Пептид, що володіє нейропротекторной і ноотропною активністю, і фармацевтична композиція на його основі

 

Винахід відноситься до нових біологічно-активних сполук, зокрема до пептидів з нейропротекторной і ноотропною активністю, конкретно - гексапептиду формули Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2. Запропоновано застосування гексапептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2як нейропротекторного та ноотропного засобу, спрямованого на профілактику і лікування хвороби Альцгеймера та ішемічного інсульту. Запропоновано новий склад фармацевтичної композиції на основі зазначеного гексапептиду (2,5 г/л): консервант у вигляді ніпагін (1,0 г/л), хлорид натрію (10,0 г/л), карбопол 2020 NF (2,5 г/л), що забезпечує підвищену здатність препарату долати слизову оболонку носової порожнини, і вода дистильована - інше. Склад високоефективний у низьких дозах і простий у застосуванні: використовується у вигляді крапель в ніс. Пропонована фармацевтична композиція може знайти застосування в медицині.

ОПИС ВИНАХОДУ

Винахід відноситься до медицини, а саме до розробки і застосування нового нейропротекторного кошти. Може бути використано для впровадження нейропротекции, є особливим напрямком терапії нейродегенеративних і цереброваскулярних захворювань.

Незважаючи на різну этиолог�альна амілоїдна ангіопатія, глутаматная эксайтотоксичность, порушення кальцієвого гомеостазу. І в разі інсульту, і в разі хвороби Альцгеймера розвивається каскад патологічних змін, що призводять до необоротного пошкодження нервової тканини і масової загибелі нейронів по механізму некрозу та апоптозу. Нейропротекція спрямована на переривання відстрочених механізмів смерті клітин - оксидантного стресу, дисбалансу цитокінів, локального запалення, трофічної дисфункції та апоптозу. Тісний взаємозв'язок всіх механізмів загибелі нервової тканини дозволяє використовувати модулюючий вплив через системи регуляторів, особливе місце серед яких займають регуляторні пептиди.

Актуальність розробки препарату визначається тим, що захворювання центральної нервової системи є однією з провідних причин захворюваності, смертності та інвалідизації в Росії та інших країнах. Одним з найсерйозніших цереброваскулярних захворювань є ішемічний інсульт. За даними Всесвітньої федерації неврологічних товариств, щорічно в світі реєструється не менше 15 млн інсультів. У Росії захворюваність інсультом складає більше 450000 нових інсультів в рік. За висновком експертів ВООЗ, хвороба Альцгеймера є наиб визнана однією з чотирьох головних медико-соціальних проблем сучасного суспільства. В даний час загальна чисельність хворих, що страждають хворобою Альцгеймера, у Росії наближається до 1,4 млн осіб. Такий великий контингент страждають деградацією особистості, патологічної забудькуватістю і не можуть обслуговувати себе людей накладає тягар на соціальні служби та систему охорони здоров'я Росії, так само як і інших країн.

Лікування цих захворювань являє собою складну задачу. На сьогоднішній день не існує лікування, яке могло б гарантовано запобігти або істотно сповільнити прогресування хвороби Альцгеймера, хоча активні дослідження в цій галузі проводяться в усьому світі. У лікуванні ішемічного інсульту використовуються нейропротекторну препарати, призначені для зменшення ураження мозку і зворотного розвитку виникли в ньому змін. Істотними недоліками засобів, що використовуються в даний час для лікування інсульту і хвороби Альцгеймера, різко обмежують область їх використання, є розвиток небажаних побічних ефектів, а також звикання або недостатня ефективність. Все це вимагають вжиття невідкладних заходів для розробки і впровадження в практику принципово нових засобів, специфич�захворювань.

Новим напрямком в області створення ефективних і безпечних лікарських засобів для лікування нейродегенеративних і цереброваскулярних захворювань, є створення нейропротекторов на основі ендогенних регуляторних пептидів, високоефективних та нешкідливих в силу їх приналежності до споріднених організму біологічних структур.

На відміну від більшості лікарських засобів, що застосовуються в даний час для профілактики і лікування заявлених хвороб, що заявляється фармацевтична композиція на основі пептиду володіє комплексним ноотропним і нейропротекторним дією, впливаючи на ряд вузлових патогенетичних механізмів цих захворювань.

Аналогами пропонованої нової фармацевтичної композиції на основі пептиду є ноотроп пірацетам, пептидні препарати семакс і ноопепт, мемантин, інгібітори холінестерази, мексидол нейромедін, мемантин, мексидол, що використовуються в даний час для лікування нейродегенеративних і цереброваскулярних розладів. На жаль, жоден з методів, що застосовуються для замісної терапії не має встановленої здатністю надійно стабілізувати або суттєво впливати на перебіг самого нейродегенератівного процеастоящее час препаратами заявляється пептид проявляє свою дію в набагато менших дозах. Вираженість нейропротекторного та ноотропного дії пептиду проявляється в дозах 50-300 мкг/кг, тоді як лікувальна доза нейромедина становить 2 мг/кг, мемантина - 10 мг/кг, мексидола - 200 мг/кг. Всі використовувані препарати мають відмінний від винаходу механізм дії і крім недостатньої терапевтичної ефективності володіють серйозними побічними ефектами і вельми дорогі. На відміну від перерахованих вище нейропротекторов, збільшення дози нового заявляється препарату у 200-500 разів у різних тестах не супроводжується розвитком небажаних побічних ефектів. Переваги фармацевтичної композиції на основі пептиду визначаються по сукупності таких лікувальних властивостей, як унікальність, вираженість терапевтичного дії, високий рівень і широкий спектр комбінованої ноотропної і нейропротекторной активності, низька ефективна доза, низька токсичність (LD50>5000 мг/кг), ефективний спосіб введення (інтраназальний), відносно висока стійкість в організмі.

В якості прототипу заявляється пептиду можна розглядати гексапептид загальної формули (Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg) володіє протипухлинною, протекторної і нормалізує активністю (патент �ви лікарського препарату нейропротекторного та ноотропного дії обмежується його швидкої биодеградацией в тканинах організму і низькою нейропротекторной і ноотропною активністю.

Заявляється винахід вирішує задачу профілактики і лікування нейродегенеративних і цереброваскулярних захворювань. Поставлена задача і технічний результат досягається тим, що гексапептид формули Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2застосовується в якості нейропротекторного та ноотропного засобу. Підставою для рішення задачі і досягнення технічного результату, що досягається при реалізації винаходу, є виявлення широкого спектру нейропротекторного та ноотропного лікувальної дії амідній форми гексапептиду з протипухлинною, протекторної та нормалізує активність, що визначає можливість його використання в низьких дозах в якості нейропротекторного та ноотропного засобу. Фармацевтична композиція на основі заявляється пептиду відрізняється хорошою переносимістю, зручною лікарською формою для застосування і відсутністю небажаних побічних ефектів, характерних для відомих препаратів для лікування хвороби Альцгеймера.

