Спосіб оцінки стану мукозального імунітету слизових відкритих порожнин різної локалізації при прогнозуванні перебігу інфекційно-запальних процесів і спосіб корекції інфекційно-запальних процесів

 

Винахід відноситься до мікроекології та імунології і може використовуватися для оптимізації діагностики, прогнозування і лікування інфекційно-запальних процесів.

Мікрофлора людини є основою його мікроекології і справляє безпосередній вплив на життєдіяльність і стан макроорганізму. Мікробіоценоз відкритих порожнин макроорганізму - динамічна микроэкологическая система, компонентами якої є макроорганізм, його мікрофлора (сукупність типових для певного біологічного виду і конкретного біотопу асоціацій мікроорганізмів) і навколишнє середовище, що характеризується здатністю до саморегуляції, яка є інтегральною частиною організму («додатковим органом») господаря і місцевого імунітету, зокрема, і виконує або регулює численні функції макроорганізму. Показники стану мікробіоценозів відображають стан реактивності макроорганізму - здатність організму відповідати на впливи зовнішнього середовища зміною своєї життєдіяльності, що забезпечує його адаптацію до різних умов існування. Слизові відкритих порожнин макроорганізму являють собою єдину систему. Стан микробиоцритих порожнин організму - фізіологічний феномен - здатності мікрофлори і макроорганізму в кооперації захищати екосистему слизових від патогенних мікроорганізмів. КР включає комплекс місцевих чинників, до яких належать інгібітори мікробної адгезії, біоцидні і биостатические продукти секретів, нормальну мікрофлору, механічні фактори (миготливий епітелій, цілісність шкіри і слизових), місцеві чинники вродженого та адаптивного імунітету. До механізмів феномену КР відносяться шкіра і слизові оболонки (формують фізичний і екологічний бар'єр для проникнення патологічних агентів всередину організму), рух мукоциліарного епітелію, перистальтику кишечника, десквамацию мукозних клітин, антимікробний ефект секретів слини, жовчі, шлункового і кишкового вмісту, склад і кількість муцину, напруженість кисню по товщині біоплівки, рН середовища, швидкість оновлення епітелію мукозного[1, 2, 3, 4, 5].

В даний час накопичено достатньо велику кількість інформації про ролі якісних і кількісних змін мікрофлори відкритих порожнин організму людини у розвитку інфекційно-запальних процесів.

Так, початок більшості бронхолегеневих захворювань пов'язано �нормі затримує і елімінує близько 70% надходить ззовні інертного і агресивного антигенного матеріалу. Ініціація будь-якого інфекційно-запального процесу залежить від співвідношення рівнів индигенних і умовно-патогенних мікроорганізмів, що формують даний біотоп. (6, 7). Кількісні та якісні порушення у складі мікробних симбіонтів ясенної рідини, порушення їх взаємодії з макроорганизмом обумовлюють розвиток пародонтиту (8).

Збудники урогенітального хламідіозу та уреаплазмозу - облігатні внутрішньоклітинні паразити, що не є патогенами, але на тлі зростаючої урбанізації, погіршення соціально-демографічної та екологічної ситуації, здатні викликати різні ускладнення, які надають несприятливий вплив як на загальний стан здоров'я, так і на репродуктивну функцію. Їх патогенний потенціал залежить від концентрації в організмі, наявності або відсутності певних генів патогенності, стану мікробіоценозу біотопу, асоціації з іншими патогенними бактеріями і вірусами, зміни фізіологічного та імунного статусу. (9, 10).

На жаль, до теперішнього часу більшість микроэкологических досліджень проводилися без урахування факторів місцевої та организменной резистентності. Разом з тим, формування КР слизових, протягом инфекциондигенной мікрофлорою, так і факторами місцевого імунного захисту.

Відомий спосіб оцінки біоценозу статевого тракту у пацієнток, що полягає у визначенні лизоцимная активності піхви, рн піхви, флори з підрахунку загального мікробного числа (методом посіву на кров'яний агар) (патент UA №2179849, 2002.02.27, A61K 31/19, 35/74).

