних умовах навколишнього середовища (утворення продуктів деградації часто може бути прискорене шляхом, наприклад, збільшення температури). Кількість кожного окремого продукту деградації часто визначається шляхом виділення продуктів деградації в залежності від розміру Ѐов та/або ОФ-ВЕРХ).

Таким чином, як вже говорилося вище, «стабілізований склад» відноситься до складу зі збільшеною фізичною стабільністю, підвищеною хімічною стабільністю або збільшеною фізичної і хімічної стабільністю. У більшості випадків, склад повинен бути стабільним під час застосування та зберігання (у відповідності з рекомендованими умовами застосування і зберігання) до закінчення терміну придатності.

В одному варіанті здійснення винаходу фармацевтичний склад, що містить з'єднання по справжньому винаходу, є стабільним протягом більше ніж 6 тижнів використання і протягом більш ніж 3 років зберігання.

В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтичної склад, що містить з'єднання по справжньому винаходу, є стабільним протягом більш ніж 4 тижнів використання і протягом більш 3 років зберігання. У додатковому варіанті здійснення винаходу фармацевтичний склад, що містить з'єднання по справжньому винаходу, є стабільним протягом більш ніж 4 тижнів використання і протягом більше двох років зберігання.

Ще В одному варіанті здійснення винаходу фармацевтичний склад, що містить з'єднання по справжньому зображе�

В іншому аспекті даний винахід відноситься до використання з'єднання у відповідності з винаходом для приготування ліків.

Справжній винахід також включає сольову форму аналогів GLP-1. Аналог GLP-1 щодо винаходу може бути достатньо кислим або достатньо основним, щоб реагувати з яким-небудь з ряду неорганічних основ і неорганічних кислот з утворенням солі. Кислоти, які зазвичай використовуються для утворення солей з додаванням кислоти, являють собою неорганічну кислоти, такий як соляна кислота, бромистоводородная кислота, йодистоводородная кислота, сірчана кислота, фосфорна кислота і тому подібне, і органічні кислоти, такі як п-толуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, щавлева кислота, п-бромфенил-сульфоновая кислота, вугільна кислота, янтарна кислота, лимонна кислота, бензойна кислота, оцтова кислота тощо. Приклади таких солей включають сульфат, гідросульфат, бісульфат, сульфіт, бісульфат, фосфат, моногидрогенфосфат, дигидрогенфосфат, метафосфат, пірофосфат, хлорид, бромід, йодид, пропіонат, деканоат, каприлат, акрилат, форміат, изобутират, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, фумар, �етоксибензоат, фталат, сульфонал, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенілпропіонат, фенилбутират, цитрат, лактат, гамма-гідроксибутират, гліколят, тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафталін-1-сульфонат, нафталін-2-сульфонат, сіль мигдальної кислоти тощо. Кращі кислотно-адитивні солі являють собою солі, утворені за допомогою мінеральних кислот, таких як соляна кислота і бромистоводородная кислота, і, особливо, соляна кислота.

Основно-адитивні солі включають солі, одержані з неорганічних основ, таких, як гідроксиди амонію або лужних або лужноземельних металів, карбонати, бікарбонати тощо. Такі підстави, корисні при підготовці солей по справжньому винаходу, таким чином, включають гідроксид натрію, гідроксид калію, гідроксид амонію, карбонат калію тощо. Особливо бажаними є сольові форми аналогів GLP-1. Зрозуміло, коли з'єднання по справжньому винаходу використовуються для терапевтичних цілей, ці сполуки також можуть бути у формі солі, а сіль повинна бути фармацевтично прийнятною.

Модифіковані аналоги GLP-1 щодо винаходу знаходять численні застосування, в тому ч�олеваний нервової системи, застосування за індукування анксіолітичної дії на ЦНС, застосування для активації ЦНС, застосування для післяопераційного лікування і в якості засобу для лікування інсулінорезистентності.

А. Лікування цукрового діабету

Модифіковані аналоги GLP-1 щодо винаходу, як правило, нормалізують гіперглікемію через посередництво глюкозозависимих механізмів. Як такі, модифіковані аналоги GLP-1 корисні в якості первинних агентів для лікування цукрового діабету II типу і в якості додаткових агентів для лікування цукрового діабету I типу.

Використання ефективного кількості модифікованих аналогів GLP-1 в якості засобу для лікування цукрового діабету має перевагу перед немодифікованим GLP-1 як більш ефективний засіб. Оскільки модифіковані аналоги GLP-1 є більш стабільними in vivo, для ефективного лікування можна вводити меншу кількість молекул. Даний винахід особливо підходить для лікування пацієнтів з цукровим діабетом, як типу I, так і II типу, оскільки дія пептидів залежить від концентрації глюкози в крові і, таким чином, ризики розвитку гіпоглікемічних побічних ефектів значно скорочено порівняно з ризиками при ісп�рного діабету у індивідуума, де зазначений спосіб включає надання кількості модифікованих аналогів GLP-1, достатнього для лікування діабету; де композиція містить модифікований аналог GLP-1.

B. Лікування захворювань нервової системи

Модифіковані аналоги GLP-1 щодо винаходу також знаходять застосування в якості заспокійливого засобу. В одному аспекті винаходу, надано спосіб заспокоєння суб'єкта-ссавця з порушенням, що призводить в результаті до посиленої активації центральної або периферичної нервової системи, з застосуванням модифікованих аналогів GLP-1 до суб'єкту в кількості, достатній для надання заспокійливого і анксіолітичної дії на суб'єкта. Модифіковані аналоги GLP-1 можна вводити интрацеребровентрикулярно, перорально, підшкірно, внутрішньом'язово або внутрішньовенно. Такі способи корисні для лікування і поліпшення стану нервової системи, таких як тривога, розлад рухів, агресія, психоз, судоми, напади паніки, істерія і розлад сну.

У подібному аспекті, винахід включає в себе спосіб підвищення активності суб'єкта-ссавця, що включає введення модифікованих аналогів GLP-1 суб'єкту в кількості, достатній для опини�ижению активації центральної або периферичної нервової системи. Модифіковані аналоги GLP-1 знаходять застосування, зокрема, для лікування або полегшення депресії, шизоаффективних розладів, апное уві сні, синдрому дефіциту уваги з поганою концентрацією, втрати пам'яті, забудькуватості і нарколепсії, щоб назвати декілька станів, при яких збудження центральної нервової системи може бути корисно.

Модифіковані аналоги GLP-1 щодо винаходу можна використовувати, щоб викликати збудження для лікування або полегшення депресії, шизоаффективних розладів, апное уві сні, синдрому дефіциту уваги з поганою концентрацією, втрати пам'яті, забудькуватості і нарколепсії. Терапевтичну ефективність лікування модифікованими аналогами GLP-1 можна контролювати за допомогою інтерв'ю з пацієнтом, щоб оцінити їх стан, за допомогою психологічного/неврологічного тестування або щодо поліпшення симптомів, пов'язаних з цими умовами. Наприклад, за допомогою моніторингу поширення нарколептических атак можна оцінювати лікування нарколепсії. В якості ще одного прикладу: вплив модифікованих аналогів GLP-1 на здатність суб'єкта до концентрації, або на можливості пам'яті, можна перевірити з допомогою будь-якого з ряду діагностично�довелося аналоги GLP-1 щодо винаходу можна застосовувати для післяопераційного лікування. Пацієнт потребує модифікованих аналогах GLP-1 по справжньому винаходу приблизно за 1-16 год до проведення операції на пацієнта, під час операції на пацієнта і після операції на пацієнта протягом періоду не більше 5 днів.

Модифіковані аналоги GLP-1 по справжньому винаходу вводять приблизно за шістнадцять годин до приблизно однієї години до початку операції. Проміжок часу до операції, протягом якого з'єднання, використовувані в цьому винаході, слід вводити в цілях зменшення катаболічних ефектів і резистентності до інсуліну, залежить від ряду факторів. Ці фактори, як правило, відомі будь-якому лікареві і включають, найголовніше, голодує пацієнт або отримує глюкозу у вигляді інфузії або напою або якій-небудь іншій формі харчування протягом підготовчого періоду перед операцією. Інші важливі фактори включають стать, масу та вік пацієнта, ступінь тяжкості будь нездатність регулювати рівень глюкози в крові, основні причини нездатності регулювати рівень глюкози в крові, передбачувану тяжкість травми, викликаної хірургічною операцією, спосіб введення та біодоступність, стабільність в організмі, склад, активність сполук. Предпочтит�зуемих у цьому винаході, становить приблизно від однієї години до приблизно десяти годин до початку хірургічної операції. Найбільш бажаний інтервал для початку введення становить від двох годин до восьми годин до початку хірургічної операції.

Інсулінорезистентність після певного типу хірургії, планової абдомінальної хірургії, є найглибшою в перший післяопераційний день, триває, щонайменше, п'ять днів і може зайняти до трьох тижнів до нормалізації. Таким чином, післяопераційний пацієнт може потребувати введення модифікованих аналогів GLP-1, що використовуються у цьому винаході протягом певного періоду часу після травми від хірургічної операції, яка буде залежати від факторів, голодує пацієнт або отримує глюкозу у вигляді інфузії або напою або якій-небудь іншій формі харчування після хірургічної операції, а також, як неограничивающих прикладів, від підлоги, маси та віку пацієнта, ступеня тяжкості будь нездатність регулювати рівень глюкози в крові, основних причин нездатності регулювати рівень глюкози в крові, передбачуваної тяжкості травми, викликана хірургічною операцією, способу введення та біодоступності, стабільності в �ий, використовуються в цьому винаході, становить не більше ніж п'ять днів після операції.

D. Лікування інсулінорезистентності

Модифіковані аналоги GLP-1 щодо винаходу можна застосовувати для лікування інсулінорезистентності незалежно від їх використання в післяопераційному лікуванні. Інсулінорезистентність може бути викликана зменшенням зв'язування інсуліну з рецепторами на поверхні клітин або зміною внутрішньоклітинного метаболізму. Перший тип, що характеризується як зниження чутливості до інсуліну, як правило, можна подолати шляхом збільшення концентрації інсуліну. Другий тип, який характеризується як ослаблення реагування на інсулін, не може бути подолана за рахунок великої кількості інсуліну. Інсулінорезистентність після травми може долатися за допомогою доз інсуліну, які пропорційні ступеня інсулінорезистентності, і, таким чином, очевидно, що вона зумовлена зниженням чутливості до інсуліну.

Доза модифікованих аналогів GLP-1, ефективна для нормалізації рівня глюкози в крові пацієнта, буде залежати від ряду факторів, які включають, як неограничивающих прикладів, стать, масу та вік пацієнта, ступінь тяжкості люб�глюкози в крові, передбачувану тяжкість травми, викликаної хірургічною операцією, спосіб введення та біодоступність, стабільність в організмі, склад, активність.