До складу фармацевтичної композиції з нейропротекторним і ноотропною дією входять: гексапептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2в якості активної речовини, додаткові компоненти - нипагин, хлорид натрію і карбопол при дотримуюся�ство) - 1,00;

Хлорид натрію (створює в вихідному розчині осмотичний і онкотичного тиск, близьке до таких показників плазми крові) - 10,00;

Карбопол (полегшує проникнення лікарського засобу через слизову оболонку) - 2,5;

Вода дистильована - інше.

Встановлено, що гексапептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2володіє широким спектром дії. Поряд з нейропротекторним дією гексапептид надає оптимізують і активуючу дію на мнестичні та когнітивні функції мозку, що становить важливу позитивну частину його специфічної фармакологічної активності. Гексапептид активує процеси навчання і пам'яті (фіксацію, консолідацію, відтворення у нормальних тварин і при експериментальній патології цих функцій мозку). Ці властивості відрізняють фармакологічна дія гексапептиду від фармакологічної дії багатьох відомих нейропротекторов.

Пептид отримують з допомогою класичного синтезу, потім очищають і виділяють в гомогенном стані. Пептид має наступні властивості: мовляв. маса 712 Так; изоэлектрическая точка 7,86; pH стабільність в інтервалі рн від 2,0 до 9,0; термостабільність в інтервалі температур від 0°C до +60°C; гомогенність 99,7%;� рисунки і таблиці.

Малюнок 1. Кінетика біодеградації пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2в плазмі крові щурів.

Малюнок 2. Кінетика біодеградації пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg в плазмі крові щурів.

Малюнок 3. Вплив субхронического системного введення пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2(HLDF) на зміну щільності глутаматних (NMDA), серотонінових (5-НТ2А) і нікотинових (нАХ) рецепторів на мембранах префронтальної кори та гіпокампу мозку мишей інбредних ліній C57B1/6 та Balb/c.

Таблиця 1. Порівняння впливу субхронического введення амідній форми пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на дослідницьку поведінку мишей у тесті «закритий хрестоподібний лабіринт» (m+/-S. E. M.)

Таблиця 2. Порівняння впливу субхронического введення кислотної форми пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg на дослідницьку поведінку мишей у тесті «закритий хрестоподібний лабіринт» (m+/-S. E. M.)

Таблиця 3. Вплив пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на показники навчання в лабіринті Морріса («ключова» версія) у щурів з введенням фрагмента бета-амілоїду (25-35) в базальное ядра Мейнерта.

Таблиця 4. Вплив пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на показники навчання в моделі пасивного уникнення у щурів з спільним введенням фрагмента бета-амилоирования в лабіринті Морріса трансгенних мишей лінії B6C3 (Tg+).

Таблиця 6. Вплив пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на показники довготривалої просторової обстановочной пам'яті під час навчання в лабіринті Морріса у щурів з оклюзією сонних артерій.

Винахід ілюструють приклади.

Приклад 1. Порівняльне вивчення часу життя в плазмі крові щура пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2

Для аналізу біотрансформації пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2використовують ВЕРХ продуктів взаємодії [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2з гепариновою плазмою крові. Для цього дослідження використовують рівномірно мічені тритієм пептиди [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2з молярної радіоактивністю 60 і 70 Ки/ммоль, отримані в ІМГ РАН. Для хроматографії використовують послідовно з'єднані УФ-детектор і проточний детектор радіоактивності. Хроматографію проводять на колонці Кромасил C18, 150×4 мм, 4 мкм в градієнті метанолу (0-30%) у присутності 0.1% суміші тріфторуксусной і гептафтормасляних кислот (4:1). Для ідентифікації пептидних фрагментів, які утворюються при різних шляхах біотрансформації пептидів [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2у плазмі �З кінця пептидного ланцюга. З використанням мічених тритієм пептидів [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg [3H]Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2визначають кінетику біодеградації пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2у гепаринова плазмі крові щурів із вихідною концентрацією 2.5 мкМ.

В результаті проведених досліджень було показано, що гідроліз пептидів відбувається за різними схемами. Гідроліз пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2відбувається з N-кінця пептидного ланцюга, і основний внесок у його гідроліз в плазмі крові вносять диаминопептидази. Гідроліз пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg відбувається з C-кінця пептидного ланцюга, і основний внесок у його гідроліз в плазмі крові вносять дикарборксипептидази. Було показано, що пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2має високу стійкість до гідролізу в плазмі крові. Період його полудеградации становить 21 хвилину, що в десять разів більше, ніж у випадку пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg, не має амідній захисту С-кінця пептидного ланцюга, період полудеградации якого в плазмі крові щура становить 2 хвилини (Рис. 1 і 2).

Приклад 2. Порівняльне вивчення впливу субхронического введення пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на поведінку мишей інбредних ліній Balb/c та C57B1/6

Відомо, що ноотропная активність привних підходів цього напряму є використання неінвазивних методів оцінки дефіциту дослідного поведінки в раніше незнайомій обстановці, зокрема, метод «закритий хрестоподібний лабіринт». Іншою істотною особливістю препаратів з ноотропною активністю є їх здатність проявляти специфічну дію після неодноразового системного введення.

Для порівняння впливу пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на поведінку використовують інбредних мишей ліній C57B1/6 та Balb/c, що розрізняються як по ефективності дослідницького поведінки у лабіринті, так і за рівнем тривожності і рухової активності (Ковальов і співавт., 2013). Мишей Balb/c використовують як неінвазивної моделі стану когнітивного дефіциту, мишей лінії C57B1/6 - в якості контролю. Пептиди вводять інтраназально у 3-х дозах - 30, 100 і 300 мкг/кг протягом 5 діб. Дослідження проводять на самцях мишей інбредних ліній Balb/c та C57B1/6 масою 23-25 г, отриманих з розплідника лабораторних тварин ФИБХ РАН (р. Пущино).

Для оцінки дослідницького поведінки тварин використовують закритий хрестоподібний лабіринт, який складається з 4-х прозорих пластмасових закритих порожніх відсіків, що з'єднуються з таким же центральним відсіком з допомогою вхідних отворів (Салімов, 1988; Salimov 1999). Тупикові відсіки розміром 14×14×14 см занумеровані за годинниковою стрілкою від 1 Ледве чого лабіринт накривають прозорою кришкою. Тварина може вільно переміщатися по його відділеннях, а експериментатор синхронно реєструє номери відвідуваних відділень допомогою комп'ютерної програми, яка реєструє послідовність і тривалість переходів. Експеримент триває до тих пір, поки тварина не здійснить 12 переходів з одного бокового відсіку в інший.