Недоліками способу є:

- неможливість проведення комплексної оцінки стану мікробіоценозу піхви з урахуванням кількісних показників вмісту факультативно-анаеробної і облігатно-анаеробної мікрофлори у виділеннях і в зіскобі з піхви у поєднанні з визначенням компонентів гуморальної резистентності та бар'єрної функції слизової оболонки піхви;

- недостатня інформативність лабораторного обстеження для прогнозування, оцінки ефективності та стабільності корекції стану мікробіоценозу піхви.

Відомий спосіб оцінки мікроекології піхви при діагностиці вагінальних інфекцій, що полягає у виключенні інфекцій, що передаються статевим шляхом, мікроскопії вагінального мазка, пофарбованого за Грамом, і посіві вагінального відокремлюваного на факультативно-анаеробну групу мікроорганізмів і микроаэрофили. На підставі микробиологичесгинальний кандидоз, неспецифічний вагініт, цитолітичним вагіноз, атрофічний кольпіт або проміжний варіант микроценоза (11).

Недоліками способу є:

- неможливість проведення комплексної оцінки стану мікробіоценозу піхви при одночасному дослідженні кількісних показників вмісту факультативно-анаеробної і облігатно-анаеробної мікрофлори у виділеннях і в зіскобі з піхви у поєднанні з визначенням компонентів гуморальної резистентності та бар'єрної функції слизової оболонки піхви;

- недостатня інформативність лабораторного обстеження для прогнозування, оцінки ефективності та стабільності корекції стану мікробіоценозу піхви.

Відомий спосіб оцінки мікробіоценозу порожнини матки у жінок з поліпами ендометрію в постменопаузальному періоді шляхом визначення кількісного та якісного складу мікрофлори і кількісної оцінки показників локального гуморального імунітету, що включає взяття соскобного матеріалу з порожнини матки, проведення посіву соскобного матеріалу для виявлення видів мікроорганізмів умовно-патогенної факультативно-анаеробної і облігатно-анаеробної мікрофлори і їх чутливість до дріб�уноглобулинов IgG, IgM, IgA, вільного, секреторного компоненту (sc) і секреторного імуноглобуліну А (sIgA) методом радіальної імунодиффузії за Манчіні і оцінку мікробіоценозу: нормоценоз порожнини матки на тлі атрофії ендометрія при відсутності умовно-патогенної факультативно-анаеробної і умовно-патогенної облігатно-анаеробної мікрофлори і певної концентрації імуноглобулінів; порушення мікробіоценозу при певному вмісті умовно-патогенної факультативно-анаеробної і умовно-патогенної облігатно-анаеробної мікрофлори і при певній концентрації імуноглобулінів. Вищеописаний спосіб дозволяє підвищити ефективність діагностики (патент РФ №2430365).

Відомий спосіб діагностики хронічного урогенітального хламідіозу (патент РФ №2327995), при якому визначають соскобном матеріалі з уретри з використанням полімеразної ланцюгової реакції в реальному часі рівні експресії толл-подібних рецепторів: TL-рецептора-2 і TL-рецептора-4 і діагностують хронічний урогенітальний хламідіоз при рівнях експресії в соскобном матеріалі з уретри TL-рецептора-2 не більше 5 одиниць і TL-рецептора-4 не більше 5 одиниць. Рівні експресії TL-рецептора-2 і TL-рецептора-4 визначали з використанням ре Д. В. Точність методів полімеразної ланцюгової реакції в реальному часі» при визначенні вмісту генетично модифікованих джерел в харчових продуктах // Прикладна біохімія та мікробіологія. - 2006. - T. 42, №4. - С. 485-488; UA патент 2294532 C1, G01N 21/64).

Даний спосіб оцінює один із факторів мукозального імунітету - вроджений імунітет.

Завданням винаходу є розробка способу оцінки стану мукозального імунітету слизових відкритих порожнин різної локалізації при прогнозуванні перебігу інфекційно-запальних процесів.