Здатність аналогів GLP-1 стимулювати секрецію інсуліну можна визначити шляхом надання аналога GLP-1 для культивованих клітин тварин, таких, як клітинна лінія RIN-38 інсуліноми щури, і контролю вивільнення імунологічно реактивного інсуліну (ІРІ) в середу. В якості альтернативи можна ін'єктувати аналог GLP-1 в тварину і контролювати рівень імунологічно реактивного інсуліну (ІРІ) в плазмі.

Присутність ІРІ детектують з допомогою радиоиммуноанализа, який може специфічно детектувати інсулін. Можна використовувати будь радіоімунологічних аналіз, здатний виявляти присутність ІРІ; один такий аналіз є модифікацією способу Albano,J. D. M. et al., Acta Endocrinol, 70: 487-509 (1972). У цій модифікації використовується фосфат/альбуминовий буфер з рН 7,4. Інкубацію готують з послідовним додаванням 500 мкл фосфатного буфера, 50 мкл перфузируемого зразка або інсулінового стандарту щури в перфузате, 100 мкл антисироватки проти інсуліну (Wellcome Laboratories; розведення 1:40000) та 100 мкл [125I] інсуліну, із загальним обсягом �еляют від пов'язаного з антитілом інсуліну за допомогою вугільної сепарації. Чутливість аналізу становить 1-2 uU/мл Щоб виміряти вивільнення ІРІ в культуральне клітинну середовище клітин, вирощених в культурі тканин, в проинсулин переважно включають радіоактивну мітку. Незважаючи на те, що можна використовувати будь-які радіоактивні мітки, здатні маркувати поліпептид, для отримання міченого проінсуліна переважно використовувати3H-лейцин.

Визначення того, чи володіє аналог GLP-1 инсулинотропними властивостями, також можна проводити за допомогою панкреатичної інфузії. In situ-аналіз ізольованою підшлункової залози перфузійних щурів є модифікацією способу Penhos, J, C., et al., Diabetes, 18: 733-738 (1969). Голодуючих самців білих щурів лінії Чарльз-Рівер масою 350-600 г анастезировали внутрибрюшинной ін'єкцією Amytal Sodium (Eli Lilly and Co, 160 нг/кг). Кровоносні судини нирок, надниркових залоз, шлунка та нижнього відділу товстої кишки перев'язували. Весь кишечник видаляли, за винятком приблизно чотирьох сантиметрів дванадцятипалої кишки і низхідної ободової і прямої кишки. Таким чином, тільки невелика частина кишечника є перфузійної, що зводить до мінімуму можливий вплив кишкових речовин з глюкагон-подібної иммунореактивностью. Перфузат пр�ого альбуміну (фракція V), і з продувкою 95%2і 5%2. Використовується непульсирующий потік, 4-канальний ролико-несучий насос (Buchler polystatic, Buchler Instruments Division, Nuclear-Chicago Corp), і перехід від одного джерела перфузата до іншого здійснюється шляхом перемикання 3-ходового крана. Спосіб, яким виконується перфузія, контроль і аналіз, слід способу Weir, G. C., et at. J. Clin. Investigat. 54: 1403-1412 (1974), який включений цим документом у якості посилання.

Лікування з'єднанням у відповідності з цим винаходом також можна комбінувати з другим або кількома фармакологічно активними речовинами, наприклад, обраними з протидіабетичних засобів, засобів проти ожиріння, агентів, що регулюють апетит, антигіпертензивних засобів, засобів для лікування та/або профілактики ускладнень, викликаних або пов'язаних з діабетом, і засобів для лікування та/або профілактики ускладнень і розладів, викликаних або пов'язаних з ожирінням. Приклади цих фармакологічно активних речовин являють собою: інсулін, похідні сульфонілсечовини, бігуаніди, меглитиниди, інгібітори глюкозидази, антагоністи глюкагону, інгібітори DPP-IV (дипептидилпептидази-IV), інгібітори ферментів печінки, що беруть участь в стимуляції глюконеогенезу та/�кемические агенти, як інгібітори HMG CoA (статини), інгібуючі поліпептиди шлунка (GIP-аналоги), сполуки, що знижують засвоюваність їжі, агоністи RXR і агенти, що діють на АТФ-залежні калієві канали β-клітин, холестирамін, колестипол, клофібрат, гемфіброзил, ловастатину, правастатина, симвастатину, пробукол, декстротироксин, нетеглинид, репаглінід; β-блокатори, такі як альпренолол, атенолол, піндолол, тимолол, пропранолол і метопролол, АПФ (ангіотензинперетворюючий фермент), інгібітори, такі як беназеприл, каптоприл, еналаприл, фозиноприл, лізиноприл, алатриоприл, квинаприл і раміприл, блокатори кальцієвих каналів, такі як ніфедипін, фелодипін, нікардипін, исрадипин, німодипін, дилтіазем і верапаміл, і α-блокатори, такі як доксазозин, урапидил, празозин і теразозин; агоністи CART (кокаїн-амфетамін-регульований транскрипт), антагоністи NPY (нейропептіда Y), агоніст PYY, агоністи PYY2, агоністи PYY4, змішані агоністи PPY2/PYY4, агоністи MC4 (метанокортин 4), антагоністи орексина, агоністи TNF (фактор некрозу пухлин), агоніст CRF (кортикотропін рилізинг-фактор), антагоністи CRF BP (білок, що зв'язує кортикотропін рилізинг-фактор), агоністи урокортина, агоністи β3, агоністи MSH (меланоцит-стимулюючий гормон), антаг� поглинання, інгібітори серотоніну і норадреналіну повторного поглинання, змішані серотонін і норадренергічну з'єднання, агоністи 5HT (серотоніну), агоністи бомбезину, антагоністи галаніна, гормон росту; сполуки, що вивільняють гормон росту; агоністи TRH (тиреотропин-вивільняє гормон), модулятори UCP 2 або 3 (роз'єднуючий білок 2 або 3), агоністи лептину, DA-агоністи (бромокриптин, допрексин), інгібітори ліпази/амілази, модулятори RXR (рецептор ретиноида X), агоністи TR β; антагоністи гістаміну H3, агоністи або антагоністи інгібують поліпептидів шлунка (GIP-аналоги), гастрин і аналоги гастрину. Лікування з'єднанням у відповідності з цим винаходом можна комбінувати з хірургією - хірургією, яка впливає на рівень глюкози та/або ліпідного гомеостазу, такий як бандажування шлунка або шлунковий обхід.

Слід розуміти, що будь-яке відповідне поєднання з'єднань у відповідності з винаходом з одним або більше із зазначених вище з'єднань та, необов'язково, одним або більше додаткових фармакологічно активних речовин, розглядається в рамках цього винаходу.

Даний винахід далі ілюструється такими прикладами, які, однак, не повинні �ующих прикладах, можуть являти собою, як окремо, так і в будь-якій комбінації цього, матеріал для реалізації винаходу в різних їх формах.

У якості ілюстрації приводяться наступні приклади, що допомагають описати, як створювати і застосовувати різні варіанти здійснення винаходу. Ці приклади жодною мірою не передбачають обмеження сфери застосування винаходу.

ПРИКЛАДИ

Використані скорочення:

r.t: Кімнатна температура;

DIPEA: диизопропилэтиламин;

H2O: вода;

CH3CN: ацетонітрил;

DMF: N,N-диметилформамід;

HBTU: 2-(1Н-бензотриазол-1-іл)-1,1,3,3 тетраметилурониум гексафторфосфат;

Fmoc: 9 H-флюорен-9-илметоксикарбонил;

Вос: тре-бутилоксикарбонил;

OtBu: трет-бутиловий ефір;

-tBu: трет-бутил Trt: трифенилметил;

Pmc: 2,2,5,7,8-пентаметил-хроман-6-сульфанил;

Dde: 1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиден)етил;

ivDde: 1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиден)-3-метилбутил;

Mtt: 4-метилтритил;

Mmt: 4-метокситритил;

DCM: дихлорметан;

TIS: триизопропилсилан;

TFA: трифторуксусная кислота;

Et2O: діетиловий ефір;

NMP: 1-метил-піролідин-2-он;

HOAt: 1-гідрокси-7-азабензотриазол;

HOBt: 1-гидроксибензотриазол;

DIC: диизопропилкарбодиимид.<чи можуть бути зручно підготовлені різними способами, відомими фахівцям в даній області. Один загальноприйнятий спосіб синтезу формули II, де X, Y і R3являють собою водень, який був описаний (S. Oishi etc., J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1, 2001, 2445), показаний на Схемі 1.

Q як, наприклад, такі формули II, є комерційно доступними, відомими в літературі або можуть бути зручно підготовлені різними способами, відомими фахівцям в даній області. Один загальноприйнятий спосіб синтезу формули II, де X являє собою фтор, а Y і R3являють собою водень, показаний на Схемі 2. Ключовою вихідний матеріал 4 є комерційно доступним, відомим у літературі (T. Narumi et al., Tetrahedron, 2008, 64, 4332)

Q як, наприклад, такі формули IIIa, є комерційно доступними, відомими в літературі або можуть бути зручно підготовлені різними способами, відомими фахівцям в даній області. Один загальноприйнятий спосіб синтезу формули III, де X являє собою трифлуорометил, Z являє собою азот, Y, R1, R2і R3являють собою водень, показаний на Схемі 3. Ключовою вихідний матеріал 3,3,3-трифлуорол-нитропропен 6 є коммерч�пропену 6 здійснюють стереоадаптерним способом (M. Molteni et al., Org. Lett., 2003, J, 3887).

Q як, наприклад, такі формули IIIb, є комерційно доступними, відомими в літературі або можуть бути зручно підготовлені різними способами, відомими фахівцям в даній області. Один загальноприйнятий спосіб синтезу формули III, де X являє собою трифлуорометил, Z являє собою азот, R2являє собою алкіл, Y, R1і R3являють собою водень, показаний на Схемі 4. Вихідний матеріал 10 є комерційно доступним, відомим у літературі (Andre J. et al., Eur. J. Org. Chem. 2004, 1558). Ключова стадія передбачає стереоспецифичное заміщення SN2 трифлата 11 диэфиром глутамінової кислоти 7 (P. o'shea et al., J. Org. Chem. 2009, 5, 1605).

Альтернативно, Q як, наприклад, такі формули IIIb, готують за допомогою ще одного синтетичного способу, де X являє собою трифлуорометил, Z являє собою азот; R2являє собою алкіл, Y, R1і R3являють собою водень, показаного на Схемі 5. Ключовою вихідний матеріал 10 (Andre J. et al., Eur. J. Org. Chem. 2004, 1558) окислюють з утворенням трифлуорометилкетона 13. Наступним утворенням іміну завершують наявність� або боргідрідом цинку, з утворенням шуканих диастерических ізомерів 12 і 15 А (G. Huges et al., Angew Chem. Int. Ed. 2007, 46, 1839).