Визначається довжина першого циклу патрулювання (F_PtrN) і число циклів патрулювання (PatrlN), здійснених за час експерименту. Показник «довжини» першого циклу патрулювання обчислюється числом входів тварини в тупики лабіринту, до моменту, коли тварина побуває у всіх чотирьох тупиках лабіринту хоча б один раз. Чим менше число заходів в тупики при першому патрулюванні і чим більше виконано циклів патрулювання, тим більш впорядковано і ефективно дослідження лабіринту. Ці показники можуть бути використані для оцінки ноотропного дії речовини. Результати комп'ютерної обробки дослідної поведінкової активності мишей обох ліній представлені в Таблицях 1 і 2. Ними підтверджується, що миші Balb/c поступаються мишей C57BL/6 з ефективності дослідницького поведінки в незнайомій обстановці F_PtrN на 12% (p < 0.05).

Субхрон�я на ефективність дослідницького поведінки мишей лінії Balb/c. При дозі 100 мкг/кг/день у мишей лінії Balb/c спостерігається тенденція до поліпшення (p=0,058), тоді як при дозі 300 мг/кг значне поліпшення настає відразу по двох параметрах поведінки. Навпаки, у мишей контрольної лінії C57B1/6 введення пептиду не надає позитивного впливу на ефективність дослідницького поведінки ні в одній з 3-х доз (Табл. 1).

Результати випробувань кислотної форми пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg представлені в Табл. 2.

Показано, що під впливом пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg ефективність дослідницького поведінки у «когнітивно-дефіцитної» лінії Balb/c підвищувалася лише по одному параметру в максимальній з використаних доз (300 мкг/кг/день). Як і у випадку з амідній формою пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2, змін в дослідницькому поведінці у мишей лінії порівняння C57B1/6 не відзначено.

Таким чином, при зіставленні ноотропної активності пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2при субхроническом интраназальном введенні цих пептидів мишам інбредних ліній Balb/c та C57B1/6 показано, що пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2володіє високою ноотропною активністю, так як він вибірково покращує когнітивне поведінку мишей лінії Balb/c, що володіють вихідним дефіцитом исследоваладает низькою ноотропною активністю.

Приклад 3. Вплив субхронического системного введення пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на характеристики рецепторного зв'язування на мембранах мозку мишей ліній C57B1/6 та Balb/c методом ex vivo аналізу

Рецепторний компонент механізму дії пептиду вивчають шляхом порівняльного аналізу зміни щільності NMDA-глутаматних, 5-НТ2а серотонінових і н-АХ нікотинових рецепторів на мембранах префронтальної кори та гіпокампу мозку мишей інбредних ліній C57B1/6 та Balb/c.

Вибір ліганду для радиорецепторних досліджень ex vivo здійснюють у відповідності з рекомендаціями IUPHAR. При радиолигандном аналізі NMDA-рецепторів використовують [G-3H](+)MK-801, синтезований реакцією ВТКИО з молярної радіоактивністю 210 Ки/ммоль. Для аналізу серотонінових 5-НТ2а і нікотинових н-АХ рецепторів використовують отримані реакцією ВТКИО [G-3Н]Кетансерін і (-)[G-3Н]нікотин з молярної радіоактивністю 114 та 140 Ки/ммоль, відповідно.

Аналіз впливу пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на NMDA-рецептори гіпокампу мишей лінії Balb/c показує, що 5-кратне системне введення пептиду у щоденній дозі 100 мкг/кг призводить до зростання щільності місць зв'язування [G-3Н]MK-801 з NMDA-рецепторами з 2115+36 фмоль/мг білка контроого контролю. При цьому величина щільності NMDA-рецепторів у гіпокампі мишей Balb/c наблизилася до відповідного значенню для групи порівняння, представленої мишами лінії C57B1/6. У мозку мишей C57B1/6 зміни в рецепторних характеристиках не зазначається: щільність місць зв'язування ліганду в контрольній групі 2734+44 фмоль/мг, а після субхронического введення препарату ця величина склала 2625+55 фмоль/мг білка.

Субхроническое введення пептиду в рівній мірі зменшувало щільність 5-НТ2а-серотонінових рецепторів у обох ліній і не чинило впливу на нікотинові н-АХ-рецептори (Рис 3). Результати, отримані при дослідженні впливу амідній форми пептиду HLDF-6 на нейрохімічні процеси з допомогою радиолигандного аналізу, показують, що в механізм ноотропних фармакологічних ефектів з високим ступенем ймовірності залучена глутаматергическая система гіпокампу, зокрема NMDA-тип рецепторів. NMDA-рецептори є однією з найважливіших мішеней для дії ноотропних і нейропротекторних лікарських препаратів, так як вони приймають визначає участь в регуляції рівня виживаності та загибелі нервової клітини.

Приклад 4. Порівняльне вивчення нейропротекторной і ноотропної активностимилоида (25-35) в базальное ядра Мейнерта щурів

Хвороба Альцгеймера - нейродегенеративное захворювання, що характеризується порушенням когнітивної функції і деменцією. Утворення і накопичення бета-амілоїду є головною особливістю патогенезу хвороби Альцгеймера. Токсична дія фрагментів бета-амілоїду при введенні в мозок лабораторних тварин призводить до порушення когнітивних функцій. Хвороба Альцгеймера моделюють шляхом введення бета-амілоїду (фрагмент 25-35) в базальное гигантоклеточное ядра Мейнерта (Nucleus basalis magnocellularis). Модель характеризується когнітивними порушеннями, зумовленими порушенням холінергічної аферентації кори великих півкуль головного мозку [Harkany Т, O Mahony S, Kelly JP, Soós K, Тörõ I, Penke, Luiten PG, Nyakas C, Gulya K, Leonard BE. Beta-amyloid (Phe(SO3H)24)25-35 in rat nucleus basalis induces behavioral dysfunctions, impairs learning and memory and disrupts cortical cholinergic innervation. Behav Brain Res. 1998 Feb; 90(2): 133-45].

В якості препарату порівняння використовують аптечний препарат НЕЙРОМІДИН® (9-Аміно-2,3,5,6,7,8-гексагідро-1H-циклопента хіноліну гідрохлорид) (ампули для внутрішньом'язового введення). Для дослідження використовують здорових статевозрілих щурів-самців лінії Вістар віком 180-200 днів, вагою 280-300 г, отриманих з НВП «Розплідника лабораторних тварин» Філії Інституту біоорганічної хімії дять внутрішньочеревно в дозі 2 мг/кг

Введення бета-амілоїду (25-35) в базальное ядра Мейнерта проводять під загальним наркозом (золетіл 15 мг/кг + ксилазин 2 мкг/кг вниутрибрюшинно). Введення здійснюють стереотаксичної установці (TSE, Німеччина) за координатами АР -1.5, DL ±2.7, H 8.1 за допомогою мікрошприца Hamilton. Експериментальним тваринам вводять білатерально фрагмент бета-амілоїду (25-35) в дозі 2 мкг на бік в 1 мкл фізіологічного розчину. Хибно-оперованим тваринам контрольної групи вводять білатерально фізіологічний розчин (1 мкл на бік). Було прооперовано 100 тварин, смертність склала 0%.