Завдання вирішується таким чином, що при встановленому патогномонічно факторі проводять реєстрацію ступенів порушення мікробіоценозу конкретного біотопу відкритих слизових порожнин різної локалізації з використанням комплексу методів оцінки рівнів факторів колонізаційної резистентності як інтегруючої складової мукозального імунітету в мазках і соскобном матеріалі зі слизових (нормальної мікрофлори, умовно-патогенної мікрофлори, нейтрофілів, цитокінів, імуноглобулінів IgG, IgM, IgA, sIgA та sc компонента і TLR-рецепторів) і в залежності від ступеня порушення мікробіоценозу оцінюють:

- гарний стан мукозального�ln з ерадікацією збудника;

- порушення мукозального імунітету при нормоценозе і першого ступеня порушення мікробіоценозів і прогнозують хронічний перебіг інфекційно-запального процесу з персистированием збудника.

Під місцевим (мукозальним) імунітетом розуміється комплекс клітинних і секреторних неспецифічних і специфічних реакцій, що включає бар'єрні функції клітин шкіри і слизових оболонок, фагоцитарну активність нейтрофілів і макрофагів, Т-клітинний імунітет, антитіла, антимікробні білки зовнішніх секретів, інгібітори ферментів, цитокіни. Місцевий імунітет не ототожнюється з секреторним імунітетом, але в якості центральної ланки розглядається В-клітинну відповідь лімфоїдної тканини слизових оболонок з участю залозистого епітелію, яке постачає секреторний компонент. Поняття місцевого імунітету в даний час включає сукупність реагування всіх клітин лімфоїдного ряду, що заселяють слизові оболонки, в кооперації з макрофагами, нейтрофильними і эозинофильними гранулоцитами, тучними клітинами та іншими клітинами сполучної тканини та епітелію[3, 12, 13, 14, 15, 16, 17]. Отже, микробиоценози відкритих слизових порожнин і мукозальний імунітет мЋм і на підставі проведених комплексних досліджень представляється актуальним виявлення взаємозв'язку характеристик мікробіоценозів та факторів мукозального імунітету слизових відкритих порожнин різної локалізації в нормі і при інфекційній патології.

Будь інфекційний процес у слизовій оболонці, незалежно від етіології, розвивається за одним і тим же сценарієм. Перший етап - це адгезія мікробів у пристінковому муцине або на епітеліальних клітинах, яка забезпечується спеціальними структурами збудника. Закріпившись, мікроорганізми починають розмножуватися, що призводить до патологічної колонізації слизової - це другий етап інфекційного процесу (дисбактеріоз). Наступний, третій етап інфекційного процесу - це інвазія мікроорганізмів, коли вони долають захисний бар'єр слизової оболонки і проникають в епітеліальні клітини або підлягає тканину, викликаючи при цьому місцеву імунну реакцію (коліт, вагініт, фарингіт та ін). При подоланні місцевого захисного бар'єру можлива генералізація інфекції. Патогенність окремих видів бактерій залежить від наявності або відсутності представників інших видів. Тому при оцінці мікробіоценозів слизових необхідно враховувати кількість і видовий склад мікроорганізмів як, вільно розташованих у просвіті, так і адгезированних до епітеліальних поверхонь (пристінкові область).

Відомо, що система антиінфекційної резистентності організму визначається якос�організмами на епітеліальних поверхнях, місцевої і организменной антиінфекційної резистеностью господаря. Ключовою ланкою в розпізнанні макроорганизмом патогенів є TL-рецептори (TLR), що становлять основу мембранних комплексів і экспрессирующихся на всіх клітинних елементах, які беруть участь в формуванні резистентності (включаючи КР макроорганізму), в тому числі і на поверхні слизових оболонок.

TLR здатні розпізнавати консервативні молекулярні структури, поширені серед певного класу мікроорганізмів і відсутні у людини. Антиинфекционная захист на місцевому рівні розвивається шляхом формування типової запальної реакції після взаємодії патогенів з TLR, що супроводжується активацією генів цитокинового каскаду, відповідального за активацію фагоцитів та інших імунокомпетентних клітин, Ig, що, в свою чергу, визначає рівень мукозальной КР і, в подальшому, блокування життєдіяльності, дезінтеграцію і видалення інфекційного агента з організму.