Альтернативно, Q як, наприклад, такі формули IIIb, готують за допомогою ще одного синтетичного способу, де X являє собою трифлуорометил, Z являє собою азот; R2являє собою алкіл, Y, R1і R3являють собою водень, показаного на Схемі 6. Конденсація відомого вихідного матеріалу диамина 16 (M. Mandal et al., J. Am Chem. Soc. 2002, 6538) альдегидом 17 дає имин 18. Наступною диастереоселективной реакцією іміну Strecker-типу 18 з TMSCN завершують наявність каталітичного кількості кислоти Льюїса. Заключна стадія включає в себе гідроліз ціано-інтермедіату з утворенням диастерического ізомеру 12 А (F. Huguentt et al., J. Org. Chem. 2006, 71, 7075).

Q як, наприклад, такі формули IV є комерційно доступними, відомими в літературі або можуть бути зручно підготовлені за допомогою різних способів, відомих фахівців у даній області. Один загальний спосіб синтезу сполук з формулою IV, де X являє собою кисень; Z являє собою вуглець; R2являє собою алкіл, W, Y, R1і R39щоб надати кетометиленизоэфир 21 (R. Hoffman et al., J. Org. Chem. 1999, 64, 1558, P. S. Dragovich et al., J. Med. Chem. 1999, 42, 1203).

Q як, наприклад, такі формули IV, де X являє собою кисень; Z являє собою вуглець; R2являє собою алкіл, W являє собою фтор; Y, R1і R3являють собою водень, є комерційними доступними, відомими в літературі або можуть бути зручно підготовлені різними способами, відомими фахівцям в даній області. Один загальний спосіб синтезу таких формули IV показаний на Схемі 8. Вихідний матеріал тритилированний β-кетоэфир 22 є комерційно доступним, або готується за даними літератури (R. Hoffman et al., J Org. Chem. 1999, 64, 1558). Алкілування β-кетоэфира 22 трифлатом 20, потім декарбоксилювання, щоб надати кетометиленизоэфир 23, потім 23 перетворять у відповідний Z-TMS энолэфир і фторируют Selectfluor, і остаточне зняття захисту дає монофторкетометиленизоэфир 25 (R. Hoffman et al., J. Org. Chem. 1999, 64, 1558, P. S. Dragovich et al., J. Med. Chem. 1999, 42, 1203).

Захищені амінокислоти активують дихлорметане (DCM) половиною еквівалента дициклогексилкарбодиимида (DCC) на еквівалент амінокислоти c освітою симетричного ангідриду амінокислоти. Однак, залишки аргініну, глютамина і гліцину активують при формуванні 1-гидроксибензотриазолових (HOBt) ефірів цих амінокислот (1:1:1 еквіваленти амінокислоти, HOBt і DCC диметилформамиде (DMF)).

Залишки послідовно з'єднують від C-кінця до N-кінця серіями циклів приєднання і зняття захисних груп. Цикл приєднання складається з активованих амінокислот, що піддаються нуклеофільного заміщення вільним первинним аміном раніше приєднаної амінокислоти. Зняття захисних груп являє собою заміщення N-кінцевий блокуючої групи Boc безводній тріфторуксусной кислотою (TFA). Це генерує вільну аміногрупу після нейтралізації диизопропилэтиламином (DIEA).

Шкала синтезу становить 0,5 ммоль. Концентрація функціональних участь�го ангідриду використовували для всіх амінокислот. C-кінцевий аргінін приєднують до MBHA-смола за допомогою стандартного протоколу. Всі залишки є двічі сполученими. Тобто кожен залишок з'єднаний зі смолою два рази, щоб забезпечити повну реакцію NH2-групи на смолі. Друге приєднання здійснюють без стадії зняття захисної групи Boc перед повторним додаванням амінокислоти. Це сприяє тому, щоб всі деревоподібні аміногрупи смоли повністю прореагували. Залишок триптофану з'єднаний чотири рази. Після другої стадії приєднання кожного циклу подвійного приєднання кінцеві Boc-групи видаляють безводній тріфторуксусной кислотою і нейтралізують DIEA.

Формильную групу, яка блокує бічну ланцюг залишку триптофану, видаляють пиперидином в DMF до відділення пептиду від смоли. Після перенесення пептидил-смоли в воронку спеченого скла об'ємом 50 мл її промивають кілька разів DCM і DMF. Потім 3-5 мл розчину пиперидин/DMF (50/50) додають до пептидного смолі, так щоб її просто покрити. Через 5 хвилин пиперидин/DMF видаляють під вакуумом і додають 3-5 мл пиперидин/DMF. Через 10 хвилин пиперидин/DMF знову видаляють шляхом вакуумної фільтрації і додають 15-20 мл пиперидин/DMF. Через 15 хвилин пиперидин/DMF видаляють, а пептидил-смолу промивають несворителя.

Альтернативно, необхідний полімер-пов'язаний пептидний фрагмент також може бути підготовлений з допомогою Fmoc-захисту. Смола Rink Amide MB HA, Fmoc-захищені амінокислоти, O - бензотриазол-1-іл-N,N,N',N'-тетраметил-урониум гексафторфосфат (HBTU) в розчині N,N-диметилформамід (DMF) і активація N-метил морфолінами (NMM), і зняття захисних груп Fmoc пиперидином (Стадія 1). При необхідності, селективне зняття захисної групи Lys(Aloc) виконували вручну і завершували шляхом обробки смоли розчином 3 еквівалентів Pd (PPh3)4, розчиненого у 5 мл CHCl3: NMM:HOAc (18:1:0,5) протягом 2 год. (Стадія 2). Смолу потім промивали CHCl3(6×5 мл), 20% HOAc в DCM (6×5 мл), DCM (6×5 мл) і DMF (6×5 мл). У деяких випадках, синтез був повторно автоматизований для додавання однієї AEEA (аминоэтоксиэтоксиуксусная кислота) групи, додавання оцтової кислоти або додавання 3-малеинимидопропионовой кислоти (MPA) (Стадія 3). Відщеплення від смоли і виділення продукту виконували за допомогою 85% TFA/5% TIS/5% тиоанизола і 5% фенолу, з подальшим осадженням у холодному сухому льоду з Et2O (Стадія 4). Продукти очищали препаративної обращенно-фазної ВЕРХ з використанням Varian (Rainin) препаративної бінарної ВЕРХ-системи: градієнт елюції 30-55%B (0,045% TFA в H2O (A) і 0,045% TFA в CH3CNи 214 і 254 нм. Чистота була визначена як 95% при допомоги обращенно-фазної-ВЕРХ мас-спектрометрії з використанням спектрометра Hewlett Packard LCMS-1100 series, оснащеним діодно-матричним детектором, і з допомогою іонізації електро-уприскування.

Захисні групи представляють собою хімічні функціональні групи, що використовуються для захисту пептидних похідних від взаємодії з самими собою. Такі захисні групи включають ацетил, флюоренилметилоксикарбонил (FMOC), т-бутилоксикарбонил (Boc), бензилоксикарбонил (CBZ) тощо. Конкретні захищені амінокислоти представлені в Таблиці 1.

ТАБЛИЦЯ 1
ПРИРОДНІ АМІНОКИСЛОТИ ТА ЇХНІ АБРЕВІАТУРИ
НАЗВА3-буквена абревіатура1-буквена абревіатуразахищені амінокислоти
АланінAlaAFmoc-Ala-OH
АргінінArgRNFmoc-Asn (Trt)-OH
Аспарагінова кислотаAspDFmoc-Asp (tBu)-OH
ЦистеїнCysCFmoc-Cys (Trt)-OH
Глутамінова кислотаGluEFmoc-Glu (tBu)-OH
ГлутамінGlnQFmoc-Gln(Trt)-OH
ГліцинGlyGFmoc-Gly-OH
ГістидинHisHFmoc-His(Trt)-OH
ІзолейцинIleIFmoc-Ile-OH
ЛейцинLeuLFmoc-Leu-OH
ЛізинMetMFmoc-Met-OH
ФенілаланінPheFFmoc-Phe-OH
ПролінProPFmoc-Pro-OH
СеринSerSFmoc-Ser (tBu)-OH
ТреонінThrTFmoc-Thr (tBu)-OH
ТриптофанTrpWFmoc-Trp(Boc)-OH
ТирозинTyrYBoc-Tyr(tBu)-OH
ВалінValVFmoc-Val-OH

Q-лінкер-a: Отримання 2S,5R-2-(3-трет-бутоксикарбониламино-бут-1-енил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру

2S,5R-2-(3-трет-буто�45) (370 мг, 1 ммоль) в метанолі (2 мл) обробляють LiOH (1М, 2 мл) при кімнатній температурі протягом 1 години. Більшу частину розчинника упарюють під вакуумом, розводять водою (10 мл) і доводять рН до 5 і водний шар екстрагують етилацетатом (3 × 30 мл), щоб одержати зазначений у заголовку продукт в якості плівки (320 мг, 90%).

1H ЯМР δ 5,43 (м, 1Н), 5,33 (дд, J=15,5, 5,2 Гц, 1Н), 4,59 (д, J=7,6 Hz, 1H), 3,88 (м, 1Н), 2,91 (м, 1Н), 2,25 (м, 2Н), 1,91-2,04 (м, 1Н), 1,67-1,80 (м, 1Н), 1,57 (з, 9H), 1,47 (з, 9H), 1,14 (д, J=6,7 Гц, 3Н). LCMS 358(М++1).

Q-лінкер-b: Отримання 2S,5R-2-(3-трет-бутоксикарбониламино-2-фтор-бут-1-енил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру

Стадія А: Отримання 2S,5R-2-(3-трет-бутоксикарбониламино-2-фтор-бут-1-енил)-глутаровой кислоти 1-(S) сультама

До 5-трет-бутоксикарбониламино-4-фтор-2-(3-гідрокси-пропіл)-гекс-3-еноевой кислоти (S) сультаму (Tetrahedron, 2008, 64, 4332) (502 мг, 1 ммоль) в DMF (5 мл) додають PDC (пиридинийдихромат, 2,5 ммоль), і отриманий розчин перемішують при rt протягом 64 годин. Реакційну суміш розбавляють соляним розчином (20 мл) і екстрагують етилацетатом (3 × 20 мл). Об'єднані органічні екстракти висушують над MgSO4і розчинник випаровують при зниженому тиску. Осад очищають за допомогою випарної коло�адія В: Отримання 2S,5R-2-(3-трет-бутоксикарбониламино-2-фтор-бут-1-енил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру 1-(S) сультама

2S,5R-2-(3-трет-бутоксикарбониламино-2-фтор-бут-1-енил)-глутаровой кислоти 2-(S) сультам зі Стадії А (400 мг, 0,75 ммоль) в дихлорметане (10 мл) обробляють трет-бутанолом (0,5 мл, 10 перебалтиваний), DCC (1,5 ммоль) і DMAP (1,5 ммоль). Реакційну суміш перемішують 24 години перед розведенням соляним розчином (20 мл), екстрагують етилацетатом (3 × 20 мл). Об'єднані органічні екстракти висушують над MgSO4і розчинник випаровують при зниженому тиску. Осад очищають за допомогою випарної колони, щоб отримати трет-бутиловий ефір в якості плівки (425 мг, 79%).1Н ЯМР δ 5,33 (м, 1Н), 4,54 (м, 1Н), 3,88 (м, 1Н), 3,37 (з, 2Н), 3,23 (м, 1Н), 2,25 (м, 2Н), 1,91-2,14 (м, 4Н), 1,67-1,80 (м, 5H), 1,57 (з, 9H), 1,47 (д, J=7,6 Гц, 3Н), 1,18 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н). LCMS 574 (M++1).

