Автоматичний спосіб і автомат для підготовки і аналізу множини клітинних суспензій

 

Винахід відноситься до способу підготовки і аналізу множини клітинних суспензій, що містить, щонайменше, наступні послідовні етапи, на яких:

(a) на приймальний майданчик завантажують безліч флаконів, при цьому кожен флакон містить призначену для аналізу клітинну суспензію;

(b) на приймальний майданчик завантажують безліч аналітичних ємностей;

(c) з флакона відбирають пробу клітинної суспензії і цю пробу вводять в аналітичну ємність; етап (з) повторюють для кожного аналізованого флакона.

Винахід відноситься також до автомата для підготовки та аналізу, в якому застосовують цей спосіб.

Аналіз клітинної суспензії і, наприклад, фіксованого тонкого шару цитологічної проби є виключно делікатною операцією. Цитологічна діагностика охоплює діагностичні технології, засновані на морфологічному дослідженні клітин. Вона дуже добре підходить для виявлення раку та передракових уражень, зокрема, шийки матки.

Дійсно, метою такого аналізу є виявлення патологічних клітин, тому необхідно, щоб клітинна проба була читабельною щоб уникнути діагностичних помилок і добре характериЕтараются автоматизувати процес підготовки проб з метою їх аналізу, а також сам їх аналіз. Для цього використовують відомі автомати, що дозволяють готувати аналітичні пластинки з пробами, такими як мазки, та іншими.

Автомат вищевказаного типу описаний, наприклад, у документі US 2009/0233331.

Однак такі автомати не завжди дозволяють готувати клітинні проби, що забезпечують задовільний аналіз, і отримувати надійний діагноз. В таких автоматах використовують пристрої, що включають в себе певну кількість артефактів, що створює проблеми управління тиском фільтра, призводить до змін клітинної морфології і до закупорювання осередків фільтра фрагментами. Крім того, маніпуляції розрізняються в залежності від типу проби: наприклад, перед збором клітин на фільтрі іноді необхідно видалити еритроцити або слиз.

Таким чином, неможливо застосовувати стандартний спосіб, загальний для всіх типів гінекологічних або не гінекологічних цитологічних проб і обмежує до мінімуму втручання операторів.

Одним із завдань винаходу є усунення цих недоліків за рахунок повної автоматизації підготовки й аналізу цитологічних суспензій за допомогою надійного, репродуктивного і швидкісного стандартного способу. Незалежно від типу ціто� аналізу безлічі клітинних суспензій, в якому етап (з) відбору проби клітинної суспензії з флакона і введення цієї проби в аналітичну ємність містить, щонайменше, етап руйнування клітинних скупчень за допомогою пипеточних дозувальних коштів.

Згідно з іншим відмітним ознаками способи:

- етап (з) відбору проби клітинної суспензії з флакона і введення цієї проби в аналітичну ємність містить, щонайменше, етап перемішування і фільтрування клітинної суспензії у флаконі,

- етап (з) відбору проби клітинної суспензії з флакона і введення цієї проби в аналітичну ємність додатково містить, щонайменше, наступні етапи:

(d) повторне переведення проби в суспензію;

(e) вибір релевантних клітин за допомогою диференціальної декантації;

(f) всмоктування об'єму, отриманого в результаті диференціальної декантації, за допомогою пипеточних коштів, при цьому обсяг містить призначену для аналізу пробу;

(g) повторний переклад обсягу, що містить призначену для аналізу пробу, в однорідну суспензію в пипеточних засобах;

(h) переміщення пипеточних коштів для їх розміщення над аналітичної ємністю;

(i) виливання призначеної для аналізу проби в аналитическ�оложенную навпаки декантационной чашки, і спосіб містить, щонайменше, наступні послідовні етапи:

(j) розміщення абсорбційного листа на завантажувальної майданчику таким чином, щоб кожна аналітична платівка розташовувалася між завантажувальної майданчиком і абсорбційним листом;

(k) завантаження безлічі декантационних чашок в прес і установка преса над майданчиком таким чином, щоб кожна декантационная чашка розташовувалася зверху і навпаки аналітичної пластинки;

(l) нанесення тонкого шару клітинної проби на аналітичну пластинку, при цьому нанесення тонкого шару клітинної проби відбувається в результаті введення проби в декантационную чашку;

при цьому етапи (j) та (k) здійснюють після етапу (b) завантаження безлічі аналітичних ємностей і перед етапом (с) відбору проби клітинної суспензії, і етап (l) здійснюють після етапу (с) відбору проби клітинної суспензії;

- він містить етап аналізу клітинного відкладення на дні декантационних чашок допомогою вимірювання клітинної щільності на аналітичних пластинках;

- він містить автоматизований етап фарбування або маркування клітин;

- він попередньо містить етап остаточного закриття флакона, що містить призначену для * аналітична ємність містить трубку для відбору або для аликвотирования.

Об'єктом винаходу є також автомат для відбору проб і аналізу, щонайменше, однієї клітинної суспензії, що містить:

- щонайменше, один флакон, що містить призначену для аналізу клітинну суспензію;

- щонайменше, одну прийомну майданчик, на якій встановлюють і точно і нерухомо кріплять флакон;

- щонайменше, одну чашку для декантації клітинної суспензії, при цьому декантационную чашку мають і кріплять точно і нерухомо на майданчику;

- систему аналізу, що містить, щонайменше, одну аналітичну пластинку, призначену для розміщення на ній проби клітинної суспензії, при цьому проба є об'ємною частиною клітинної суспензії, що містить відповідні призначені для аналізу елементи, і аналітичну пластинку мають і кріплять точно і нерухомо на майданчику знизу і навпаки декантационной чашки;

автомат містить пипеточние кошти, виконані з можливістю відбору проби клітинної суспензії з флакона і виливання цієї проби у декантационную чашку на аналітичну пластинку системи аналізу, причому цим кошти виконані з можливістю руйнування клітинних скупчень.