Розчини досліджуваних пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2вводять інтраназально в обсязі 48 мкл/кг порівну в обидві ніздрі. Препарат порівняння НЕЙРОМІДИН® вводять у дозі 2 мг/кг внутрішньоочеревинно у фізіологічному розчині. Тваринам контрольних груп вводять фізіологічний розчин. Введення проводять через 1 год і 24 години, а також на 3, 5 і 7 днів після операції. Тестування короткочасної просторової пам'яті проводять в лабіринті Морріса на 21-22 дні після операції [de Bruin JP, Sánchez-Santed F, Heinsbroek RP, Donker A, Postmes P. A behavioural analysis of rats with damage to the medial prefrontal cortex using the Morris water maze: evidence for behavioural flexibility, but not for impaired spatial navigation. Brain Res. 1994 Aug 1; 652(2): 323-33].

У зв'язку з тим, що використаної моделі хвороби Альцгеймера уражається переважно кора великих півкуль, для тестування застосовують т. н. «ключову» версію навчання. Над платформою на висоті 20 см розташовують чорний куля (ключовий сигнал), а розташування її в кожній пробі змінюють. Дана модель, у якої тварина навчається орієнтуватися на «ключовий» сигнал, не залежить від цілісності функцій гіпокампу, проте залежить від функціонального стану кори великих півкуль [Le Pen G, Grottick AJ, Higgins GA, JR Martin, Jenck F, Moreau JL. Spatial and associative learning deficits induced by neonatal excitotoxic hippocampal damage in rats: further evaluation of an animal model of schizophrenia. Behav Pharmacol. 2000 Jun; 11(3-4): 257-68, Save E, Poucet B. Involvement of the hippocampus and associative parietal cortex in the use of proximal and distal віхах for navigation. Behav Brain Res. 2000 May; 109(2): 195-206]. Статистичну обробку результатів проводять з використанням непараметричних методів: крит� допомогою статистичного програмного пакету STATISTICA 6.0.

Порівняння груп з використанням тесту Манна-Уітні виявило статистично значуще зростання часу виконання навику у тварин контрольної групи порівняно з помилковою операцією (Таблиця 3). Таким чином, введення бета-амілоїду в базальное ядра Мейнерта викликає вибіркове порушення короткочасної просторової «ключовий» пам'яті.

Також виявлено, що показники групи тварин, які отримували амідну форму пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2у дозі 250 мкг/кг, а також групи з введенням НЕЙРОМІДИНУ ® ® в перший день не демонструють статистично значущих відмінностей від рівня хибно оперованих щурів. В інших групах спостерігається істотне зниження виконання навику порівняно з хибно-оперованими тваринами. В той же час ні в одній з експериментальних груп не виявлено істотних відмінностей від контролю. Таким чином, часткове відновлення здатності до навчання в даній моделі відбувається тільки після введення пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2у дозі 250 мкг/кг і по силі ефекту можна порівняти з ефектом НЕЙРОМІДИНУ ® ® у дозі 2 мг/кг

Таким чином, на моделі хвороби Альцгеймера, що реалізується при введенні фрагмента бета-амілоїду (25-35) в базальное ядра Мейнерта щури, нейропротекторну властивості, значно перевершуючи при цьому пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg. Активність пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2і препарату порівняння Нейромедина порівнянна, при цьому діюча доза Нейромедина (2 мг/кг) значно більше.

Приклад 5. Порівняльне вивчення нейропротекторной і ноотропної активності пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на моделі хвороби Альцгеймера шляхом спільного впровадження фрагмента бета-амілоїду і иботеновой кислоти в гіпокамп

Симптоми хвороби Альцгеймера моделюють спільним введенням фрагмента бета-амілоїду і иботеновой кислоти (ІК) в гіпокамп щурів. В якості препарату порівняння використовують аптечний препарат мемантина гідрохлорид. Для дослідження використовують здорових статевозрілих щурів-самців лінії Вістар віком 180-200 днів, вагою 280-300 г, отриманих з розплідника «Стовпова» РАМН.

Введення в гіпокамп фрагмента бета-амілоїду (25-35) з иботеновой кислотою проводять білатерально в дозах 2 мкг і 0,5 мкг на одну сторону відповідно в обсязі 1 мкл. Операцію проводять під загальним наркозом (золетіл 15 мг/кг + ксилазин 2 мкг/кг внутрішньоочеревинно). Ін'єкції здійснюють микрошприцем "Hamilton" в стереотаксичної установці TSE (Німеччина) за координатами: АР -3,5, L±2,0, H 2,7. Животрования когнітивних функцій пептиди Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2вводять інтраназально в обсязі 48 мкл/кг порівну в обидві ніздрі в дозі 250 мкг/кг. Препарат порівняння мемантина гідрохлорид вводять у дозі 10 мг/кг підшкірно у фізіологічному розчині. Тваринам контрольних груп вводять 1 мл/кг фізіологічного розчину. Введення проводять через 1 год і 24 години, а також на 3, 5 і 7 днів після операції. Тестування моделі пасивного уникнення проводять на 18-19 дні після операції.

Тест пасивного уникнення проводять в установці Columbus Instruments (USA). Експериментальна камера складається з двох однакових відсіків розміром 25×40×25 см з підлогою з металевих прутів. Відсіки з'єднуються між собою отвором у загальній стінці 8×8 см, забезпеченим гильотинной дверима. Один з відсіків освітлений, інший затемнений. У ході вироблення пасивного уникнення тварина поміщають в освітлений відсік і реєструють час переходу в темну частину камери (прояв норкового рефлексу). Відразу після того, як всі чотири лапи тварини опиняються в темній половині камери, гильотинная двері опускається і щура наноситься електрошкірний роздратування через прути підлоги (0.6 мА, 3 с), після чого її відразу виймають з камери і поміщають в домашню клітку. Через 48 годин проводять тестування виробленого досвіду. Ктся зростання часу переходу в темний відсік в сеансі тестування порівняно з сеансом навчання (ΔT).

При порівнянні груп за критерієм Манна-Уітні виявлено, що в групі контролю ΔT статистично значуще нижче, ніж у групі помилкової операції (Таблиця 4), що свідчить про виражених порушеннях довготривалої пам'яті оборонного поведінки, викликаного введенням βa+ІК. У тварин, які отримували ін'єкції амідній форми пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2значення ΔT істотно вище, ніж у контрольній групі, і майже не відрізняються від відповідного показника групи помилкової операції. Аналогічний ефект надає препарат порівняння, проте його дія, як і дія пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg, виражена дещо слабкіше.