Стадія З: Отримання 2S,5R-2-(3-трет-бутоксикарбониламино-2-фтор-бут-1-енил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру

До розчину трет-бутилового ефіру зі Стадії B (410 мг, 0,72 ммоль) і водної 50% H2O2(260 мл, 3,6 ммоль) в THF-H2O (5:1, 12 мл) при 0ºC додають LiOH (1N, 1,44 мл), і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 2 год. Після доведення рН до 5, суміш екстрагують етилацетатом (3 × 15 мл). Об'єднані органічні екстракти промивають сольовим розчином і висушують над MgSO4. Расг, 95%).1Н ЯМР δ 5,23 (м, 1Н), 4,45 (м, 1Н), 3,11 (м, 1Н), 2,45 (м, 2Н), 2,24 (м, 2Н), 1,52 (з, 9H), 1,47 (з, 9Н). LCMS 376 (M++1).

Q-лінкер-c: Отримання 2S,5R-2-[1-трет-бутоксикарбониламино-метил)-2,2,2-трифтор-этиламино]-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру

Стадія А: Отримання 2S,5R-2-[1-трет-бутоксикарбониламино-метил)-2,2,2-трифтор-этиламино]-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру 1-метилового ефіру

До розчину гидрохлоридной солі 2-(1-Амінометил-2,2,2-трифтор-етиламін)- глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру 1-метилового ефіру (Org. Lett., 2003, 5, 3887) (364 мг, 1 моль) і Boc2O (260 мг, 1,2 ммоль) в дихлорметане (15 мл) при 0ºC додають розчин DIPEA (0,2 мл, 1,5 ммоль) в дихлорметане (1 мл), і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 6 ч. Суміш розводять етилацетатом (30 мл). Суміш промивають 0,1 N HCl, розчином солі і висушують над MgSO4. Розчинник випаровують при зниженому тиску і потім FC, щоб отримати відповідний диэфир, як плівки (420 мг, 85%).1Н ЯМР δ 4,54 (м, 1Н), 4,12 (м, 1Н), 3,68 (с, 3Н), 3,45 (м, 1Н), 3,11 (м, 2Н), 2,45 (м, 2Н), 2,24 (м, 2Н), 1,52 (з, 9H), 1,47 (з, 9Н). LCMS 430 (M++1), 330 (M+1-трет-Bu).

Стадія: Отримання 2S,5R-2-[1-трет-бутоксикарбониламино-метил)-2,2,2-трифтор-этиламино]-глутаровой кислоти 5-ри 0ºC додавали LiOH (1N, 1,44 мл), і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 2 год. Після доведення рН до 5, суміш екстрагують етилацетатом (3 × 15 мл). Об'єднані органічні екстракти промивають розчином солі і висушують над MgSO4. Розчинник випаровують при зниженому тиску, щоб отримати відповідну кислоту в якості плівки (362 мг, 92%).1Н ЯМР δ 4,50 (м, 1Н), 4,08 (м, 1Н), 3,45 (м, 1Н), 3,11 (м, 2Н), 2,45 (м, 2Н), 2,24 (м, 2Н), 1,52 (з, 9H), 1,47 (з, 9Н). LCMS 430 (M++1), 330 (M+1-трет-Bu).

Q-лінкер-d: Отримання 2R-2-(1S,2S-2-[1-трет-бутоксикарбониламино-1-трифтор-метил-пропиламино)-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру

Стадія А: 2S,3S-3-дибензиламино-1-1,1-трифторбутан-2-трифторметансульфонат

До розчину 2S,3S-3-дибензиламино-1-1,1-трифтор-бутан-2-олу (Eur. J. Org. Chem. 2004, 1558) (3,23 м, 10 ммоль) і 2,6-лютидина (1,7 г, 16 ммоль) в c-гексані (25 мл) при-10ºC додають трифлатний ангідрид (4,2 г, 15 ммоль) зі швидкістю, щоб підтримувати температуру <10ºC, і реакція продовжують протягом 1,5 ч. Реакційну суміш розводять водою (25 мл) і c-гексаном (50 мл). Органічний шар промивають 1N HCl (2 × 15 мл) та сольовим розчином (15 мл). Після висушування над MgSO4розчинник випаровують при зниженому тиску, щоб отримати соответаровой кислоти 1-бензилового ефіру 5-трет-бутиловий ефір

Карбонат калію (2,08 м, 15 ммоль) додають до розчину трифлата зі стадії А (4,55 г, 10 ммоль), c-гексану (25 мл) в. Суміш нагрівають до 65-70 C за 24 год. Суміш охолоджують до кімнатної температури, розводять водою (25 мл) і c-гексаном (50 мл), потім суміш перемішують протягом 10 хв. Шари поділяють, органічний шар промивають 1N HCl (2 × 15 мл) та сольовим розчином (15 мл). Після висушування над MgSO4розчинник випаровують при зниженому тиску, щоб отримати відповідний ефір (5,88 м, 95%).

Стадія C: 2R-2-(1S,2S-2-трет-бутоксикарбониламино-1 - трифторметилпропиламино)-глутаровой кислоти 5-трет-бутиловий ефір

Гідрування розчину 2S-2-(1S,2S-2-дибензиламино-1-трифторметил-пропиламино)-глутаровой кислоти 1-бензилового ефіру 5-трет-бутилового ефіру зі Стадії B (5,4 г, 9 ммоль) завершують в метанолі (50 мл) та Pd/C (0,9 м) при 50 фунтів на квадратний дюйм протягом 24 год. Після фільтрації для видалення каталізатора фільтрат концентрують під вакуумом. Осад розчиняють у дихлорметане (50 мл) і обробляють Boc2O (2,60 г, 12 ммоль) в дихлорметане (25 мл) при 0ºC, потім додають розчин DIPEA (2 мл, 15 ммоль) в дихлорметане (10 мл), і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 6 ч. Суміш розводять етилацетатом (60 мл). Суміш промивають 0,1 N HC� отримати відповідне вказане в заголовку з'єднання в якості плівки

Q-лінкер-e: 2S-2-(3S-3-трет-бутоксикарбониламино-2-оксо-бутил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутиловий ефір

До розчину 2S-2-(3S-3-трет-бутоксикарбониламино-2-оксо-бутил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру 1-метилового ефіру (J Med. Chem. 1999, 42, 1203; Bioorg. Med. Chem. 2005, 13, 5240) (387 мг, 1 ммоль) в THF-H2O (5:1, 12 мл) при 0ºC додають LiOH (1N, 1,44 мл), і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 2 год. Після доведення рН до 5, суміш екстрагують етилацетатом (3 × 15 мл). Об'єднані органічні екстракти промивають розчином солі і висушують над MgSO4. Розчинник випаровують при зниженому тиску, щоб отримати відповідні кислоти в якості плівки (362 мг, 92%).1H ЯМР δ 4,63 (м, 1Н), 4,38 (шир., 1H), 2,68 (д, J=7,6 Гц, 2H), 2,58 (м, 1Н), 2,25 (дд, J=123, 7,6 Гц, 2H), 1,92 (м, 2Н), 1,49 (з, 9H), 1,47 (з, 9H), 1,41 (д, J=7,6 Гц, 3Н). LCMS 374 (M++1), 274 (M+1-трет-Bu).

Q-лінкер-f: 2R-2-(1S,3S-3-трет-бутоксикарбониламино-1-фтор-2-оксо-бутил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутиловий ефір

Стадія А: 2S-2-(1S,3S-3-трет-бутоксикарбониламино-1-фтор-2-оксо-бутил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутилового ефіру 1-метиловий ефір

2S-2-[1S,3S-фтор-2-оксо-3-(тритил-аміно)-бутил]-глутаровой кислоти 5-бензилового ефіру 1-метилов�йм протягом 6 ч. Каталізатор видаляють шляхом фільтрації через цілить. Фільтрат концентрують. Осад розчиняють в діоксані (25 мл) і обробляють 1N розчином NaOH (1,2 мл). Boc2O (238 мг, 1,1 ммоль) в діоксані (2 мл) додають до відповідного розчину при 0ºC, і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 6 ч. Суміш розводять етилацетатом (30 мл). Суміш промивають 0,1 N HC1, розчином солі і висушують над MgSO4. Розчинник випаровують при зниженому тиску. Осад розчиняють у дихлорметане (10 мл), обробляють трет-бутанолом (0,5 мл, 10 екв.), DCC (1,5 ммоль) і DMAP (1,5 ммоль). Реакційну суміш перемішують протягом 24 годин перед розведенням сольовим розчином (20 мл), екстрагують етилацетатом (3 × 20 мл). Об'єднані органічні екстракти висушують над MgSO4і розчинник випаровують при зниженому тиску. Осад очищають за допомогою випарної колони з утворенням трет-бутилового ефіру, як плівки (315 мг, 66%).1H ЯМР δ 4,81 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,38 (шир., 1H), 3,67 (с, 3Н), 2,78 (м, 1Н), 2,35 (дд, J=12,3, 7,6 Гц, 2H), 2,06 (м, 2Н), 1,49 (з, 9H), 1,47 (з, 9H), 1,41 (д, J=7,6 Гц, 3Н). LCMS 406 (М++1), 306 (M+1-трет-Bu).

Стадія B: 2S-2-(1S,3S-3-трет-бутоксикарбониламино-1-фтор-2-оксо-бутил)-глутаровой кислоти 5-трет-бутиловий ефір

У 2S-2-(1S,3S-3-трет-бутоксг, 0,65 ммоль) в THF-H2O (5:1, 12 мл) при 0ºC додають LiOH (1N, 10 мл), і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 2 год. Після доведення рН до 5, суміш екстрагують етилацетатом (3 × 15 мл). Об'єднані органічні екстракти промивають розчином солі і висушують над MgSO4. Розчинник випаровують при зниженому тиску, щоб отримати відповідну кислоту в якості плівки (238 мг, 95%).1H ЯМР δ 4,81 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,38 (шир., 1H), 2,78 (м, 1Н), 2,35 (дд, J=12,3, 7,6 Гц, 2H), 2,06 (м, 2Н), 1,49 (з, 9H), 1,47 (з, 9H), 1,41 (д, J= 7,6 Гц, 3Н). LCMS 392 (М++1), 292 (M+1-трет-Bu).