Так, при вивченні нами урогенітальних хламідіозу та уреаплазмозу, гострих інфекційних захворювань верхніх дихальних шляхів, у тому числі гострих і хронічних бронхітів, було встановлено взаємозв'язок толл-подібних рецепторів - TLR (контр�уноглобулиновое ланка і запальна реакція) з мікрофлорою біотопу, визначальною колонізаційної резистентність слизових, характеризує перебіг інфекційного процесу, вираженість клінічних і лабораторних проявів і результат захворювання (лікування, хронізація). Колонизационная резистетность виступає як невід'ємна частина мукозального імунітету.

Функцію TLR оцінювали оригінальним запатентованим методом визначення рівня експресії генів (TLR) полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) в режимі реального часу з зворотною транскрипцією, з використанням специфічних праймерів (UA патент 2294532). Встановлено, що патогени та умовно-патогенними мікроорганізмами (УПМ), потрапляючи на слизові відкритих порожнин, взаємодіють з TLR епітеліальних клітин і запускають через активізацію цитокиновой системи запальну реакцію. TLR-2 і TLR-4 реагують на бактеріальні патогени, a TLR-3 і TLR-8 - на вірусні. При взаємодії збудника з чутливими для нього клітинними елементами слизових TLR клітин відповідають експресією генів на патоген і УПМ, а при взаємодії збудника з нечутливими для нього клітинами епітелію слизових - тільки на УПМ. При гострому і хронічному інфекційних процесах провідними етіологічними факторами інфекційного процесу явленов TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 залежать від якісного складу мікробних спільнот (зокрема від превалювання грампозитивних або грамнегативних збудників або вірусних патогенів), присутніх на слизових оболонках відкритих порожнин організму. Активація експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 відбувається більш вираз у відповідь на патогени та УПМ і менш вираз - на нормофлору. Показники рівнів обсіменіння УПМ прямо корелюють з показниками рівнів експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8. Рівні експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 служать критеріями оцінки вираженості запального процессса. Підвищення експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 корелює з тяжкістю клінічних проявів, а при одужанні їх зниження свідчить про ерадикації збудника. Природна або придбана супресія генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 зумовлює хронічний перебіг інфекції. При гострому інфекційному процесі виявлення низьких рівнів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 вказує на початок хронізації інфекційного процесу. Запропонований метод оцінки TLR можна розглядати як додатковий лабораторний тест, уточнюючий клінічні форми і прогнозує результат захворювання.

При інфекційних ураженнях відкритих пжить додатковим об'єктивним критерієм тяжкості перебігу інфекційного процесу, а також дозволяє диференціювання судити про ефективність проведеної антибактеріальної терапії і вносити в неї необхідні корективи. Гострий перебіг інфекційного процесу супроводжується достовірним зниженням рівнів індигенної мікрофлори у пристінковому і просвітному біотопах слизових, підвищеної колонізацією їх УПМ, багаторазовим підвищенням рівнів експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8, цитокінів IL-1β, IL-8, INF-γ, TNF-α, імуноглобулінів IgG, IgA, sIgA, IgM і SC і вираженістю місцевої запальної реакції (виявлено достовірна кореляційна залежність між змінами рівнів перерахованих факторів), що свідчить про хорошою місцевої антиінфекційної резистентності. Хронічний перебіг інфекційного процесу, порівняно з гострим перебігом, супроводжується при загостренні менш вираженим достовірним зниженням рівнів індигенної мікрофлори у пристінковому і просвітному біотопах слизових, підвищенням УПМ, підвищенням рівнів експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8, цитокінів IL-1β, IL-8, INF-γ, TNF-α, імуноглобулінів IgG, IgA, sIgA, IgM і SC і слабо вираженою місцевою запальною реакцією, що свідчить про порушення і зниження мукозальной антиінфекційної резистентності.

З урахуванням приведенма була запропонована оригінальна методологія оцінки порушень їх мікробіоценозів.