Таким чином, на моделі хвороби Альцгеймера реалізується при сумісному введенні фрагмента бета-амілоїду і иботеновой кислоти в гіпокамп щури показано, що пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2при интраназальном введенні в дозі 250 мкг/кг виявляє високі нейропротекторну властивості, перевершуючи при цьому пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і препарат порівняння мемантина гідрохлорид, який використовується в значно більшій діючий дозі, яка становить 10 мг/кг

Приклад 6. Вплив системного введення пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2на трансгенної моделі хвороби Альцгеймера (трансгенні ми�арушением когнітивної функції і деменцією. Існують спадкова і спорадична форми захворювання. При спадкової хвороби Альцгеймера має місце розвиток за аутосомно-домінантним типом успадкування. Основною перевагою трансгенної моделі є те, що при введенні тварині людських генів, що відповідають за розвиток спадкової форми хвороби Альцгеймера (генів АРР і пресенилина), у тварин розвиваються патогенетичні процеси, подібні з такими при хворобі Альцгеймера у людини (освіта амілоїдних бляшок, оксидативний стрес, порушення холінергічної передачі, загибель нейронів). Це дозволяє припустити, що процеси, які проходять в ЦНС у таких модельних тварин, подібні з такими при розвитку хвороби Альцгеймера у людини. Найбільш адекватною моделлю для вивчення потенційних лікарських препаратів є дабл-трансгенні миші лінії B6C3-Tg (APP695)85DboTg(PSENI)85Dbo. Тварини цієї лінії експресують мутантний людський білок пресенилин і химерний миша/людина амилоидний білок - попередник (APPSwe). Характерною особливістю цієї лінії є раннє (у віці 6-7 місяців) розвиток патології альцгеймеровского типу, обумовлене прискореним відкладенням в мозку бета-амілоїдних образів�sn-His-Arg-NH2при интраназальном введенні в дозі 250 мкг/кг виконують на трансгенних мишах лінії B6C3-Tg (APP695)85DboTg(PSENI)85Dbo. Для дослідження використовують здорових мишей-самців лінії B6C3, (Tg+) віком 8 місяців, вагою 35-40 г, мишей дикої лінії (Tg-) віком 8 місяців, вагою 35-40 і мишей C57B16 віком 8 місяців, вагою 35-40 р. Введення пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2проводять протягом 30 днів через день (всього - 15 ін'єкцій). При проведенні досліджень формують чотири групи мишей (по 10 особин у кожній):

- 1 група (експериментальна) - миші Tg+, яким вводять інтраназально пептид в дозі 250 мкг/кг;

- 2 група (активний контроль) - миші Tg+, яким інтраназально вводять фізіологічний розчин;

- 3 група (контроль-1) - миші Tg-яким інтраназально вводять фізіологічний розчин;

- 4 група (контроль-2) - миші лінії C57B16, яким інтраназально вводять фізіологічний розчин.

Показником довгострокової просторової пам'яті в моделі лабіринту Морріса служить середній час досягнення платформи у 2-5 дні навчання. Результати представлені в таблиці 5.

Аналіз виявив статистично значущі відмінності між групами в 4-й і 5-й дні навчання. При цьому тест Манна-Уітні не виявив статистично значущих відмінностей междуемонстрировали істотний дефіцит просторової пам'яті в 4-й і 5-й дні навчання, порівняно з обома контрольними групами. Введення пептиду призводить до часткового відновлення просторової пам'яті у мишей Tg+ таким чином, що в 4-й день навчання рівень виконання навику в цій групі мало відрізняється від контрольного, так і від рівня групи Tg+ з введенням фізіологічного розчину, тобто займає проміжне положення. У п'ятий день навчання миші Tg+ з введенням пептиду виконують завдання істотно краще, ніж група Tg+ з введенням фізіологічного розчину, і не демонструють значущих відмінностей ні від однієї з контрольних груп, що говорить про повне відновлення просторової пам'яті. Отже, виявлено, що пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2ефективно відновлює порушені когнітивні функції у трансгенних мишей.

Таким чином, сукупність отриманих результатів свідчить, що пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2володіє ноотропною та нейропротекторним дією відносно порушених когнітивних функцій у моделі спадкової форми хвороби Альцгеймера у лабораторних тварин. Ефективність пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2показана для дози 250 мкг/кг в умовах интраназальной доставки.

Приклад 7. Порівняльне вивчення нейропротекторной�арушения мозкового кровообігу - одна з основних причин смертності та інвалідизації, а пошук ефективних нейропротекторов і ноотропів, що запобігають розвиток амнезії в цих умовах, - одна з найважливіших задач сучасної науки.

Проводять порівняльне вивчення специфічної активності пептидів Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2в умовах интраназальной доставки на моделі ішемічного інсульту (хронічна оклюзія сонних артерій - 2 VO) у лабораторних тварин. В якості препарату порівняння в даній моделі використовують аптечний препарат Мексидол (ампули для внутрішньом'язового введення). Для дослідження використовують здорових статевозрілих щурів-самців лінії Вістар віком 180-200 днів, вагою 280-300 р.

При моделюванні ішемічного інсульту у лабораторних тварин (модель 2vo) операцію з двостороннім перев'язці (оклюзії) сонних артерій проводять під загальним наркозом (золетіл 15 мг/кг + ксилазин 2 мкг/кг внутрішньоочеревинно). В ході операції тварину фіксують у станку, здійснюють поздовжній розріз на передній стороні шиї, виділяють сонну артерію, за допомогою пінцетів та скляних гачків сепарують посудину від блукаючого нерва і перев'язують шовкової хірургічної ниткою. Хибно оперованих тварин нитка підводять по�ніздрі. Препарат порівняння мексидол вводять у дозі 200 мг/кг внутрішньоочеревинно у фізіологічному розчині. Тваринам контрольних груп вводять 1 млкг фізіологічного розчину. Введення проводять через 1 год і 24 години, а також на 3, 5 і 7 днів після операції. Тестування довготривалої обстановочной просторової пам'яті в лабіринті Морріса проводять на 18-22 дні після операції.

Статистичну обробку результатів проводять з використанням непараметричних методів: критерію Краскелла-Уолліса, медіанного тесту, а також параметрів Манна-Уїтні і Вілкоксона. Обробку проводять за допомогою статистичного програмного пакету STATISTICA 6.0.

В якості основного показника довготривалої обстановочной просторової пам'яті в даній моделі виступає час досягнення платформи в першій пробі кожного з днів навчання. Аналіз не виявив статистично значущих відмінностей між групами за цим показником в перші два дні, однак у третій і четвертий дні навчання відмінності між групами досягали рівня статистичної значущості, табл. 6.

Порівняння груп з використанням тесту Манна-Уітні показало, що тварини контрольної групи витрачають на пошук платформи істотно більше часу, ніж хибно-оплюзии сонних артерій. Пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2у дозі 250 мкг/кг відновлює показники довготривалої пам'яті в третій і четвертий дні навчання до рівня хибно-оперованої групи, проте в дозі 50 мкг/кг ефект пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2проявляється тільки на четвертий день і слабко виражений, а доза 10 мкг/кг неефективна. Стимулюючий ефект пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg на формування довготривалої пам'яті проявляється в дозах 50 і 250 мкг/кг, слабо виражений і спостерігається тільки на четвертий день навчання. Доза пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg 10 мкг/кг і мексидол неефективні.