Приклад 1

Синтез

[Q-лінкер-d8,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид

Стадія 1

Fmoc-Rink Amide МВНА смола

Твердофазних пептидний синтез аналога в 100 мкмолярном масштабі виконують за допомогою ручного твердофазного синтезу та пептидного синтезатора Symphony з використанням Fmoc-захищеною смоли Rink Amide МВНА, Fmoc-захищених амінокислот, Про-бензотриазол-1-іл-N,N,N',N'-тетраметил-урониум гексафторфосфата (HBTU) в розчині N,N-диметилформамід (DMF) і активації N-метилморфолином (NMM) і піперідінового зняття захисних груп Fmoпродукта проводиться за допомогою 85% TFA/5% TIS/5% тиоанизола і 5% фенолу, з подальшим осадженням у холодному сухому льоду з Et2O (Стадія 2). Продукт очищають за допомогою препаративної обращенно-фазної ВЕРХ з використанням препаративної подвійний ВЕРХ-системи Varian (Rainin): градієнтної елюції 30-55% (0,045% TFA в H2O (А) і 0,045% TFA в CH3CN (В) більш ніж 180 хв при 9,5 мл/хв, з використанням колонки Phenomenex Luna 10µl phenyl-hexyl, 21 мм × 25 см і ультрафіолетового детектора (Varian Dynamax АТС II) при λ 214 і 254 нм, щоб отримати пептид з чистотою >95%, як визначено за допомогою обращенно-фазної ВЕРХ.

Maldi-Tof-MS: 3412. Розраховано MS: 3412.

Приклад 2

Синтез

[Q-лінкер-а8-9,GIu22]GLP-1-(7-37)-пептид

Стадія 1

Fmoc-Rink Amide МВНА смола

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 1.

LCMS: 1113 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1113 (М+3Н)3+.

Приклад 3

Синтез

[Q-лінкер-b8-9,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид

Стадія 1

Fmoc-Rink Amide MBHA смола

LCMS: 1119 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1119 (М+3Н)3+.

Приклад 4

Синтез

[Q-лінкер-с8,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид

Стадія 1

Fmoc-Rink Amide МВНА смола

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 1.

Maldi-Tof-MS: 3398. Розраховано MS: 3398.

Приклад 5

Синтез

[Q-лінкер-e8-9,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид

Стадія 1

Fmoc-Rink Amide MBHA смола

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 1.

LCMS: 1118 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1118 (М+3Н)3+.

Приклад 6

Синтез

[Q-лінкер-f8-9,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид

Стадія 1

Fmoc-Rink Amide МВНА смола

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використаний�+3Н)3+.

Приклад 7

Синтез

N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-с8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид

Суміш [А-лінкер-с8,Arg34]GLP-1-OH (36 мг, 11 мкмоль), EDPA (4,0 мг, 30,8 мкмоль), ацетонітрилу (260 мкл) і води (260 мкл) обережно струшували протягом 5 хв при кімнатній температурі. До отриманої в результаті суміші додавали розчин Nα-гексадеканоил-Glu(ONSu)-OBut, (1,8 мг, 3,3 мкмоль) в ацетонітрилі (44,2 мкл), і реакційну суміш обережно струшували протягом 1 год 20 хв при кімнатній температурі. Реакцію гасили додаванням розчину гліцину (1,8 мг, 242 мкмоль) у 50% водному етанолі (181 мкл). Додавали 0,5% водний розчин ацетату амонію (12 мл) і NMP (300 мкл), і отриману суміш элюировали на картриджі Varian 1g С8 Mega Bond Elut®, иммобилизированное з'єднання промивали 5% водним ацетонітрилом (10 мл) і остаточно звільняли від картриджа шляхом елюції TFA (6 мл). Елюатів залишали у спокої протягом 2 годин при кімнатній температурі і потім концентрували під вакуумом. Осад очищали за допомогою колонковою хроматографією і стандартної системи ацетонітрил/TFA. Вказане в заголовку з'єднання (12 мг, 46%) виділяли, і продукт аналізували за допомогою PDMS. Значення m/z для протонированного молекулязом, 3790±3 атомних одиниць маси (теоретичне значення 3751 атомна одиниця маси).

Приклад 8

Синтез

N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-d8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 7.

LCMS: 1268 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1268 (М+3Н)3+.

Приклад 9

Синтез

N-ε26-[γ-L-глутаиил(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-е8-9,Arg34]GLP-l-(7-37)-пептид

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 7.

LCMS: 1250 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1250 (М+3Н)3+.

Приклад 10

Синтез

N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-f8-9,Arg34]GLP-l-(7-37)-пептид

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 7.

LCMS: 1256 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1256 (М+3Н)3+.

Приклад 11

Синтез

N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-а8-9,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж последоватмер 12

Синтез

N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-b8-9,Arg34]GLP-l-(7-37)-пептид

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 7.

LCMS: 1250 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1250 (М+3Н)3+.

Приклад 13

Синтез

N-26-[(Nε-ω-карбоксигептадеканоил)]-[Q-лінкер-с8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 7, і використовують ω-карбоксигептакаприновой кислоти 2,5-диоксопирролидин-1-муловий ефір в якості вихідного матеріалу замість Nα-гексадеканоил-Glu(ONSu)-OBut.

LCMS: 1239 (М+3Н)3+. Розраховано MS: 1239 (М+3Н)3+.

Приклад 14

Синтез

N-26-[(Nε-ω-карбоксинонадеканоил)]-[Q-лінкер-с8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 7, і використовують ω-карбоксигептакаприновой кислоти 2,5-диоксопирролидин-1-муловий ефір в якості вихідного матеріалу замість Nα-гексадеканоил-Glu(ONSu)-OBut.

LCMS: 1249 (М+3Н)3+(пег)-Ala-NH2

Суміш [А-лінкер-d8]GLP-1-(7-37)-Cys-Ala-NH2(36 мг, 11 мкмоль) в 50 ммоль/л буферному розчині (36 мл) реагувала з 2 моль надлишком 20 кДа mPEG-SPA (рН доводили від 7,5 до 9,0 50 ммоль/л Tris-HCl-буфером) при кімнатній температурі протягом 3 ч. Моно-ПЭГилированние GLP-1-кон'югати перевіряли і очищали за допомогою обращенно-фазної високоефективної рідинної хроматографії (ОФ-ВЕРХ) на X-tera С18 (4,6 × 250 мм, 5 м, Waters, Мілфорд, МА) при кімнатній температурі. Рухома фаза складалася з 0,1% TFA у дистильованій воді (елюенти А) і ACN, що містить 0,1% TFA (елюенти В). Рухому фазу запускали з лінійним градієнтом від 30 до 60% елюентів B протягом 20 хв при швидкості протоку 1 мл/хв і УФ-поглинання елюентів контролювали при 215 нм. ВЕРХ-фракції, що відповідають відносним пікам, збирали окремо, продували азотом і лиофилизировали.

Приклад 16

Синтез

[Q-лінкер-с8]GLP-1-(7-37)-Cys(пег)-Ala-NH2

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 13, і використовують 20 кДа mPEG-SPA.

Приклад 17

Синтез

[Q-лінкер-а8-9]GLP-1-(7-37)-Cys(пег)-Ala-NH2

Необхідний GLP-1-аналог синтези�PA.

Приклад 18

Синтез

[Q-лінкер-b8-9]GLP-1-(7-37)-Cys(ПЕГ)-Ala-NH2

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 13, і використовують 20 кДа mPEG-SPA.

Приклад 19

Синтез

[Q-лінкер-е8-9]GLP-1-(7-37)-Cys(ПЕГ)-Ala-NH2

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 13, і використовують 20 кДа mPEG-SPA.

Приклад 20

Синтез

[Q-лінкер-f8-9]GLP-1-(7-37)-Cys(пег)-Ala-NH2

Необхідний GLP-1-аналог синтезують з використанням тієї ж послідовності та умов, які описані в Прикладі 13, і використовують 20 кДа mPEG-SPA.

Приклад 21

Стійкість по відношенню до DPP-IV in vitro

GLP-1 (100 мкл, 5 нмоль/л), еквівалентну кількість очищених на ВЕРХ синтезованих аналогів GLP-1 було підготовлено в триетиламін-HCl-буфері (10 ммоль/л; рН 7,4). Додавали DPP-IV (5 mU, 900 мкл), і розчин інкубували при 37°C. У зазначених тимчасових точках з реакційної суміші відбирали по 100 мкл, і реакцію зупиняли додаванням 5 мкл 10% (об/об) TFA. Кожен зразок аналізували MALDI-TOF-MS і ОФ-ВЕРХ, як описано вище.

Для того щоб продемонструвати ефективність GLP-1-похідних, була перевірена їх здатність стимулювати утворення сАМР в клітинній лінії, экспрессирующей клонований GLP-1-рецептор людини. ЄС50розраховували виходячи з кривої доза-відповідь.

У цьому радиоиммуноанализе використовують NIT-1, лінію бета-клітин підшлункової залози, утвореної з трансгенної миші NOD/Lt. Аналіз проводили в 96-лунковому планшеті для микротитрования в загальному обсязі 140 мкл. Використовується буфер представляв собою 50 ммоль/л Tris-HCI, рН 7,4 з додаванням 1 ммоль/л EGTA, 1,5 ммоль/л MgSO4, 1,7 ммоль/л АТФ, 20 мМ ГТФ, 2 ммоль/л 3-изобутил-1-метилксантину, 0,01% Tween-20 і 0,1% сироваткового альбуміну людини. З'єднання, призначені для тестування агонистической активності, розчиняли і розводили в буфері, додавали до препарату мембран і суміш інкубували 2 год при 37°С. Реакцію зупиняли додаванням 25 мкл 0,05 моль/л HCl. Перед аналізом на сАМР за допомогою сцинтиляційного контактного тесту зразки розводили в 10 разів.