Згідно з іншим отличительниа, при цьому зазначений переміщається кронштейн, щонайменше, над адміністратора майданчиком, на якій знаходяться флакони, декантационние чашки і аналітичні пластинки;

- він містить розчини для маркування або фарбування, які можна змішати з цитологічним розчином за допомогою пипеточних коштів;

- кожен флакон і кожна аналітична платівка містить візуальну маркування, і автомат містить засоби зчитування візуальних маркувань;

- засоби зчитування містять знімальну камеру і встановлені на другому рухомому кронштейні, при цьому зазначений другий переміщається кронштейн, щонайменше, над адміністратора майданчиком, на якій знаходяться флакони, декантационние чашки і аналітичні пластинки;

- флакон містить засоби фільтрування, розташовані над декантационним конусом, при цьому пипеточние кошти виконані з можливістю відбору частини клітинної суспензії під засобами фільтрування і повторного направлення зазначеної частини на декантационний конус для перемішування зазначеної клітинної суспензії і, щонайменше, одноразового пропускання частини зазначеної суспензії через засоби фільтрування для руйнування клітинних скупчень, розмір яких пре�кових відкладень на дні декантационной чашки на аналітичній платівці;

- засоби аналізу клітинної щільності клітинних відкладень на дні декантационной чашки на аналітичній платівці містять знімальну камеру;

- система аналізу проби містить пристрій для отримання віртуальної пластинки проби;

- пристрій для отримання віртуальної пластинки проби містить знімальну камеру;

- він містить єдину знімальну камеру, що утворить засоби зчитування, засоби аналізу клітинної щільності і пристрій отримання віртуальної пластинки;

- він містить опору, що містить засоби позиціонування, щонайменше, майданчики, виконані з можливістю нерухомого і точного кріплення майданчики, і кнопку, виконану з можливістю підтвердження положення, щонайменше, майданчики;

- він виконаний з можливістю застосування описаного вище способу;

- клітинна суспензія є цитологічної суспензією;

- цитологічна суспензія містить фіксуючий розчин, що містить від 80% до 95% за обсягом:

- 590 мл фізіологічного розчину,

- 10 мл ПЕГ,

- 203 мл ізопропілового спирту,

- 193 мл чистого етилового спирту,

- 0,01% за обсягом азиду натрію,

і від 20% до 5% за об'ємом 4%-го буферного формаліну.

Винахід буде б�рилагаемие креслення.

На фіг.1 схематично показаний автомат для відбору проб і аналізу згідно з винаходом, вид в розрізі;

на фіг.2 схематично показаний автомат, зображений на фіг.1, вигляд у перспективі;

на фіг.3 схематично показана приймальня майданчик автомата для підготовки та аналізу, на якій розміщують флакони, кожен з яких містить клітинну суспензію, вигляд зверху;

на фіг.4 показаний флакон, призначений для установки в автоматі, вид в розрізі;

на фіг.5 показана декантационная чашка, призначена для установки в автоматі, вид в розрізі;

на фіг.6 схематично показані засоби аналізу автомата, зображеного на фіг.1 і 2, вигляд у перспективі;

на фіг.7 показаний флакон під час етапу перемішування при здійсненні способу підготовки і аналізу клітинної суспензії, вид у розрізі.

На фігурах показаний автомат 2 для підготовки і аналізу клітинної суспензії, що дозволяє автоматизувати цю підготовку і цей аналіз.

Дійсно, на фіг.1 і 2 показано автомат 2 для підготовки та аналізу, щонайменше, одного флакона 4, що містить призначену для аналізу клітинну суспензію 5, наприклад, фіксовану цитологічну суспензію.

Така цитологічна суспензія 5 може �ри допомогою щітки для взяття мазків (не показана). Ця цитологічна суспензія містить, зокрема, клітини.

Після цього щітку занурюють у флакон 4, що містить фіксатор, і очищають на фільтрі для вилучення і збору клітин і набуття, таким чином, клітинної суспензії 5.

Фіксатор або фіксуючий розчин призначений для захисту та збереження цитологічних проб, що містять клітини, з метою їх подальшого аналізу фахівцем-цитологом. Отже, фіксатор повинен повністю зберігати всі містять ядра клітини і еритроцити, зокрема, їх морфологію у тому стані, в якому вони перебували до взяття проби.

Фіксуючий розчин призначений для оберігання in vitro цитологічної проби, що містить біологічні клітини, призначені для аналізу цитологом.

Як відомо і було опубліковано Саккоманно і колегами, спиртовий фіксуючий розчин може також містити Carbowax® або поліетиленгліколь (ПЕГ). Як відомо з публікацій, формалін можна об'єднати з декальцинаторами або антиагрегантами, такими як етилендиамінтетраоцтова кислота (EDTA) та її солі. Як відомо й було опубліковано, до пробам, що містить слиз, можна додавати муколітичний засіб, таке як дитиотреитол (DTT) або ацетилцистеїн.

�ву основу з точки зору розміру, що дозволяє цитологу робити більш точний діагноз.

Нижченаведений неограничивающий приклад ілюструє фіксуючий розчин:

Приклад:

розчин, що містить у кількості 80% за обсягом:

- 590 мл фізіологічного розчину,

- 10 мл ПЕГ,

- 203 мл ізопропілового спирту,

- 193 мл чистого етилового спирту,

- 0,01% за обсягом азиду натрію,

і 20% за об'ємом 4%-го буферного формаліну.

Фіксуючий розчин згідно з винаходом не містить ацетону або сполук з сімейства кетонів, а також оцтової кислоти, так як ці речовини руйнують еритроцити, які, розпадаючись, вивільняють гемоглобін, закріплюється на клітинах. Деякі типи фарбування, такі як фарбування по Папаніколау, враховуючи комплексний характер барвників, які об'єднують кілька ядерних барвників і гемоглобін, роблять цитологічний і, зокрема, ядерний аналіз дуже складним і навіть неможливим. Точно так само, відкладення гемоглобіну часто заважають імуно-цитохімічним досліджень.

Згідно винаходу, підвищується якість подальших аналізів проби за допомогою фарбування по Папаніколау або імуно-цитохімічних досліджень проби, зафіксованої у фіксуючому розчині, описанн�Описаний вище фіксуючий розчин забезпечує, таким чином, відмінне збереження цілісності містять ядра клітин і еритроцитів з метою їх аналізу.

Крім того, описаний вище фіксуючий розчин, що містить ПЕГ та/або формальдегід, має, таким чином, щільність, відмінну від класичних фіксаторів, застосованих в цитології і в основному є спиртовими. Заявник встановив, що фіксуючий розчин дозволяє проводити вибір потрібних клітин через градієнт щільності більш ефективно, ніж класичні фіксатори, що застосовуються в цитології.