Оцінка вираженості порушень мікробіоценозу піхви (табл.1):

- нормоценоз піхви (Вл) визначається при наявності на поверхні епітеліоцитів менше 25 бактеріальних клітин, представлених грампозитивними паличками, при кількості лейкоцитів менше 10 в полі зору, при відсутності ключових клітин (I ступінь чистоти мазка), при вмісті у виділеннях 6-8 lg КУО/г лактобацил, при вмісті в соскобном матеріалі 7-10 lg КУО/г лактобацил, при відсутності у виділеннях і в соскобном матеріалі умовно-патогенної факультативно-анаеробної і облігатно-анаеробної мікрофлори і при концентрації у змиві IgA 0 мкг/мл, sIgA ≤10 мкг/мл, IgM 0 мкг/мл, SC ≤10 мкг/мл;

- проміжний тип мікробіоценозу Пл при наявності на поверхні епітеліоцитів 25-50 бактеріальних клітин, представлених грампозитивними паличками, одиничними грампозитивними коками та грамнегативними паличками, при кількості 10-20 лейкоцитів в полі зору, при відсутності ключових клітин (II ступінь чистоти мазка), при вмісті у виділеннях 4-5 lg КУО/г лактобацил, 3-4 lg КУО/г умовно-патогенної факультативно-анаеробної або облігатно-анаеробної мікрофлори та/або при вмісті в соскобном матеріалі 5-6 lg КУО/г лактобацил, 1-2 lg КОЕве IgA≤10 мкг/мл, sIgA 11-15 мкг/мл, IgM≤10 мкг/мл, SC 10-25 мкг/мл;

- дисбіоз Пл при наявності на поверхні епітеліоцитів 50-100 бактеріальних клітин, представлених грампозитивними паличками, грампозитивними коками та грамнегативними паличками, при кількості лейкоцитів 20-40 в полі зору, при наявності ключових клітин менше 5 у полі зору (III ступінь чистоти мазка), при вмісті у виділеннях 1-3 lg КУО/г лактобацил, 5-7 lg КУО/г умовно-патогенної факультативно-анаеробної мікрофлори і 3-4 lg КУО/г умовно-патогенної облігатно-анаеробної мікрофлори та/або при вмісті в соскобном матеріалі 3-4 lg КУО/г лактобацил, 3-4 lg КУО/г умовно-патогенної факультативно-анаеробної мікрофлори і 5-7 lg КУО/г умовно-патогенної облігатно-анаеробної мікрофлори і при концентрації у змиві IgA 11-15 мкг/мл, sIgA 16-30 мкг/мл, IgM 11-20 мкг/мл, SC 26-50 мкг/мл;

- бактеріальний вагініт при наявності на поверхні епітеліоцитів не менше 100 бактеріальних клітин, представлених одиничними грампозитивними паличками і рясної грамнегативної і грампозитивної палочковой і кокової флорою, при кількості лейкоцитів не менше 40 в полі зору, при кількості ключових клітин не менше 5 у полі зору (IV ступінь чистоти мазка), при відсутності в отделробной або облігатно-анаеробної мікрофлори та/або при вмісті в соскобном матеріалі 1-3 lg КУО/г лактобацил, 6-8 lg КУО/г монокультури умовно-патогенної факультативно-анаеробної або облігатно-анаеробної мікрофлори і при концентрації у змиві IgA>15 мкг/мл, sIgA>30 мкг/мл, IgM>20 мкг/мл, SC>50 мкг/мл

Оцінка вираженості порушень мікробіоценозу цервікального каналу (табл. 2):

- нормоценоз мікробіоценозу цервікального каналу (Цк) визначається при кількості лейкоцитів<4 в полі зору, при вмісті в соскобном матеріалі 1-2 lg КУО/г УПМ та при концентрації у змиві IgG≤8 мкг/г білка, sIgA≤7 мкг/г білка, SC≤8 мкг/г білка;

- проміжний тип мікробіоценозу Цк визначається при кількості лейкоцитів 8-10 в полі зору, при вмісті в соскобном матеріалі 2-3 lg КУО/г УПМ та при концентрації у змиві IgG 10-13 мкг/г білка, sIgA 11-14 мкг/г білка, SC 13-19 мкг/г білка;

- дисбіоз мікробіоценозу Цк визначається при кількості лейкоцитів 14-40 в полі зору, при вмісті в соскобном матеріалі 3-4 lg КУО/г УПМ та при концентрації у змиві IgG 30-40 мкг/г білка, sIgA 20-30 мкг/г білка, SC 30-40 мкг/г білка;