Приклад 23

Противогипергликемическая активність GLP-1-аналогів

Миші db/db з ін�ологический розчин, 100 мкг/кг GLP-1(7-36)аміду, 100 мкг-екв./кг [Q-лінкер-с8,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептиду і 100 мкг-екв./кг N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-d8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептиду і через 10 хвилин перорально вводили 1 г/кг розчину глюкози. Через -10, 0, 10, 20, 30, 60, 90, 120 і 180 хвилин відбирали проби крові і визначали рівень глюкози в крові. Ефекти інгібування збільшення рівня глюкози в крові GLP-1(7-36)аміду, [Q-лінкер-с8, Glu22]GLP-1-(7-37)-пептиду та N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-d8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептиду порівнювали шляхом розрахунку площі під тимчасовою кривий рівня глюкози в крові для часу (0-180 хвилин). AUG GLP-1(7-36)амідної групи становив 25165±4463 мг-хв/дл, що є зменшеним значенням на 27,8%, порівняно з групою фізіологічного розчину (34864+4774 мг. хв/дл). Однак, значення для [Q-лінкер-с8,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептиду та N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-d8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептиду становили 14470+5700 мг-хв/дл і 17520 місць+2484 мг-хв/дл, відповідно (тобто 58,5%-е і 49,7%-ве зменшення, відповідно). Ці результати показують, що [Q-лінкер-с8,Glu22]GLP-1-(7-37)-пептид і N-ε26-[γ-L-глутаміл(N-α-гексадеканоил)]-[Q-лінкер-d8,Arg34]GLP-1-(7-37)-пептид мають значно збільшеною активністю інгібування рівня глюкози в крові порівняно з GLP-1(7-36)а>�де
Хаа7являє собою L-His, D-гістидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин або α-метилгистидин;
Q являє собою лінкер II, III або IV:
,
де
R1являє собою водень, (З16)алкіл або (C16) алкокси;
R2являє собою водень, (З16)алкіл або (C16) алкокси;
R3являє собою водень або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;
X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень;
Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (16) алкіл;
Z являє собою азот, вуглець, кисень або сірку;
W відсутня в разі, коли Z являє собою азот, кисень або сірку; W являє собою водень або фтор в разі, коли Z являє собою вуглець;
Xaa14являє собою серин або гістидин; і один або більше атомів вуглецю Xaa14необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Xaa16являє собою валін, лізин та лейцин; і один або більше атомів вуглецю Xaa16необов'язково заміщені однієї чи більше алкильним�ву кислоту, що β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)nСООН або, де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
k дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; m 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
U присутній і являє собою жирну кислоту довжиною від 8 до 20 вуглеців тільки у разі, коли Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
Xaa18являє собою серин, аргінін або лізин; і один або більше атомів вуглецю Xaa18необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа22і Хаа23незалежно являє собою гліцин, Aib або глутамінову кислоту; і один або більше атомів вуглецю як Хаа22, так і Хаа22необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36незалежно являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту), і один або більше атомів вуглецю кожної з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36необов'язково замеще�едставляет собою γ-глутамінову кислоту, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)nСООН або, де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
k дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
U присутній і являє собою жирну кислоту довжиною від 8 до 20 вуглеців тільки у разі, коли Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
В являє собою гліцин, чи NH2або ВІН, які представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти, або
В являє собою пептидний сегмент, що складається з цистеїну і від однієї до чотирьох амінокислот, кожна з яких незалежно являє собою серин, гліцин, аланін або монометоксиполиэтиленгликольмалеимид у разі, коли Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U, де
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)nСООН або, де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24,ирную кислоту довжиною від 8 до 20 вуглеців тільки у разі, коли Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10.

2. Аналог GLP-1 по 1 п., де Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U; являє собою цистеїн-серин-гліцин, цистеїн-аланін або цистеїн-монометоксиполиэтиленгликольмалеимид.

3. Аналог GLP-1 з Формулою V або його фармацевтично прийнятна сіль:
,
де
R1являє собою водень, (C-C6)алкіл (16) алкокси;
R2являє собою водень, (C1-C6)алкіл або (C16) алкокси;
R3являє собою водень, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;
X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень;
Хаа7являє собою L-His, D-гістидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин і α-метилгистидин;
D являє собою Gly-Thr-Phe-Thr-Xaa14-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaaтидин; і один або більше атомів вуглецю Xaa14необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Хаа16являє собою валін, лізин та лейцин; і один або більше атомів вуглецю Хаа16необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами; або
Хаа16являє собою лізин, пов'язаний з T-U, де
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)nСООН або, де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
k дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
U присутній і являє собою жирну кислоту довжиною від 8 до 20 вуглеців тільки у разі, коли Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
Xaa18являє собою серин, аргінін або лізин; і один або більше атомів вуглецю Xaa18необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа22і Хаа23незалежно являє собою гліцин, Aib або глутамінову кислоту; і один або більше атомів вуглецю як Хаа22так ub>, Хаа34, Хаа35і Хаа36незалежно являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту), і один або більше атомів вуглецю кожної з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами; або
Хаа26являє собою лізин, пов'язаний з T-U; де
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)nСООН або, де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
k дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
U присутній і являє собою жирну кислоту довжиною від 8 до 20 вуглеців тільки у разі, коли Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
В являє собою гліцин, чи NH2або ВІН, які відповідно представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти; або
В являє собою пептидний сегмент, що складається з цистеїну і від однієї до чотирьох амінокислот, кожна з яких н�ае, коли Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U.

4. Аналог GLP-1 по п. 3, де Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U; являє собою цистеїн-серин-гліцин, цистеїн-аланін або цистеїн-монометоксиполиэтиленгликольмалеимид.

5. Аналог GLP-1 по п. 3, де X являє собою водень, фтор або трифторметил.

6. Аналог GLP-1 по п. 3, де кожен з R1, R2і R3незалежно являють собою водень або метил.

7. Аналог GLP-1 по п. 3, де R1являє собою метил, а кожен з R2і R3незалежно являє собою водень.

8. Аналог GLP-1 по п. 3, де кожен з R1і R3незалежно являє собою водень, a R2являє собою метил.

9. Аналог GLP-1 по п. 3, де R3утворює 5-8-членное кільце з R1і R2являє собою водень; або R3утворює 5-8-членное кільце з R2, a R1являє собою водень.

10. Аналог GLP-1 з Формулою VI або його фармацевтично прийнятна сіль:
,
де
R1являє собою водень, (З)алкіл (16) алкокси;
R3являє собою водень, (C1-C6)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;
Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C16) алкіл;
Хаа7являє собою L-His, D-гістидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин або α-метилгистидин;
D являє собою Gly-Thr-Phe-Thr-Xaa14-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Xaa34-Xaa35-Xaa36
Xaa14являє собою серин або гістидин; і один або більше атомів вуглецю Xaa14необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Xaa16являє собою валін, лізин або лейцин; і один або більше атомів вуглецю Хаа16необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами; або
Хаа16являє собою лізин, пов'язаний з T-U, де
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)nCOOH або; де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
k дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6,гда Т являє собою γ-глутамінову кислоту, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
Xaa18являє собою серин, аргінін або лізин; і один або більше атомів вуглецю Xaa18необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа22і Хаа23незалежно являє собою гліцин, Aib або глутамінову кислоту; і один або більше атомів вуглецю як Хаа22, так і Хаа23необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36незалежно являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту); і один або більше атомів вуглецю кожної з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами; або
Хаа26являє собою лізин, пов'язаний з T-U, де
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)nСООН або; де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
k дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, коли Т являє собою γ-глутамінову кислоту, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
В являє собою гліцин, чи NH2або ВІН, які відповідно представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти, або
В являє собою пептидний сегмент, що складається з цистеїну і від однієї до чотирьох амінокислот, кожна з яких незалежно являє собою цистеїн, серин, гліцин, аланін або монометоксиполиэтиленгликольмалеимид у разі, коли Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U.

11. Аналог GLP-1 по п. 10, де Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U; являє собою цистеїн-серин-гліцин, цистеїн-аланін або цистеїн-монометоксиполиэтиленгликольмалеимид.

12. Аналог GLP-1 по п. 10, де R3являє собою водень.

13. Аналог GLP-1 по п. 10, де Y являє собою водень або (C1-C6) алкіл.

14. Аналог GLP-1 з Формулою VII або його фармацевтично прийнятна сіль:
,
де
R1являє собо�>-C6) алкіл або (C16) алкокси;
R3являє собою водень, (C1-C6) алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;
Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C16) алкіл;
W являє собою водень або фтор;
Хаа7являє собою L-His, D-гістидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин або α-метилгистидин;
D являє собою Gly-Thr-Phe-Thr-Xaa14-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Xaa23-Ala-Ala-Xaa26-Xaa27-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Xaa34-Xaa35-Xaa36-B; де
Хаа14являє собою серин або гістидин; і один або більше атомів вуглецю Xaa14необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Xaa16являє собою валін, лізин або лейцин; і один або більше атомів вуглецю Xaa16необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами,
або Xaa16являє собою лізин, пов'язаний з T-U, де
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)пСООН або; де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 іл�ислоту довжиною від 8 до 20 вуглеців тільки у разі, коли Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
Xaa18являє собою серин, аргінін або лізин; і один або більше атомів вуглецю Хаа18необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа22і Хаа23незалежно являє собою гліцин, Aib або глутамінову кислоту; і один або більше атомів вуглецю як Хаа22, так і Хаа23необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36незалежно являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту); і один або більше атомів вуглецю кожної з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних груп або
Хаа26являє собою лізин, пов'язаний з T-U; де
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)пСООН або; де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
,
де k одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
В являє собою гліцин, чи NH2або ВІН, які відповідно представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти, або
В являє собою пептидний сегмент, що складається з цистеїну і від однієї до чотирьох амінокислот, кожна з яких незалежно являє собою цистеїн, серин, гліцин, аланін або монометоксиполиэтиленгликольмалеимид у разі, коли Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U.

15. Аналог GLP-1 по п. 14, де Хаа26являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту) і не пов'язана з T-U; являє собою цистеїн-серин-гліцин, цистеїн-аланін або цистеїн-монометоксиполиэтиленгликольмалеимид.

16. Аналог GLP-1 по п. 14, де R3являє собою водень або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2.

17. Аналог GLP-1 по п. 14, де Y являє собою водень або фтор.

18. Аналог GLP-1 з Формулою VIII або його фармацевтическЕтидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидина або α-метилгистидин;
Q являє собою лінкер II, III або IV:

де
R1являє собою водень, (З16)алкіл або (C16) алкокси;
R2являє собою водень, (З16)алкіл (16) алкокси;
R3являє собою водень, (З16)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;
X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень;
Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C16) алкіл;
Z являє собою азот, вуглець, кисень або сірку;
W відсутня в разі, коли Z являє собою азот, кисень або сірку; або W являє собою водень або фтор в разі, коли Z є вуглецем;
Хаа7являє собою L-His, D-гістидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин або α-метилгистидин;
Xaa14являє собою серин або гістидин; і один або більше атомів вуглецю Xaa14необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Хаа16являє собою вальними групами;
Xaa18являє собою серин, аргінін або лізин; і один або більше атомів вуглецю Xaa18необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа22і Хаа23незалежно являє собою гліцин, Aib або глутамінову кислоту; і один або більше атомів вуглецю як Хаа22, так і Хаа23необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36незалежно являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib α-аминоизомасляную кислоту); і один або більше атомів вуглецю кожної з Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту, НООС(СН2)пСООН або; де
n дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 або 27;
k дорівнює 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10; і m одно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10;
U присутній і являє собою жирну кислоту довжиною від 8 до 20 вуглеців тільки у разі, коли Т являє собою γ-глутамінової кислоти, β-аланін, γ-аміномасляну кислоту або
,
ВІН, які відповідно представляють амідну форму або вільну кислоту кінцевої амінокислоти.