Крім того, автомат 2 містить, щонайменше, одну прийомну майданчик 6, на якій перебуває, щонайменше, флакон 4, що містить призначену для аналізу клітинну суспензію 5, і опору 8, на якій розташована приймальня майданчик 6.

Приймальна площадка 6 призначена для розміщення безлічі флаконів 4, кожен з яких містить клітинну суспензію 5, з метою швидкого і автоматичного підготовки безлічі призначених для аналізу клітинних суспензій 5, причому одночасно або послідовно, або суспензій. Така приймальня майданчик 4 вже була описана в патентній заявці ЕР-2111300, поданої на ім'я заявника, і дозволяє позиціонувати і точно і нерухомо удержив�кументу, і докладний опис цього майданчика опускається. Майданчик схематично показано на фіг.3.

Опора 8 містить засоби позиціонування майданчика 6, виконані з можливістю нерухомого утримання майданчика в автоматі 2. Ці засоби позиціонування містять засоби 9 для розміщення крайньої частини майданчика 6, при цьому майданчик розташовують навпроти або в межах коштів 9, коли її встановлюють автомат 2.

Крім того, майданчик 6 містить засоби позиціонування на опорі 8. Ці засоби позиціонування містять, щонайменше, один отвір 10, виконане в товщі майданчика, але не є наскрізним, і призначене для точної установки майданчика на опорі 8 автомата 2. Переважно майданчик 6 містить два ідентичних отвори, розташованих ортогонально по відношенню до самої довгій стороні майданчика 4.

Опора 8 автомата 2 містить засоби позиціонування, доповнюють засоби позиціонування майданчика 6. Ці засоби містять, щонайменше, один шип 12 і переважно стільки ж шипів, скільки отворів 10 виконано на майданчику 6. Форма шипа 12 відповідає формі отвори майданчики, а його розмір трохи менше, щоб під час встановлення майданчика 6 на опору 8 шип 12 перебував � Крім того, опора 8 автомата 2 містить кнопку або натискну кнопку 14, призначену для підтвердження нормальної горизонтальної установки майданчика 6 на опорі 8. Дійсно, якщо майданчик 6 встановлена нормально, тобто нижня сторона майданчика повністю входить в контакт з опорою 8, так як шипи 12 зайшли в отвори 10, кнопка 14 заглиблюється в опору 8 у передбачену для цього виїмку 16, забезпечуючи, таким чином, нормальну встановлення майданчика 6 і дозволяючи автомату 2 працювати. Якщо кнопка 14 не заглиблена, автомат працювати не може.

Крім того, автомат 2 містить пипеточние і дозувальні кошти 20, звані в подальшому пипеточними засобами або засобами відбору, тобто дозволяють відбирати та/або виливати/заливати пробу клітинної суспензії 5. Ці пипеточние кошти 20 розташовані над адміністратора майданчиком 6. Проба є точною за обсягом дозою клітинної суспензії 5, що містить призначені для аналізу елементи, наприклад, клітини.

Ці пипеточние кошти 20 виконані рухомими таким чином, щоб проходити над кожним флаконом 4 для здійснення відбору та/або заповнення, як показано стрілками на фіг.1. Пипеточние кошти 20 являють собою, щонайменше, одну піпетку 22 або ними паралельно для забезпечення одночасного відбору проб з безлічі 4 флаконів і для їх одночасної підготовки з метою аналізу.

Пипеточние кошти 20 закріплені на першому рухомому роботизованому кронштейні на автоматі 2 над майданчиками 6.

Пристрій (отвори 10/шипи 12 і кнопка 14), що забезпечує точне позиціонування на опори, що дозволяє уникнути поломки голок або піпеток 22, не даючи їм стикатися з краями флаконів 4, що могло б статися, якби майданчик була погано позиціонована по відношенню до пипеточним засобів 20. Таким чином, це дозволяє уникнути додаткових витрат з технічного втручання для заміни зламаного або деформованого обладнання.

Крім того, автомат 2 містить систему 30 підготовки та аналізу, що містить аналітичний пристрій, призначену для розміщення проби клітинної суспензії 5, відбирається і виливаної або на аналітичне пристрій за допомогою пипеточних коштів 20.

Наприклад, аналітичні пристрої цієї системи 30 підготовки і аналізу можуть містити пластинки 32 для нанесення шару проби, трубки 34 для відбору або аликвотирования, аналітичні або декантационние чашки 36 в залежності від способу аналізу, обраного фахівцем.

Аналітичні пристрої 32, 34, 36 точно і нерухомо закріплені на майданчику 6.

Детальний опис а 4, містить призначену для аналізу клітинну суспензію 5.

Переважно цей флакон 4 має такі ж характеристики, як і описані в документі ЄР-2111300, щоб забезпечувати можливість кріплення флакона 4 на приймальній площадці 6, і деякі характеристики, описані в документі WO-2006/058989, для забезпечення можливості підготовки і аналізу клітинної суспензії.

Як показано на фіг.4, флакон 4, що містить цитологічну суспензію 5, містить корпус 40, наприклад, по суті циліндричної форми. Починаючи від цього корпусу 40, виконані нижній борт 42 і засоби 44 блокування, розташовані з двох сторін корпусу і виступаючі з нього, забезпечуючи блокування флакона 4 на приймальній площадці 6, як описано в документі ЄР-2111300, в поздовжньому напрямку і в напрямку висоти. Кошти 44 блокування призначені для заходження в пази направляючих майданчика 6 таким чином, щоб заблокувати флакон 4 в пріоритетному напрямку. Фахівець може звернутися до цього документа для ознайомлення з роботою цього флакона 4 у взаємодії з приймальною майданчиком 6.

Крім того, флакон містить 4 кришку 46, наприклад, оснащену прокаливаемой або самозатягивающейся мембраною 48, забезпечує прохпозволяет, зокрема, не знімати кришку 46 з флакона, щоб зробити відбір клітинного розчину і, отже, забезпечити повний захист і зберегти цілісність розчину, який після відбору, проведеного лікарем або лаборантом, залишається в закритому флаконі протягом всього процесу підготовки і аналізу. Крім того, це дозволяє повністю усунути ризик зараження або вдихання фіксатора лаборантом.