Таким чином, на моделі ішемічного інсульту, що реалізується при оклюзії сонних артерій, показано, що пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2при интраназальном введенні в дозі 250 мкг/кг виявляє високі нейропротекторну та ноотропні властивості, значно перевершуючи при цьому пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg і препарат порівняння мексидол, що використовується в значно більшій діючий дозі, яка становить 200 мг/кг

Порівняльний аналіз даних, отриманих з використанням різних моделей, показує, що нейропротекторна ефективність амідній форми пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2у моделях хвороби Альцгеймера та ішемічного інсульту, оцінювана по ти пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2у моделях хвороби Альцгеймера порівнянні з ефектами препаратів порівняння, а в моделі ішемічного інсульту значно перевищують дію останніх. При цьому дуже важливо, що пептид проявляє свою дію в набагато менших дозах, ніж препарати порівняння. За сукупністю отриманих даних можна зробити висновок про те, що пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2ефективно відновлює порушені когнітивні функції у всіх досліджених моделях.

Експериментальні дослідження пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2дозволяють запропонувати його в якості нейропротекторного та ноотропного засобу, активуючого мнестичні функції. Пептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2є нетоксичним, зручним для застосування в клінічній практиці (краплі в ніс), з доброю переносимістю лікарським препаратом.

Порівняння пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2з сучасними нейропротекторними і ноотропними засобами виявило його істотні переваги, які полягають у тому, що він значно більш ефективний, складається з природних, зустрічаються в організмі амінокислот і швидко метаболізується. При метаболізмі пептидів в організмі не утворюються токсичні продукти. Для пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH<500 разів. Порівняння пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2з сучасними нейропротекторами показало відсутність у пептиду Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2побічних ефектів, властивих останнім.

1. Пептид формули Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2володіє нейропротекторной і ноотропною активністю.

2. Фармацевтична композиція на основі пептиду для профілактики і лікування нейродегенеративних і цереброваскулярних захворювань, високоефективна в низьких дозах і використовується у вигляді крапель в ніс, складу:
гексапептид Thr-Gly-Glu-Asn-His-Arg-NH2- 2,5 г/л;
нипагин (консервуючий речовина) - 1,00 г/л;
хлорид натрію (створює в вихідному розчині осмотичний і онкотичного тиск, близьке до таких показників плазми крові) - 10,00 г/л;
карбопол (полегшує проникнення лікарського засобу через слизову оболонку) - 2,5 г/л;
вода дистильована - інше.



 

Схожі патенти:

Олігопептиди imp-3 і утримують їх вакцини

Винахід відноситься до олигопептидам, що містить послідовність NLSSAEVVV (SEQ ID NO:6), в якій одна або дві амінокислоти можуть бути заміщені, мають индуцибельность цитотоксичних Т-клітин, їх фармацевтичним композиціям і застосування для виготовлення протиракових вакцин. 10 н. і 10 з.п. ф-ли, 6 іл., 1 табл., 1 пр.

Гетеромерние пептиди на основі имидазо[4,5-е]бензо[1,2;3,4-з']дифуроксана, що інгібують агрегацію тромбоцитів

Запропоновані гетеромерние пептиди на основі имидазо[4,5-е]бензо[1,2;3,4-з']дифуроксана, що інгібують агрегацію тромбоцитів: , де R=Phe-Ile-Ala-Asp-Thr; Arg-Tyr-Gly-Asp-Arg; Lys-Ile-Ala-Asp Asp; His-Ile-Gly-Asp Asp. 1 іл., 2 табл., 4 пр.

Равномерномеченний дейтерієм або тритієм his-phe-arg-trp-pro-gly-pro

Винахід відноситься до равномерномеченному дейтерієм або тритієм His-Phe-Arg-Trp-Pro-Gly-Pro, який може бути використаний в аналітичній хімії та біологічних дослідженнях. 2 табл., 2 пр.

Похідні опиорфинного пептиду як потенційні інгібітори эктопептидаз, що беруть участь у деградації енкефалінів

Даний винахід відноситься до модифікованим опиорфинним пептидів в якості нових інгібіторів метало-эктопептидаз. 4 н. і 13 з.п. ф-ли, 23 іл., 1 табл., 3 пр.

Застосування мимеотопов альфа-синуклеинових епітопів для лікування захворювань, пов'язаних з тільцями леві

Група винаходів відноситься до галузі фармацевтики та медицини і стосується пептидів або поліпептидів, які індукують утворення антитіл, спрямованих на альфа-синуклеин in vivo для отримання лікарських засобів для профілактики та/або лікування синуклеинопатий. Група винаходів забезпечує отримання пептидів або поліпептидів, які індукують антитіла, які відповідають за вилучення альфа-синуклеина, який залучений до утворення агрегатів альфа-синуклеина, тілець Леві та/або за розчинення агрегатів альфа-синуклеина, тілець Леві у індивідуума з синуклеинопатией. 4 н. і 18 з.п. ф-ли, 3 ін., 5 табл., 5 іл.

Эпитопние пептиди rab6kifl/kif20a і містять їх вакцини

Даний винахід відноситься до галузі імунології. Запропоновані варіанти олігопептиду, виділені з білка RAB6KIFL (KIFL20A), які здатні індукувати цитотоксичні Т-лімфоцити (CTL) у складі комплексу з молекулою HLA-A*0201. Також розглянуті: фармацевтична композиція та спосіб знищення клітин, що експресують RAB6KIFL і HLA-A*0201, экзосома, виділена антиген-презентирующая клітка і спосіб її індукції, фармацевтична композиція та спосіб індукції CTL, застосування активних інгредієнтів по справжньому винаходу для отримання фармацевтичної композиції для лікування раку, а також полинуклеотид, що кодує олигопептид по справжньому винаходу. Цей винахід може знайти подальше застосування в терапії захворювань, асоційованих з RAB6KIFL. 11 н. і 2 з.п. ф-ли, 6 іл., 1 табл.

Пептиди ттк і вакцини, що їх містять

Винахід відноситься пептидним вакцин проти раку. Представлені эпитопние пептиди, отримані з гена ТТК, які викликають розвиток CTL, фармацевтичні композиції, що містять в якості активних інгредієнтів зазначені пептиди або полінуклеотиди, що кодують зазначені пептиди. Також представлені антигенпрезентирующие клітини і виділені CTL, які націлені на зазначені пептиди, і способи індукування антигенпрезентирующих клітин або CTL. 12 н. і 6 з.п. ф-ли, 4 іл., 1 пр.

Спосіб отримання тиоефіру пептиду

Винахід відноситься до нового способу хімічного перетворення пептидного ланцюга в тиоэфир пептиду. Групу-C(=X)-R1 вводять в тиоловую групу залишку цистеїну, і потім отриманий пептид в органічному розчиннику реагує з з'єднанням, що мають перепризначену групу, представлену формулою: -NH-C(=Y)NHR3, і група-NH-C(=Y)NHR3 зв'язується в реакції приєднання з карбоксильної групою пептидного зв'язку на N-кінцевий стороні залишку цистеїну, за допомогою чого пептидний зв'язок розщеплюють і фрагмент пептиду, С-кінцевий стороні вирізують. Коли отримана пептидний ланцюг, що має групу-NH-C(=Y)NHR3, реагує з тиолом в буферному розчині, то відбувається реакція обміну тіолів, а саме тиоловая група з'єднання меркаптани зв'язується з вуглецем карбонила, до якої була приєднана група-NH-C(=Y)NHR3, за допомогою чого групу-NH-C(=Y)NHR3 видаляють. Таким чином, досягають перетворення в тиоэфир пептиду. 6 н. і 8 з.п. ф-ли, 4 ін.