19. Аналог GLP-1 з Формулою IX або його фармацевтично прийнятна сіль:

де
Хаа7являє собою L-His, D-гістидин, дезаминогистидин, 2-аминогистидин, β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин або α-метилгистидин;
Q являє собою лінкер II, III або IV:
,
де
R1являє собою водень, (З16)алкіл або (C16) алкокси;
R2являє собою водень, (З16)алкіл або (C16) алкокси;
R3являє собою водень, (C16)алкіл або утворює 5-8-членное кільце з R1або R2;
X являє собою водень, фтор, гідрокси, трифторметил або кисень;
Y являє собою водень, гідроксил, фтор або (C16) алкіл;
Z являє собою азот, вуглець, кисень або сірку;
W відсутня в разі, коли Z являє собою азот, кисень або сірку, W являє собою водень або фтор в разі, коли Z є вуглецем;
Хаа14являє собою серин або гістидин; і один або більше атомів вуглець�лін, лізин або лейцин; і один або більше атомів вуглецю Xaa16необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Xaa18являє собою серин, аргінін або лізин; і один або більше атомів вуглецю Xaa18необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа22і Хаа23незалежно являє собою гліцин, Aib або глутамінову кислоту; і один або більше атомів вуглецю як Хаа22, так і Хаа23необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
кожна з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36незалежно являє собою гліцин, лізин, аргінін, лейцин, аспарагін або Aib (α-аминоизомасляную кислоту), і один або більше атомів вуглецю кожної з Хаа26, Хаа27, Хаа34, Хаа35і Хаа36необов'язково заміщені однієї чи більше алкільних групами;
Хааn, Xaan+1, Хааn+2, Хааn+3, Хааn+4всі разом відсутні або являють собою пептидний сегмент з однієї, двох, трьох або чотирьох амінокислот; Xaam, Хааm+1, Хааm+2, Хааm+3, Хааm+4всі разом відсутні або представляють пептидний сегмент з однієї, двох, трьох або чотирьох ами�p>n+3, Хааn+4, Xaam, Хааm+1, Хааm+2, Хааm+3, Хааm+4, становить 1, 2, 3 або 4 і цистеїн пов'язаний з монометоксиполиэтиленгликольмалеимидом.

20. Аналог GLP-1, який представляє собою
;
;
;
;
;
;
;
;
;
;
;
;
;
;
;
;
; або

21. Фармацевтична композиція для лікування або профілактики гіперглікемії, цукрового діабету 2 типу, порушення толерантності до глюкози, цукрового діабету 1 типу, ожиріння, артеріальної гіпертензії, дисліпідемії, атеросклерозу та інших серцево-судинних захворювань або виразок шлунка, що включає терапевтично ефективна кількість аналога GLP-1 по кожному з пп. 1-20, і фармацевтично прийнятний наповнювач.

<ня.

23. Застосування аналога GLP-1 по кожному з пп. 1-20 для виготовлення лікарського засобу для лікування або профілактики гіперглікемії, цукрового діабету 2 типу, порушення толерантності до глюкози, цукрового діабету 1 типу, ожиріння, артеріальної гіпертензії, дисліпідемії, атеросклерозу та інших серцево-судинних захворювань або виразок шлунка.

24. Застосування аналога GLP-1 по кожному з пп. 1-20 для виготовлення лікарського засобу для уповільнення або запобігання прогресування захворювання у пацієнтів з цукровим діабетом 2 типу.

25. Застосування аналога GLP-1 по кожному з пп. 1-20 для виготовлення лікарського засобу для зниження засвоєння їжі, зменшення апоптозу β-клітин, посилення функції β-клітин або збільшення β-клітинної маси і/або для відновлення глюкозной чутливості β-клітин.



 

Схожі патенти:
Винахід відноситься до галузі біотехнології, конкретно до отримання аналогів GLP-2, і може бути використане в медицині для лікування розладів, асоційованих з GLP-2. Отримані аналоги GLP-2 з агонистической активністю відносно рецепторів GLP-2. Винахід дозволяє підвищити стійкість до протеазам, що забезпечує більш низький кліренс отриманих аналогів і пролонгування їх біодоступності порівняно з нативним GLP-2. 11 н. і 18 з.п. ф-ли, 4 табл.

Засновані на амидах проліки пептидів глюкагонового надродини

Винахід відноситься до пролекарственним препаратів пептидів глюкагонового надродини, в яких пептид глюкагонового надродини модифікований зв'язуванням дипептида з пептидом глюкагонового надродини амідній зв'язком. Проліки, розкриті в цьому винаході, мають збільшений час напівжиття і перетворюються в активну форму у фізіологічних умовах в результаті неферментативной реакції, що викликається хімічної нестабільністю. 3 н. і 27 з.п. ф-ли, 15 іл., 8 табл., 16 пр.

Глікозильований пептид glp-1

Винахід відноситься до галузі генної інженерії, конкретно до отримання пептиду GLP-1, модифікованого олигосахаридной ланцюгом, і може бути використане в медицині для лікування або профілактики захворювань, асоційованих з GLP-1. В пептиді GLP-1 з SEQ ID NO: 2 або SEQ ID NO: 3 дві амінокислоти пептиду заміщені амінокислотою, модифікованої биантеннальной олигосахаридной ланцюгом комплексного типу, і де кожен з центрів заміщення вибирається з групи, що складається з положень 18, 22, 26, 30, 34 і 36 в пептиді GLP-1 з SEQ ID NO: 2 або SEQ ID NO: 3. Зазначений модифікований пептид GLP-1 може включати делецию, заміщення або приєднання 1-5 амінокислот, за винятком амінокислот, модифікованих олигосахаридной ланцюгом. Винахід дозволяє отримати пептид GLP-1, модифікований олигосахаридной ланцюгом, який демонструє більш сильну активність придушення глюкози в крові збільшений, принаймні, в 2 рази період напівжиття, порівняно з GLP-1 з SEQ ID NO: 3. 5 н. і 19 з.п. ф-ли, 5 іл., 6 табл., 16 пр.

Аналоги оксинтомодулина

Винахід відноситься до пептидним аналогам оксинтомодулина (ОХМ, глюкагон-37), які були модифіковані для додання стійкості до розщеплення та інактивації дипептидилпептидазой IV (DPP-IV) та для збільшення часу напівжиття in vivo пептидного аналога поряд з наданням можливості пептидному аналогу діяти у вигляді подвійного агоніста GLP-1/глюкагонового рецептора (GCGR). Пептидні аналоги можна застосовувати для лікування метаболічних порушень, таких як діабет і ожиріння. 3 н. і 13 з.п. ф-ли, 16 іл., 11 табл., 12 пр.

Пептид glp-1 з приєднаною олигосахаридной ланцюгом

Винахід відноситься до галузі біотехнології, конкретно до пептиду GLP-1 з приєднаною олигосахаридной ланцюгом, і може бути використане в медицині. Зазначений пептид GLP-1, який володіє активністю GLP-1, має (а1) одну амінокислоту, додатково приєднану до С-кінця (позиція 37), в якому зазначена приєднана амінокислота замінена амінокислотою з приєднаною олигосахаридной ланцюгом; або (а2) одну або дві амінокислоти, замінені амінокислотою з приєднаною олигосахаридной ланцюгом, де сайт заміни вибирають з позицій 18, 20, 22, 30 і 36, а також може додатково включати від 1 до 5 делецій, замін або вставок амінокислот, де зазначена олигосахаридная ланцюг містить п'ять або більше цукрів і представлена Формулою 1. Винахід відноситься до фармацевтичної композиції і способу лікування або попередження захворювання, що піддається лікуванню або предупреждаемого введенням GLP-1, наприклад діабету, що передбачають використання вищевказаного пептиду GLP-1 з приєднаною олигосахаридной ланцюгом. Винахід дозволяє отримати пептид GLP-1 з приєднаною олигосахаридной ланцюгом, що володіє поліпшеною стабільністю і більш високою активністю в контролюванні рівня цукру в крові

Аналоги глюкагоноподобного пептиду-1 та їх застосування

Даний винахід відноситься до аналогам глюкагоноподобного пепдтида-1 (ГПП-1), представленим наступною формулою I, де X являє собою гліцин або глицинамид. Аналог ГПП-1 стійкий до дії дипептидил-пептидази IV і за рахунок цього має більш тривалий час напівжиття in vivo. Також запропоновано застосування аналога ГПП-1 для зниження рівня цукру в крові. 7 н. і 2 з.п. ф-ли, 3 ін., 3 іл., 1 табл.

Спосіб регулювання умов для сайт-специфічного зв'язування поліпептиду і непептидильного полімеру

Даний винахід надає спосіб регулювання умов для сайт-специфічного зв'язування поліпептиду і непептидильного полімеру за допомогою регулювання рН і вмісту спирту реакційної середовища. Спосіб призначений для запобігання утворення побічних кон'югатів, в яких непептидильний полімер зв'язується з фізіологічно важливим амінокислотним залишком. 14 з.п. ф-ли, 36 іл., 2 табл., 25 пр.

Пептид, фармацевтична композиція (варіанти) і лікарський засіб на його основі, спосіб лікування і/або попередження діабету або захворювань, супутніх ожирінню, спосіб зменшення апетиту, зменшення споживання їжі, зменшення споживання калорій, зменшення маси тіла і збільшення витрати енергії

Винахід відноситься до нових пептидним аналогам оксинтомодулина, їх фармацевтичним композиціям і їх застосування для лікування та/або профілактики надмірної маси тіла, а також порушень і захворювань, супутніх ожирінню

Аналоги глюкагону, що володіють підвищеною розчинністю в буферах з фізіологічним значенням ph

Винахід відноситься до галузі біотехнології, конкретно до отримання аналогів глюкагону, і може бути використане в медицині

Композиція інсуліну тривалої дії

Даний винахід відноситься до фармацевтичної композиції, що містить з'єднання інсуліну в концентрації, достатній для підтримання терапевтично ефективного рівня з'єднання інсуліну в плазмі крові протягом принаймні 3 днів. З'єднання інсуліну відноситься до пролекарственному з'єднанню, який представляє собою кон'югат інсуліну з лінкером, з'єднаний з гідрогелевих носієм. Також описана суспензія, що містить фармацевтичну композицію кон'югату інсуліну, спосіб отримання суспензії, набір, що включає фармацевтичну композицію кон'югату інсуліну та контейнер для введення композиції. Фармацевтична композиція конъгата інсуліну по винаходу характеризується тим, що має фармакокінетичний профіль in vivo по суті без викиду з'єднання інсуліну. 6 н. і 20 з.п. ф-ли, 9 іл., 21 пр.