Кришка 46 кожного флакона 4 додатково містить візуальну маркування 50 або ідентифікатор, призначений для ідентифікації клітинної суспензії 5, що міститься у флаконі 4. Наприклад, ця візуальна маркування 50 являє собою штрихкод. Цей ідентифікатор 50 забезпечує повне відстеження під час підготовки і аналізу за допомогою комп'ютерної обробки номерів проб.

Згідно з іншими варіантами здійснення, засоби ідентифікації є іншими, наприклад, етикеткою з нанесеною на неї інформацією або електронною мікросхемою, типу мікросхеми RFID, зміст якої можна вважати дистанційно за допомогою засобів зчитування.

Згідно варіанту здійснення, призначеному для підготовки цитологічних проб, що вимагають застосування щітки для взяття мазків, флакон 4 онте WO-2006/058989. Ці кошти 52 фільтрування виконані у вигляді сітки фільтруючого матеріалу, наприклад, утворює кошик, периферія якої закріплена на корпусі 40 флакона, і центр якої з'єднаний з трубкою 54, що проходить в напрямку отвори флакона, пов'язаної із засобами утримання в положенні у флаконі та виконаною з можливістю проходження через неї коштів 20 відбору клітинного розчину автомата під засобами фільтрування, зокрема, піпетки 22 для всмоктування суспензії.

Переважно сітка фільтруючого матеріалу являє собою плетений нейлон, забезпечує механічне дію відділення клітин під час тертя щітки з матеріалу без пошкодження проби.

Крім того, нижня частина флакона 4 містить декантационний конус 56.

Крім того, як відомо, флакон містить 4 отвір, призначене для введення знімною щітки для взяття цитологічної проби, яка закріплена на рукоятці-маніпуляторі. Отвір флакона містить наполегливі кошти для щітки, що дозволяють блокувати її у флаконі і відокремити її від рукоятки.

Фахівець може звернутися до цього документа для ознайомлення з особливостями цього флакона, і тому його подальший опис опускається. Такий флак�ня, призначений для підготовки цитологічних проб і не вимагає застосування щітки для взяття проб, наприклад, для проб типу біопсії або збору рідин, флакон 4 не обладнаний ні центральною трубкою, ні засобами фільтрування.

Далі йде детальний опис системи 30 підготовки і аналізу.

Як показано на фіг.5, система 30 підготовки та аналізу переважно містить пристрій 60 декантационного відкладення клітин на аналітичній платівці. Такий пристрій 60 декантационного відкладення клітин на аналітичній платівці вже описано в документі FR-2917165, і фахівець може звернутися до цього документа.

Це пристрій 60 містить, щонайменше, одну декантационную чашку 36, встановлену над аналітичної платівкою 32, і абсорбуючий матеріал 62.

Аналітична платівка містить 32 на кінцевій частині кошти 50 ідентифікації, наприклад, візуальну маркування типу штрих-коду.

За допомогою пипеточних коштів 20 суспензію заливають в приймальну камеру 64 декантационной чашки 36, що розташована над аналітичної платівкою 32, і дно якої відкрито і розташоване навпроти зони відкладення клітин аналітичної пластинки 32. Дно камери гідравлічно повідомляється матеріал з�рного декантационного відкладення клітин на зону відкладення клітин аналітичної пластинки 32. Таким чином, отримують рівномірне клітинне відкладення протягом короткого часу декантації.

Абсорбуючий матеріал 62 частково стиснутий декантационним пресом 66 між дном приймальної камери і аналітичної платівкою навколо зони клітинного відкладення.

Як показано на фіг.5 і 6, система 30 підготовки та аналізу містить засоби 70 вимірювання клітинної щільності в декантационной камері, щоб отримати аналітичну пластинку 32. Такі кошти 70 вимірювання клітинної щільності описані в документі FR 2922019, до якої фахівець може звернутися для більш повної інформації.

Так, кошти 70 вимірювання клітинної щільності містять знімальну камеру 72, виконану з можливістю отримання зображень майданчика 6, тобто вмісту декантационной камери 64 та аналітичної пластинки 32.

Крім того, кошти 70 вимірювання клітинної щільності містять манжету 74, закріплену навколо камери таким чином, щоб при опусканні знімальної камери та її розміщення над декантационной камерою 64 для зйомок зображень вмісту цієї камери манжета входила в контакт 74 з декантационним пресом 66 для отримання темної камери з забезпеченням світлонепроникності, щоб оптимізувати якість сънтационной камери, щоб камера 72 могла проводити вимірювання щільності. Ці засоби освітлення містять, наприклад, джерело 76 світла, закріплений на камері 72. Коли камеру 72 опускають, джерело 76 світла максимально наближається до краю аналітичної пластинки 32 для забезпечення оптимального пропускання світла. При цьому джерело 76 світла розсіює світло в аналітичній платівці 32.

Кошти 70 вимірювання клітинної щільності закріплені на другому рухомому роботизованому кронштейні над флаконами 4 майданчиків 6.

Згідно з варіантом, аналітичні пристрої цієї системи 30 містять, щонайменше, одну трубку 34 для відбору або аликвотирования і утримувач 80, в який можуть заходити трубки 34 для закріплення в нерухомому положенні. Цей тримач 80 трубок 34 аликвотирования точно кріплять на майданчику 6, щоб пипеточние кошти 20 могли відбирати проби цитологічних розчинів 5, містяться у флаконах 4, і виливати їх у трубки 34 аликвотирования, при цьому флакони закріплені на тому ж майданчику, що і трубки аликвотирования.

Дві можливості, одна з яких відповідає декантационной чашці 36, встановленої над аналітичної платівкою 32, і абсорбуючому матеріалу 62, а інша - трубці 34 відбору або алік� додаткових дій систематично або у взаємозв'язку з результатами аналізу щільності на не пофарбованої платівці, що забезпечує кращий контроль передує аналізу етапу.

Автомат 2 додатково містить засоби 90 дистанційного зчитування, призначені для ідентифікації візуальної маркування 32 флаконів 4. Ці кошти 90 зчитування містять ширококутну знімальну камеру і розташовані над адміністратора майданчиком 6. Ці кошти 90 дистанційного зчитування встановлені на другому рухомому роботизованому кронштейні автомата, при цьому зазначений другий кронштейн переміщається над кожним флаконом 4, закріпленим на майданчику 6, для зчитування візуальної маркування 50 або ідентифікатора, що знаходиться на кришці 46.