Модульний молекулярний кон'югат для спрямованої доставки генетичних конструкцій та спосіб його одержання

Винахід відноситься до галузі медицини та ветеринарії і може бути використане як ефективний засіб адресної доставки комплексів ДНК з молекулярними кон'югатами в певні органи і тканини ссавців. В заявляється винахід значно підвищується ефективність доставки ДНК в пухлинні клітини та суттєво спрощується, здешевлюється і скорочується час синтезу молекулярних кон'югатів за рахунок застосування модульного підходу, а також можливості швидкої зміни лигандних складових для зміни тропности кон'югату до різних пухлинних і нормальних клітин організму. Винахід дозволяє вирішувати проблему генотерапії пухлинних захворювань, оскільки отриманий модульний пептидний кон'югат є, як показали результати численних випробувань в режимі реального часу, ефективним засобом адресної доставки і, що особливо важливо, не токсичні, иммуногенни для організму, і не викликають побічних ефектів. 2 н.п. ф-ли, 7 іл., 10 пр.

Циклічний октапептид, радиофармацевтическое засіб на його основі і спосіб застосування радиофармацевтического засоби для отримання лікарських (фармацевтичних) засобів для лікування новоутворень, які експресують рецептори соматостатиновие

Винахід відноситься до радиофармацевтическому засобу формули (Іа) або (Ів), що представляє собою комплекс циклічного октапептида, що містить хелатирующую групу, з радіонуклідами 111In, 90Y, 177Lu. Радиофармацевтическое засіб може бути використано для отримання лікарських засобів для радіонуклідної терапії новоутворень, які експресують соматостатиновие рецептори. 2 н.п. ф-ли, 1 іл., 2 табл., 6 пр. Х= хелатуючий агент.

N-(4-ацетоксибензоил)глицинат калію, що володіє дією церебропротективним

Винахід відноситься до нової водорозчинній калієвої солі N-(4-ацетоксибензоил)гліцину зазначеної формули, яка має церебропротективним дією. Винахід може бути використано в хіміко-фармацевтичній промисловості для отримання ефективних церебропротективних коштів. 2 іл., 3 табл., 6 пр.

Похідні пиперидинов

Винахід відноситься до сполук структурної формули I, які мають інгібуючої секрецію Аβ42 активністю. У формулі I гетарил I являє собою п'яти - або шестичленних гетероарильную групу, яка містить 1-3 гетероатома, вибраних з Про, S або N, гетарил II являє собою п'яти - або шестичленних гетероарильную групу, яка містить 1-3 гетероатома, як визначено вище для гетарила I, або являє собою бициклическую кільцеву систему, що містить 1-4 гетероатома, вибраних з S, О або N, де щонайменше одне кільце є ароматичним за своєю природою, R1 являє собою C1-7-алкіл, C1-7-алкокси, C1-7-алкіл, замещенний галогеном, або галоген; R2 являє собою галоген, C1-7-алкіл, C1-7-алкокси, гідрокси, C1-7-алкіл, замещенний галогеном, C1-7-алкіл, замещенний гідрокси, або бензо[1,3]диоксолил або являє собою -(СНR)р-феніл, можливо замещенний галогеном, C1-7-алкилом, C1-7-алкокси, S(O)2-C1-7-алкилом, ціано, нітро, C1-7-алкокси, заміщених галогеном, диметиламіно, -(СН2)p-NHC(O)O-C1-7-алкилом або C1-7-алкилом, заміщених галогеном. Значення радикалів R, R3, R4, р, n, m, про наведено у формулі винаходу. Винахід відноситься до способу отримання зазначених сполук, до лікарського засобу, що містить�державної церебральної геморагії з амілоїдозом голландського типу (HCHWA-D), мультиинфарктной деменції, деменції боксерів або синдрому Дауна, асоційованих з активністю β-амілоїду. 6 н. і 15 з.п. ф-ли, 283 пр.

Застосування мимотопов для лікування бета-амилоидозов

Група винаходів відноситься до медицини і стосується застосування щонайменше одного пептиду, вибраного з групи, що включає SEFKHG(З), TLHEFRH(З), ILFRHG(З), TSVFRH(C), SQFRHY(З), LMFRHN(З), SPNQFRH(З), ELFKHHL(З), THTDFRH(З), DEHPFRH(З), QSEFKHW(З), ADHDFRH(З), YEFRHAQ(С) і TEFRHKA(З), для виробництва лікарського засобу для профілактики та/або лікування хвороби Альцгеймера. Група винаходів також стосується вакцини, що містить щонайменше один зазначений пептид, призначеної для індукції імунної відповіді, спрямованого проти Аβ. Група винаходів забезпечує сприятливий ефект вакцинації вакцинами з мимотопами при лікуванні хвороби Альцгеймера. 6 н. і 18 з.п. ф-ли, 3 ін., 10 іл., 5 табл.

Специфічні відносно бета-амілоїду (а бета) 1-42 моноклональні антитіла, що володіють терапевтичними властивостями

Даний винахід відноситься до галузі біотехнології та імунології. Запропоновано гибридомная клітинна лінія FP12H3-C2, депонована під номером DSM ACC2750, яка продукує антитіло проти бета-амілоїду. Розглянуто способи отримання антитіла, в тому числі гуманизированного антитіла, з використанням гібридомної лінії по винаходу, а також способи діагностики асоційованого з бета-амілоїд захворювання або порушення у пацієнта або схильність до такого захворювання або порушення, спосіб визначення ступеня ураження тканини амилоидогенними бляшками, спосіб моніторингу мінімальних залишкових ознак захворювання у пацієнта після лікування антитілом або його активним фрагментом, спосіб прогнозування чутливості пацієнта, який отримує лікування антитілом або його активним фрагментом. Даний винахід може знайти подальше застосування у діагностиці та терапії пов'язаних з бета-амілоїд хвороб, таких як хвороба Альцгеймера. 8 н. і 1 з.п. ф-ли, 4 іл., 5 табл., 17 пр.