Спосіб корекції когнітивних порушень у пацієнтів з артеріальною гіпертензією на тлі цукрового діабету 2 типу

Винахід відноситься до медицини, а саме до терапії і кардіології, і стосується корекції когнітивних порушень у пацієнтів з артеріальною гіпертензією на тлі цукрового діабету 2 типу. Для цього на тлі стандартної фармакотерапії вводять лікарський засіб «Кудесан» в дозуванні 60 мг на добу протягом двох місяців. Введення кудесана в зазначеній дозі режимі і забезпечує ефективну корекцію когнітивних порушень у даної групи хворих в поєднанні з поліпшенням функції серцево-судинної системи і обмінних процесів. 2 табл., 1 пр.

Спосіб корекції підвищеного рівня тривоги і депресії у пацієнтів з артеріальною гіпертензією на тлі цукрового діабету 2 типу

Винахід відноситься до медицини, а саме до терапії і кардіології, і стосується корекції підвищеного рівня тривоги і депресії у пацієнтів з артеріальною гіпертензією на тлі цукрового діабету 2 типу. Для цього на тлі стандартної фармакотерапії вводять препарат «Кудесан» в дозі 60 мг на добу протягом двох місяців. Спосіб забезпечує ефективну корекцію тривожно-депресивних станів у даної групи хворих, що, в свою чергу, дозволяє більш ефективно нормалізувати артеріальний тиск за рахунок зниження негативного психосоматичного впливу. 1 пр., 2 табл.

Способи лікування il-1бета-залежних захворювань

Група винаходів відноситься до способів лікування діабету 2 типу, резистентності до інсуліну, зниженої продукції інсуліну, ожиріння, гіперглікемії та гіперінсулінемії, що включає введення суб'єкту ефективного кількості антитіла до IL-1β або його фрагмента, а також до застосування антитіла до IL-1β або його фрагмента у виробництві композиції, призначеної для лікування вищезазначених захворювань або станів. Група винаходів ефективна в лікуванні діабету 2 типу, резистентності до інсуліну, зниженої продукції інсуліну, ожиріння, гіперглікемії та гіперінсулінемії. 2 н. і 65 з.п. ф-ли, 13 іл., 5 табл., 14 пр.

N-вмісні гетероарильние похідні в якості інгібіторів jak3 кінази

Винахід відноситься до нових N-вмісних гетероарильним похідним формули I або II або їх фармацевтично прийнятним солей, які мають властивості інгібіторів кінази JAK, зокрема JAK3, і можуть знайти застосування для лікування таких захворювань, як астма і хронічне обструктивне захворювання легенів (COPD). У формулах I або II А являє собою вуглець і являє собою азот або А являє собою азот і являє собою вуглець; W являє собою СН або N; R1 і R2, незалежно, являють собою водень, С1-4алкил, галогенС1-4алкил, -CN; R3 являє собою С1-4алкил, R9-Cl-4алкил, Cy1, де Cy1 необов'язково заміщений одним або декількома заступниками R10; R4 являє собою водень, С1-4алкил, Rl2R7N-С0алкил, де один з R7 і R12 являє собою водень, а інший являє собою С1-4алкил або групу R13, яку вибирають з С1-5алкила, Cy2-С0алкила; R5 являє собою водень; R6 являє собою водень, С1-4алкил, С1-4алкоксиС1-4алкил, гидроксиС1-4алкил, R12R7N-C1-4алкил, R16CO-С0алкил, Cy1; R7 являє собою водень або С1-4алкил; R9 являє собою галоген, -CN, -CONR7R12, -COR13, CO2R12, -OR12, -SO2R13, -SO2NR7R12, -NR7R12, -NR7COR12; R10 являє собою С1-4алкил або R9-С0-4алкил; R11 являє собою С1-4алкил, галоген, -CN, -NR7R14; R12 чи R14R7N-C1-4алкил; де Cy2 необов'язково заміщений одним або декількома заступниками R11; R14 являє собою водень або С1-4алкил; R16 являє собою С1-4алкил, галогенС1-4алкил, C1-4алкоксиС1-4алкил, гидроксиС1-4алкил або цианоС1-4алкил; Cy1 являє собою моноциклическое карбоциклическое ненасичених або насичене кільце, вибране з С3-С6циклоалкила, фенила, або насичене моноциклическое 4-6-членное гетероциклічна кільце, що містить від 1 до 2 гетероатомів, вибраних з N і S, або частково ненасичених 10-членное бициклическое гетероциклічна кільце, містить атом кисню в якості гетероатома, які можуть бути заміщені групою R11, де зазначене кільце пов'язане з іншою частиною молекули через будь-який доступний атом С, і де один або кілька кільцевих атомів С або S необов'язково окислені з утворенням СО або SO2; і Cy2 являє собою моноциклическое карбоциклическое насичене кільце, вибране з С3-С6циклоалкила, або ароматичне моноциклическое 4-6-членное гетероциклічна кільце, що містить від 1 до 2 гетероатомів, вибраних з N і S, або ненасичених 10-членное бициклическое гетероциклічна кільце, що містить атом кисню в якості гетероатома, які можуть бути заміщені гру. �-ли, 41 пр.

Трансдермальні пластирі

Група винаходів відноситься до медицини. Описаний матричний шар, придатний для застосування в пластирі для черезшкірної доставки, з метою введення біологічно активні з'єднання, який включає фосфатне з'єднання токоферолу і полімерний носій. Описаний також трансдермальний пластир і спосіб його виготовлення. Пластир дозволяє ефективно вводити біологічно активні сполуки. 4 н. і 44 з.п. ф-ли, 15 табл., 13 іл., 12 пр.

Продукт, що містить глюкоманнан, ксантанова камедь і альгінат для лікування метаболічних порушень

Винахід відноситься до фармацевтичної промисловості і являє собою лікувальне харчування для профілактики, лікування або полегшення одного або декількох симптомів, пов'язаних з порушенням обміну речовин або розладом його обміну, що містить композицію з полисахаридних харчових волокон високої в'язкості, що включає в'язку суміш волокна або його комплекс, що складається з 48% до 90% у відсотках по масі глюкоманнана, від 5% до 20% у відсотках по масі ксантанової камеді і від 5% до 30% у відсотках по масі альгінату, а також, принаймні, один макроелемент, обраний із групи, що складається з білка, вуглеводів і жиру, де лікувальне харчування складено для забезпечення дози композиції полісахаридного харчового волокна високої в'язкості від 20 г/день до 35 г/день протягом періоду часу, ефективного для профілактики, лікування і полегшення одного або декількох симптомів, пов'язаних з порушенням обміну речовин або його розладом. Винахід забезпечує розширення арсеналу засобів, що запобігають, що полегшують або лікуючих одне або кілька симптомів, пов'язаних з порушенням обміну речовин або захворюванням обміну речовин. 4 н. і 10 з.п. ф-ли, 6 пр., 20 табл., 48 іл.
Винахід відноситься до медицини, а саме до бальнеології, офтальмології, урології, нефрології, і призначене для корекції обмінних порушень у хворих на цукровий діабет. Хворим з діабетичною мікроангіопатією проводять обстеження: загальний аналіз крові, цукор крові, загальний аналіз сечі, ультразвукове дослідження нирок з визначенням показників ниркового кровотоку (Vmax, Vmin, S/D, PI, RI), основних офтальмологічних параметрів (гострота зору, поле зору, огляд судин очного дна). Далі, в умовах санаторію, призначається прийом всередину безпосередньо з джерела слабомінералізованої гідрокарбонатно-хлоридно-натрієвої мінеральної води «Обухівська». Вода приймається підігрітої до температури 37°C з розрахунку 3 мл на 1 кг маси тіла 3 рази в день за 40 хвилин до їди, курсом 18 днів. Використання винаходу дозволяє нормалізувати загальний аналіз крові, цукор крові, загальний аналіз сечі, а також поліпшити стан зорового аналізатора і показників ниркового кровотоку. 1 пр.

Похідні 2-пиридона

Винахід відноситься до сполук 2-пиридона, представленим загальною формулою [1], де А являє собою бензольное кільце або піридинових кільце, Х являє собою структуру, представлену загальною формулою [3], V являє собою одинарну або нижчий алкилен, W являє собою одинарну зв'язок, ефірний зв'язок або нижчий алкилен, який може включати ефірний зв'язок, або їх таутомерам або стереоизомерам, їх фармацевтично прийнятним солей, які володіють чудовою активує активність відносно GK і можуть застосовуватися в якості лікарських препаратів. 4 н. і 23 з.п. ф-ли, 23 табл., 371 пр.

Заміщення фосфорсодержащей групою хинолиноподобное з'єднання, спосіб його одержання, лікарська композиція, що містить це з'єднання, і його застосування

Винахід відноситься до заміщених фосфорсодержащей групою хінолінів формули (I), які можуть використовуватися в медицині , де Ζ являє собою , V1 і V2 незалежно обрані з водню або галогену; один з R і R` являє собою фосфорсодержащий заступник Q, інший вибраний з водню або метоксила; де фосфорсодержащий заступник Q являє собою , А представляє собою; L являє собою С1-6алкил; J являє собою NH або С3-6гетероциклоалкил і J можливо заміщений G3; X відсутня або являє собою-З(=O)-; Υ відсутня або являє собою C1-6алкил; кожен з R1 і R2 незалежно обраний С1-6алкила або С1-6алкокси; G3 являє собою С1-6алкил, R3S(=O)m-, R5C(=O)- або R3R4NC(=O)-; R3, R4 і R5 незалежно обрані з Η або С1-6алкила; m дорівнює 0-2. Запропоновано нові інгібітори протеїнкінази, ефективні для лікування захворювань, асоційованих з аномальною активністю протеїнкінази. 6 н. і 14 з.п. ф-ли, 42 пр., 8 табл., 3 іл.
Винахід відноситься до галузі біотехнології, конкретно до отримання аналогів GLP-2, і може бути використане в медицині для лікування розладів, асоційованих з GLP-2. Отримані аналоги GLP-2 з агонистической активністю відносно рецепторів GLP-2. Винахід дозволяє підвищити стійкість до протеазам, що забезпечує більш низький кліренс отриманих аналогів і пролонгування їх біодоступності порівняно з нативним GLP-2. 11 н. і 18 з.п. ф-ли, 4 табл.
Up!