Знімальний камеру розташовують таким чином, щоб вона могла прочитувати ідентифікаційні дані 50 аналітичної пластинки 32. Ці дані передаються, наприклад, комп'ютерну систему обробки, що забезпечує якісний моніторинг множини аналітичних пластинок і об'єднує інформацію про шарі клітинної проби, що знаходиться на цій платівці. Ці дані містять, зокрема, походження клітинної проби, при цьому маркування аналітичної пластинки пов'язана з маркуванням флаконів 4.

Згідно кращого варіанту здійснення, камера 72 70 аналіз�ої щільності і засоби 90 дистанційного зчитування об'єднані, що дає виграш в просторі.

Переважно маркування 50 орієнтовані в точній і незмінному напрямку після закріплення кришки на корпусі, що дозволяє легко використовувати засоби 90 дистанційного зчитування маркувань. Незмінну орієнтацію можна забезпечити за допомогою засобів 44 блокування флакона 4, описаних у документі EP-2111300.

За рахунок спеціальної спрямованості флаконів 4 ці кошти 90 дистанційного зчитування забезпечують унітарне або множинне візуальне спостереження цих флаконів з метою їх унітарного або множинного відповідності з передбаченою системою аналізу (аналітичні пластинки 32, трубки 34 для відбору або аликвотирования, аналітичні чашки 36...), яка позиціонована нерухомо. Це означає, що кошти 90 зчитування дозволяють зчитувати маркування 50 тільки одного флакона або кілька маркувань одночасно. Це нерухоме позиціонування, яке відповідає, наприклад, аналітичним пластинок 32, розташованим в декантационном пресі 66, відбувається в продовженні направляючих, описаних у документі EP-2111300 і службовців опорою для флаконів 4, таким чином, що майданчик забезпечує нормальне позиціонування флаконів 4 і п�кім чином, можна здійснювати спільну обробку флаконів, що забезпечує високу швидкість аналізу.

Автомат додатково містить не показаний процесор для збору параметрів, вибраних користувачем в залежності від характеру цитологічної проби, а також для управління роботизованими кронштейнами, пипеточними 20 засобами, засобами 90 зчитування, засобами 70 аналізу клітинної щільності, кнопкою 14 (переміщеннями, обсягами проб, зйомками за допомогою камери, джерелом світла...).

Згідно варіанту здійснення, автомат містить також не показаний тримач, точно закріплений на опорі 8 автомата 2 і містить флакони з розчинами, зазвичай використовуваними для фарбування або маркування специфічних елементів клітин, таких як ядра, цитоплазми або інші елементи клітини. Цей тримач забарвлюють або «маркувальних» розчинів дозволяє здійснювати етапи фарбування або маркування на аналітичних платівках, часто вживані фахівцем. Цей етап фарбування або маркування здійснюють за допомогою пипеточних коштів 20, які після розміщення над флаконами з ми, офарблюють або маркувальними розчинами відбирають необхідний обсяг, потім переміщаються над ана�ществления, система 30 аналізу автомата 2 додатково містить пристрій реалізації віртуальної пластинки проби, описане в документі FR-2931966 і містить знімальний камеру. Згідно варіанту здійснення, використовують ту ж камеру, яку застосовують для засобів аналізу та/або для засобів зчитування.

Таким чином, автомат містить в даному випадку єдину знімальну камеру, що утворить засоби 90 зчитування, засоби 70 аналізу клітинної щільності і пристрій реалізації віртуальної пластинки, що дозволяє отримати виграш у місці.

Далі йде докладний опис способу підготовки і аналізу цих суспензій за допомогою описаного вище автомата 2 для випадку підготовки аналітичних пластинок 32.

Попередньо, відібравши призначені для підготовки та аналізу клітинні проби 5 і помістивши їх у флакони 4, спеціаліст остаточно закриває флакони 4 за допомогою кришок 46. Дійсно, спосіб підготовки і аналізу цих суспензій в подальшому здійснюють без відкривання флаконів 4.

В іншому варіанті здійснення у разі відбору цитологічної проби у вигляді пункції за допомогою тонкої голки (Fine Needle Aspiration) фахівець може ввести клітинну пробу, проколів голкою самозатягивающуюсѽия клітин, наприклад, не менше двох годин, спеціаліст або користувач завантажує 4 флакони з клітинними суспензіями 5 на завантажувальну площадку 6, а також таку ж кількість ємностей системи 30 аналізу, переважно аналітичних пластинок 32.

Після цього він має абсорбуючий лист 62 на майданчику 6 таким чином, щоб кожна аналітична платівка 32 опинилася між завантажувальної майданчиком 6 і абсорбційним листом 62. У прес 66 завантажують безліч декантационних чашок 36. Декантационний прес 66 розташовують над майданчиком 6 таким чином, щоб кожна декантационная чашка 36 знаходилася над аналітичної платівкою 32, як описано в документі FR-2917165.

Потім майданчика 6 завантажують в автомат 2 на його опору 8 і точно закріплюють за допомогою взаємодоповнюючих коштів 10, 12 позиціонування майданчиків і опори 6 8 автомата 2 і кнопки 14, яка фіксує це положення, якщо воно є правильним.

Фахівець або користувач запускає програму, вибирає дуже прості параметри в залежності від числа і типу проб, розміщених на автоматі і запускає процес підготовки.

Засоби 90 зчитування ідентифікують візуальні маркування 50 флаконів 4 і аналітичних пластинок 32, що дозволяє встановити змі аналітичними пластинками 32.

Кошти 20 відбору переміщують над флаконом 4, що містить призначений для аналізу клітинний розчин 5. Голка або піпетка 22 коштів 20 відбору проходить через самозатягивающуюся мембрану 48 кришки 46 флакона 4 і занурюється в клітинну суспензію.

Після цього за допомогою піпетки 22 коштів 20 відбору здійснюють відбір проби клітинної суспензії з флакона 4.