Специфічні сполуки диарилгидантоина і диарилтиогидантоина

Група винаходів відноситься до фармацевтичної композиції на основі сполуки формули (I) або його фармацевтично прийнятною солі або сольвата, де X є S або O, і якщо Х є S, R1 є OH або NH2; якщо X O, R1 є OH, NH2 або NHMe. Винахід відноситься до з'єднання формули (I) і набору на його основі. Технічний результат: отримано нові похідні имидазолидина, корисні при лікуванні раку простати. 5 н. і 23 з.п. ф-ли, 14 табл., 14 пр.
Винахід відноситься до фармацевтичної композиції для лікування безсоння. Зазначена композиція включає корінь горця багатоквіткового та/або його екстракти, насіння зизифуса колючого та/або його екстракти, плоди шовковиці та/або його екстракти, ганодерма і/або його екстракти, цибулину лілії та/або її екстракти, кореневище анемаррени та/або його екстракти, корінь шавлії многокорневищного та/або його екстракти, квітка хризантеми та/або його екстракти, порию і/або її екстракти і квітка альбиции та/або його екстракти. Винахід відноситься до застосування зазначеної композиції. Заявлений винахід забезпечує седативний і снодійний ефекти, сприяє стимуляції пам'яті. 4 н. і 13 з.п. ф-ли, 6 табл., 14 пр.

Пиразолопиридиновие похідні як інгібітори надфн-оксидази

Винахід відноситься до галузі органічної хімії, а саме до нових похідних пиразолопиридина формули (I), а також до його таутомерам, геометричним ізомеру, энантиомерам, диастереомерам, рацематам і фармацевтично прийнятним солей, де G1 являє собою Н; G2 являє собою-CHR1R2; R1 і R2 незалежно один від одного обирають з-Н; С1С6-алкокси-С1С6-алкила; С1-С6-алкила; необов'язково заміщеного фенила; необов'язково заміщеного феніл-С1-С6-алкила; необов'язково заміщеного морфолин-С1-С6-алкила; або-CHR1R2 разом утворюють кільце, вибирається з необов'язково заміщеного С3-С8-циклоалкила і заміщеного пиперидина; G3 обирають необов'язково заміщеного С1С6-алкокси-С1-С6-алкила; С1-С6-алкила; заміщеного фенила; заміщеного феніл-С1С6-алкила; G4 вибирають з заміщеного ацил-С1С6-алкила, де ацил являє собою групу-CO-R і R-Н або морфолин; необов'язково заміщеного С1-С6-алкила; необов'язково заміщеного фенила або индена; заміщеного феніл-С1-С6-алкила; необов'язково заміщеного піридин - або фуранил-С1С6-алкила; морфолин - або пиперидин-С1-С6-алкила; G5 являє собою Н; де термін "замещенний" позначає групи, заміщені від 1 до 5 заступниками, вибираними з групи, яка включу NRCOR', де R являє Н і R' являє С1-С6-алкіл, "феніл", "фтор-замещенний феніл", "С1-С6-алкокси", "С1-С6-алкоксикарбонил", "галоген". Винахід відноситься до фармацевтичної композиції на основі сполуки формули (I) і конкретним з'єднанням. Технічний результат: отримано нові похідні пиразолопиридина, корисні для лікування та/або профілактики порушень або станів, пов'язаних з НАДФН-оксидазою. 3 н. і 9 з.п. ф-ли, 3 табл., 21 пр.

Вакцина проти інтермедіату з амилоидним згортанням

Винахід відноситься до галузі біохімії, зокрема до циклічного пептиду, здатний індукувати антитільний відповідь. Пептид складається з формули X2X3VGSNK-Z або X3VGSNKG-Z, де Х2 являє собою E, G, Q або K, X3 являє собою D або N і Z являє собою агент, стабілізуючий вигин, присутній всередині послідовності пептиду, при цьому пептид циклизован шляхом ковалентного зв'язування N-кінцевої амінокислоти з Z, де Z являє собою пептидний фрагмент YNGK. Також заявлено кон'югат, що містить зазначений циклічний пептид, кон'югований з иммуногенной молекулою носія. Пептид і містить його кон'югат можуть застосовуватися для виробництва лікарського засобу або в якості вакцини проти хвороби Альцгеймера. Також представлені способи отримання циклічного пептиду та кон'югату. Винахід дозволяє отримати кращу, менш токсичну вакцину проти хвороби Альцгеймера. 6 н. і 2 з.п. ф-ли, 11 іл., 1 табл., 2 пр.

З'єднання плазмалогенів, що містять їх фармацевтичні композиції і способи лікування вікових захворювань

Винахід відноситься до нових сполук формули I, у якій R1 і R2 є однаковими або різними і обрані з алкільного або алкенильной вуглеводневої ланцюга, значення групи R3, яка відщеплюється ліпазою, визначені у формулі винаходу. R4 і R5 є незалежно воднем або С1-С7алкилом; R6 являє собою водень або С1-С7алкил; і R7 і R8 незалежно є воднем або С1-С7алкилом. Винахід відноситься до застосування сполук формули I, які при введенні в біологічну систему ссавця призводять до підвищення клітинних концентрацій специфічних sn-2 заміщених етаноламін-плазмалогенів. Дані сполуки можуть застосовуватися для лікування або попередження вікових захворювань, асоційованих з підвищеним рівнем холестерину в мембрані, підвищеним рівнем амілоїду і зниженими рівнями плазмалогенів, таких як нейродегенерация, когнітивне порушення, деменції, рак, остеопороз, біполярні порушення та судинні захворювання. 5 н. і 6 з.п. ф-ли, 18 іл., 7 пр.

Трансдермально абсорбируемий склад, що містить донепезил

Група винаходів відноситься до медицини. Описаний трансдермально абсорбируемий склад, одержаний шляхом розчинення донепезила в адгезивної основі пластиру, що містить гідрофобний полімер і підсилювач абсорбції. Підсилювач абсорбції являє собою одну речовину, або два, або більше речовин, вибраних з лаурилового спирту, триэтилцитрата, изопропилмиристата, цетиллактата, олеилового спирту, сорбитанмоноолеата, полиэтиленгликольмоностеарата, лауромакрогола, N-метил-2-піролідону і триацетина. Трансдермально абсорбируемий склад може стійко вводити донепезил протягом тривалого періоду часу і може забезпечувати як швидке підвищення рівня донепезила в крові, так і властивості уповільненого вивільнення донепезила. 3 н. і 3 з.п. ф-ли, 4 іл., 6 табл., 26 пр.

Застосування мимотопов для лікування бета-амилоидозов

Група винаходів відноситься до медицини і стосується застосування щонайменше одного пептиду, вибраного з групи, що включає SEFKHG(З), TLHEFRH(З), ILFRHG(З), TSVFRH(C), SQFRHY(З), LMFRHN(З), SPNQFRH(З), ELFKHHL(З), THTDFRH(З), DEHPFRH(З), QSEFKHW(З), ADHDFRH(З), YEFRHAQ(С) і TEFRHKA(З), для виробництва лікарського засобу для профілактики та/або лікування хвороби Альцгеймера. Група винаходів також стосується вакцини, що містить щонайменше один зазначений пептид, призначеної для індукції імунної відповіді, спрямованого проти Аβ. Група винаходів забезпечує сприятливий ефект вакцинації вакцинами з мимотопами при лікуванні хвороби Альцгеймера. 6 н. і 18 з.п. ф-ли, 3 ін., 10 іл., 5 табл.
Up!