Для цього клітинну суспензію 5 перемішують в аналітичному флаконі 4 за допомогою піпетки 22 пипеточних коштів 20 допомогою всмоктування/відбору першого клітинного об'єму розчину, потім за допомогою нагнітання/введення першого обсягу в клітинний розчин, як показано стрілкою F на фіг.7. Переважно перший обсяг по суті становить від 50 мкл до 2000 мкл клітинної розчину. Метою цього етапу є дроблення/руйнування клітинних скупчень призначеної для аналізу цитологічної проби 5 на стінці декантационного конуса 56 флакона 4. Крім того, клітини, повторно вводяться у флакон, що проходять над засобами фільтрування для руйнування клітинних скупчень, розмір яких перевищує розмір ячейок фільтра, що дозволяє здійснити друге фільтрування проби і повторне переведення проби в зважений стан.

Після цього Ћй інтервал часу по суті становить від 5 хвилин до 12 годин в залежності від обраного способу аналізу, наприклад, дорівнює 15 хвилин для підготовки аналітичної пластинки. Цей етап дозволяє встановити градієнт між призначеними для аналізу клітинами і запальними або геморагічними клітинами, що є диференціальної декантацией.

Потім здійснюють етап всмоктування розчинів, які в подальшому заливають в аналітичну ємність. Цей етап містить i) всмоктування обсягу клею пипеточними засобами для забезпечення зчеплення клітин з аналітичної платівкою 32 незалежно від її типу або об'єму буферного розчину, ii) у разі необхідності, обсягу повітря, як описано в документі FR 2919054, потім iii) клітинного об'єму розчину на дні декантационного конуса 56, містить необхідні так звані релевантні клітини, тобто клітини, які знаходяться в нижній частині розчину в результаті першої диференціальної декантації.

Переважно обсяги клею і клітинного розчину є еквівалентними і по суті складають від 50 мкл до 1000 мкл, наприклад, 250 мкл.

У варіанті здійснення з трубками для аликвотирования обсяг клею є нульовим.

Переважно цей останній етап відбору клітинного об'єму розчину здійснюють у два підетапи: перший підетап, називкросмешивание» полягає у всмоктуванні обсягу цитологічного розчину безпосередньо над дном декантационного конуса флакона, наприклад, на висоті 2 мм, при цьому обсяг становить від 20 мкл до 200 мкл, наприклад, 100 мкл, після чого пипеточние кошти знову нагнітають частина відібраного обсягу, наприклад, 50 мкл, по суті в те ж місце, щоб уникнути утворення «мертвого об'єму або дна» 100, тобто для відділення клітин від дна декантационного конуса 56 за рахунок сили нагнітання пипеточних засобів 20 і виключно локального повторного переведення у зважене стан.

Цей етап «микросмешивания» є факультативним, і його можна замінити простим етапом відбору обсягу цитологічного розчину.

Використання клею, призначеного для зчеплення клітин з аналітичними пластинками 32, дозволяє використовувати пластинки, які не пройшли спеціальної обробки для зчеплення клітин, і скоротити таким чином, витрати на підготовку і аналіз цитологічних розчинів.

Наприклад, відбирають 250 мкл клею і 100 мкл цитологічного розчину, що містить потрібні клітини, потім повторно нагнітають 50 мкл проби цитологічного розчину, що міститься в піпетці, і відбирають 200 мкл цитологічного розчину, щоб отримати однакову кількість клею або буфера і необхідних клітин.

Після цього піпетка 22 автоматично привого розчину, як описано в документі FR 2919054. Цей етап дозволяє також розбавити і перевести в однорідну суспензію пробу в клеї або буфері за допомогою способу розведення, описаного в документі FR-2919054.

В іншому варіанті здійснення в буферний розчин можна додати маркери або барвники.

Потім пипеточние кошти 20 поміщають над декантационной чашкою 36, щоб залити/ввести пробу в декантационную камеру 64 і реалізувати аналітичну пластинку 32, містить призначений для аналізу тонкий клітинний шар. Клітинний шар отримують в результаті введення проби в декантационную чашку, як описано в документі FR-2917165, до якої фахівець може звернутися для більш повної інформації.

На платівці протягом другого інтервалу часу відбувається друга декантация. Переважно другий інтервал часу по суті становить від 5 до 60 хвилин і переважно дорівнює 15 хвилин для підготовки аналітичної пластинки.

Етапи відбору і реалізації пластинки 32 повторюють для кожного аналізованого флакона, диференційовано відбираючи патологічні релевантні клітини, необхідні фахівцеві-цитологу для діагнозу.

Потім здійснюють описаний, наприклад, у документі FR-2 922 019 етап ана�х пластинках 32, щоб запропонувати передує аналізу контроль для всіх проб, призначених для цитологічного аналізу або додаткових біологічних досліджень. Цей етап дозволяє визначити, чи достатньо клітин містить клітинний розчин, щоб отримати задовільний клітинне відкладення з метою надійного діагнозу і щоб автоматично скорегувати пробу для отримання клітинної щільності, необхідної для аналізу пластинки 32. Цей етап забезпечує якісний моніторинг аналітичної пластинки 32, приготовленої на основі клітинного розчину 5.

Згідно варіанту здійснення, за цим етапом аналізу відкладення клітин слід етап автоматичного фарбування або маркування.

Згідно варіанту здійснення, пипеточние кошти 20 містять безліч голок, переважно чотири або вісім, дозволяють готувати й аналізувати безліч клітинних суспензій паралельно і підвищити, таким чином, швидкість підготовки аналітичних платівок.

Автомат у відповідності з винаходом дозволяє автоматично обробляти мазки та інші цитологічні проби в тонкому шарі.

Одним з переваг автомата 2 згідно з винаходом є те, що ость всіх цитологічних розчинів і проб і дозволяє уникнути ризиків зараження та забезпечити безпеку для фахівця він не вдихає фіксатор). Це перевага пов'язана також з використанням флакона, об'єднує одночасно засоби фільтрування та засоби декантації для отримання тонкого шару цитологічної проби.

Крім того, на відміну від автоматів, описаних у документі US 2009/0233331, флакони 4 є нерухомими на опорі автомата 2, і над флаконами 4 переміщуються інші системи, такі як пипеточние кошти 20, засоби 70 зчитування та засоби 90 аналізу щільності, що забезпечує повну безпеку маніпулювання в лабораторії.

Крім того, він дозволяє домогтися більшої стандартизації. Дійсно, відбір всіх проб відбувається:

- в одному місці з допуском в десяту міліметра в декантационних конусах флаконів, завдяки точному і нерухомому позиціонуванню майданчиків, містять флакони та інші ємності (аналітичні пластинки, трубки аликвотирования, декантационние чашки);

- в однаковій кількості з допуском в один мікролітр, завдяки пипеточним засобів;

- в один час, так як відбір всіх проб здійснюють в ході одного процесу. Крім того, забезпечується повний контроль під час аналізу за рахунок комп'ютерної обробки номерів проб, завдяки візуальним маркуванням 50, нанесеним на �ські пластинки, за допомогою засобів дистанційного зчитування цих візуальних маркувань.

Спосіб корекції клітинної щільності, який застосовується автоматом для реалізації аналітичних пластинок, що дозволяє, в разі необхідності, збільшити відносну щільність патологічних клітин, зберігаючи при цьому чистий, але змістовний контекст аналізу та підвищуючи якість тонкого шару і покращуючи консервацію вибраних елементів. Це забезпечує більш надійну інтерпретацію порівняно з традиційною технологією і напівавтоматичними способами цитологічного аналізу в тонкому шарі.

Крім того, автоматична підготовка флакона або одночасно групи флаконів дозволяє істотно, на 90%, скоротити час технічної підготовки у порівнянні з традиційною технологією і напівавтоматичними способами цитологічного аналізу в тонкому шарі.

Нарешті, автоматизація дозволяє отримати реальну систему, що забезпечує якість і стандартизацію відкладення проби у вигляді тонкого шару, відтворюваність тонкого шару проби, збереження цілісності клітинної і полегшене зчитування. Вона дозволяє також суттєво скоротити технологічні витрати і вартість зчитування.

1. Спосіб подготовк�а яких:
(a) завантажують безліч флаконів (4) на приймальний майданчик (6), при цьому кожен флакон (4) містить призначену для аналізу клітинну суспензію (5);
(b) завантажують безліч аналітичних ємностей (32, 34, 36) на приймальний майданчик (6);
(c) відбирають з флакона (4) пробу клітинної суспензії (5) і вводять її в аналітичну ємність (34, 36);
етап (з) повторюють для кожного аналізованого флакона (4);
(d) повторно переводять пробу в суспензію;
(e) вибирають релевантні клітини за допомогою диференціальної декантації;
(f) виробляють всмоктування обсягу (100), отриманого в результаті диференціальної декантації, за допомогою пипеточних засобів (20), при цьому обсяг (100) містить призначену для аналізу пробу;
при цьому зазначений спосіб відрізняється тим, що етап (з) відбору проби клітинної суспензії з флакона (4) і введення цієї проби в аналітичну ємність (34, 36) містить, щонайменше, етап руйнування клітинних скупчень за допомогою пипеточних дозувальних засобів (20), причому етап (f) всмоктування обсягу включає в себе етап «микросмешивания», який полягає у всмоктуванні обсягу клітинної суспензії безпосередньо над дном (56) декантационного конуса флакона (4) з подальшим повторним нагнітанням частини від�очної суспензії з флакона (4) і введення цієї проби в аналітичну ємність (34, 36) містить, щонайменше, етап перемішування і фільтрування клітинної суспензії у флаконі (4).

3. Спосіб за п. 1 або п. 2, який відрізняється тим, що етап (з) відбору проби клітинної суспензії (5) з флакона (4) і введення цієї проби в аналітичну ємність (34, 36) додатково містить, щонайменше, наступні етапи, на яких:
(g) повторно переводять обсяг (100), що містить призначену для аналізу пробу, в однорідну суспензію в пипеточних засобах (20);
(h) переміщують пипеточние кошти (20) для їх розміщення над аналітичної ємністю (34, 36);
(i) виливають призначену для аналізу пробу в аналітичну ємність (34, 36).

4. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що кожна аналітична ємність містить декантационную чашку (36) і аналітичну пластинку (32), розташовану навпроти декантационной чашки (36), при цьому спосіб містить, щонайменше, наступні послідовні етапи, на яких:
(j) розміщують абсорбційний лист (62) на завантажувальної майданчику (6) таким чином, щоб кожна аналітична пластинка (32) розташовувалася між завантажувальної майданчиком (6) і абсорбційним листом (62);
(k) завантажують безліч декантационних чашок (36) у прес (66) і встановлюють прес (66) над майданчиком (6) таким про�>l) наносять тонкий шар клітинної проби на аналітичну пластинку (32), причому нанесення тонкого шару клітинної проби відбувається в результаті введення проби в декантационную чашку (36);
при цьому етапи (j) та (k) здійснюють після етапу (b) завантаження безлічі аналітичних ємностей і перед етапом (с) відбору проби клітинної суспензії (5), а етап (l) здійснюють після етапу (с) відбору проби клітинної суспензії (5).

5. Спосіб за п. 4, який відрізняється тим, що містить етап аналізу клітинного відкладення на дні декантационних чашок (36) за допомогою вимірювання клітинної щільності на аналітичних платівках (32).

6. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що містить автоматизований етап фарбування або маркування клітин.

7. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що попередньо містить етап остаточного закриття флакона (4), що містить призначену для аналізу клітинну суспензію (5), при цьому спосіб здійснюють без подальшого відкривання флакона (4).

8. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що кожна аналітична ємність містить трубку (34) для відбору або для аликвотирования.

9. Автомат (2) для підготовки та аналізу, щонайменше, однієї клітинної суспензії (5), що містить:
- щонайменше, ву майданчик (6), на якій встановлено і точно і нерухомо закріплений флакон (4);
- щонайменше, одну чашку (36) для декантації клітинної суспензії (5), при цьому декантационная чашка (36) розташована і закріплена точно і нерухомо на майданчику (6);
- систему (30) аналізу, що містить, щонайменше, одну аналітичну пластинку (32), виконану з можливістю розміщення/утримання на ній проби клітинної суспензії (5), при цьому проба є об'ємною частиною клітинної суспензії (5), що містить відповідні призначені для аналізу елементи, і аналітичну пластинку (32), розташовану і закріплену точно і нерухомо на майданчику (6) знизу і навпаки декантационной чашки (36);
при цьому автомат (2) відрізняється тим, що містить пипеточние кошти (20), виконані з можливістю відбору проби клітинної суспензії (5) з флакона (4) і виливання цієї проби у декантационную чашку (36) на аналітичну пластинку (32) системи (30) аналізу, причому ці кошти (20) виконані з можливістю руйнування клітинних скупчень і з можливістю відбору обсягу клітинної суспензії (5) з одного місця і його повторного нагнітання по суті те ж місце.

10. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що містить перший рухливий кронштей�пекло адміністратора майданчиком (6), на якій розташовані флакони (4), декантационние чашки (36) і аналітичні пластинки (32).

11. Автомат з п. 9 або 10, відрізняється тим, що містить розчини для маркування або фарбування, які можна змішати з цитологічним розчином за допомогою пипеточних засобів (20).

12. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що кожен флакон (4) і кожна аналітична пластинка (32) містить візуальну маркування (50), причому автомат містить засоби (90) зчитування візуальних маркувань (50).

13. Автомат з п. 12, відрізняється тим, що кошти (90) зчитування містять знімальну камеру і встановлені на другому рухомому кронштейні, виконаному з можливістю переміщення, щонайменше, над адміністратора майданчиком (6), на якій розташовані флакони (4), декантационние чашки (36) і аналітичні пластинки (32).

14. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що флакон (4) містить засоби (52) фільтрування, розташовані над декантационним конусом (56), при цьому пипеточние кошти (20) виконані з можливістю відбору частини клітинної суспензії (5) під засобами (52) фільтрування і повторного направлення зазначеної частини на декантационний конус (56)для перемішування зазначеної клітинної суспензії (5) і, щонайменше, одноразовоЋх скупчень, розмір яких перевищує розмір ячейок фільтра.

15. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що система (30) аналізу проби містить засоби (70) аналізу клітинної щільності клітинних відкладень на дні декантационной чашки (36) на аналітичній платівці (32).

16. Автомат з п. 15, відрізняється тим, що кошти (70) аналізу клітинної щільності клітинних відкладень на дні декантационной чашки (36) на аналітичній платівці (32) містять знімальну камеру (72).

17. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що система (30) аналізу проби містить пристрій для отримання віртуальної пластинки проби.

18. Автомат з п. 17, відрізняється тим, що пристрій для отримання віртуальної пластинки проби містить знімальний камеру.

19. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що містить єдину знімальну камеру, що утворить кошти (90) зчитування, кошти (70) аналізу клітинної щільності і пристрій отримання віртуальної пластинки.

20. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що містить опору, що містить засоби (9, 12) позиціонування, щонайменше, майданчики (6), виконані з можливістю нерухомого і точного кріплення майданчики, і кнопку (14), виконану з можливістю підтвердження положення, щонайменше, площ�. -7.

22. Автомат з п. 9, що відрізняється тим, що клітинна суспензія (5) є цитологічної суспензією.

23. Автомат з п. 22, відрізняється тим, що цитологічна суспензія містить фіксуючий розчин, що містить від 80% до 95% за обсягом:
- 590 мл фізіологічного розчину,
- 10 мл ПЕГ,
- 203 мл ізопропілового спирту,
- 193 мл чистого етилового спирту,
- 0,01% за обсягом азиду натрію,
і від 20% до 5% за об'ємом 4%-го буферного формаліну.



 

Схожі патенти:

Автоматичний аналізатор зразків калу

Винахід відноситься до галузі медицини і може бути використано для автоматичного аналізу зразків калу. Автоматичний аналізатор зразків калу містять автоматичний контролер, контейнер для зразків, розріджує пристрій, щоперемішує і змішуючий пристрій, аналізуюче пристрій, пристрій всмоктування і очищення, сполучене трубопроводами з аналізує пристроєм. Аналізуюче пристрій містить модуль фізичної аналізу і модуль хімічного аналізу. Пристрій всмоктування і очищення містить голку всмоктування проби, приймач разжижителя і перистальтичний насос всмоктування проби, приєднаний між голкою всмоктування проби і приймачем разжижителя. Аналізуюче пристрій під'єднано між голкою всмоктування проби та перистальтичним насосом всмоктування проби, причому коли голка всмоктування проби вставлена в контейнер для зразків і перистальтичний насос всмоктування проби здійснює позитивний обертання, голка всмоктування проби всмоктує зразки з контейнера для зразків і передає зразки калу на аналізуюче пристрій. Перистальтичний насос всмоктування проби виконаний з можливістю зворотного обертання і всмоктування разжижителя і�ня аналізу. Винахід забезпечує зниження забруднення навколишнього середовища і лабораторії при проведенні аналізу, а також підвищення продуктивності. 14 з.п ф-ли, 6 іл.

Біосенсор з квадрупольний магнітною системою впливу

Винахід відноситься до вимірювальної техніки, зокрема, медичної. Пристрій являє собою квадрупольний магнітний блок (1, 2, 3, 4) для забезпечення різного градієнта магнітного поля на сенсорній поверхні на дні засоби, наприклад, картриджа або камери, для розміщення рідкого зразка в биосенсоре з метою управління частками зразка. Також під сенсорною поверхнею розташований детектор частинок, акумульованих на/або поблизу сенсорної поверхні, наприклад, оптичний детектор, заснований на порушеному повному внутрішньому відбитті (FTIR). 13 з.п. ф-ли, 14 іл.

Иммунодиагностический тестовий елемент, що має ослаблений шар фольги

Винахід відноситься до області иммунодиагностического тестування і, зокрема, до імунологічному тестового елементу

Газовий медичний мас-спектрометр для діагностики живого організму в режимі реального часу

Винахід відноситься до медичної техніки, а саме до пристроїв для аналізу газів живого організму

Спосіб неінвазивного збору та аналізу транскутантного газу із живого організму в режимі реального часу

Винахід відноситься до медицини і може бути використане для медичних, фізіологічних, фармацевтичних, криміналістичних та інших досліджень

Автоматична система і спосіб виявлення точкового джерела біологічного агента

Винахід відноситься до систем виявлення біологічної небезпеки, особливо до системи виявлення таких біологічно небезпечних агентів, як збудник сибірської виразки, у поштових відправленнях
Up!