- бактеріальний вагініт мікробіоценозу Цк визначається при кількості лейкоцитів >40 в полі зору, при вмісті в соскобном матеріалі >4 lg КУО/г УПМ та при концентрації в сности порушень мікробіоценозу ротоглотки (табл. 3):

- нормоценоз, який характеризується відсутністю микроэкологических порушень, присутністю індигенної мікрофлори: Streptococcus spp. в кількості 5-6 lg КУО/г, Neisseria spp.- 4-6 lg КУО/г при концентрації в слині IgA<20 мкг/мл, sIgA<20 мкг/мл, IgM 0 мкг/мл, IgG<50 мкг/мл, SC<50 мкг/мл;

- проміжний тип (I ступінь дисбіотичних порушень), характеризується наростанням нормофлори {Streptococcus spp.- до 6-7 lg КУО/г, Neisseria spp.- 6-7 lg КУО/г) і появою УПМ в кількості до 3-4 lg КУО/г при концентрації в слині IgA 20-50 мкг/мл, sIgA 20-50 мкг/мл, IgM<10 мкг/мл, IgG 50-100 мкг/мл, SC 50-100 мкг/мл;

- дисбіоз (II ступінь дисбіотичних порушень) ротоглотки, при якому спостерігається підвищення кількості нормофлори {Streptococcus spp.- 6-7 lg КУО/г, Neisseria spp.- 6-7 lg КУО/г), підвищення рівня факультативно-анаеробної УПМ до 4-5 lg КУО/мл, поява вірулентних варіантів УПМ, що характеризуються вираженими факторами патогенності, при концентрації в слині IgA 50-100 мкг/мл, sIgA 50-100 мкг/мл, IgM 10-30 мкг/мл, IgG 100-200 мкг/мл, SC 100-200 мкг/мл;

- виражений запальний процес (III ступінь дисбіотичних порушень), що характеризується значним підвищенням вмісту Streptococcus spp.- 7-8 lg КУО/г, Neisseria spp.- 7-8 lg КУО/г, УПМ та кількості вірулентних мікроорганізмів до 6-8 lg КУО/мл при концентрації в слині Івираженности порушень мікробіоценозу кишечника (табл.4):

- нормоценоз: вміст кишкової палички ≥8 lg КУО/г, лактобацил ≥7 lg КУО/г, біфідобактерій ≥9 lg КУО/г, відсутність УПМ при вмісті в копрофильтратах IgA <10 мкг/мл, sIgA <10 мкг/мл, IgM 0 мкг/мл, IgG <10 мкг/мл, SC <10 мкг/мл;

- I ступінь дисбактеріозу кишечника характеризується підвищеним або зниженим вмістом кишкової палички (≥ або ≤8 lg КУО/г), зниженням вмісту лактобацил (≤6 lg КУО/г) і біфідобактерій (≤9 lg КУО/г) при вмісті в копрофильтратах IgA ≤10 мкг/мл, sIgA ≤10 мкг/мл, IgM ≤5 мкг/мл, IgG 10-20 мкг/мл, SC≤10 мкг/мл;

- II ступінь дисбактеріозу кишечника характеризується зниженим вмістом кишкової палички (≤8 lg КУО/г), лактобацил (≤6 lg КУО/г) і біфідобактерій (≤8 lg КУО/г), появою УПМ в кількості ≥4 lg КУО/г, при вмісті в копрофильтратах IgA 10-20 мкг/мл, sIgA 10-20 мкг/мл, IgM 5-10 мкг/мл, IgG 20-40 мкг/мл, SC 10-20 мкг/мл;

- Ill ступінь дисбактеріозу кишечника характеризується значним зниженням вмісту кишкової палички з незміненими ферментативними властивостями (≤6 lg КУО/г), появою слабоферментирующей та/або гемолизирующей кишкової палички (≥4 lg КУО/г), значним вмістом лактозонегативних ентеробактерій, грамнегативних, глюкозу неферментирующих бактерій, кокової флори (≥6 lg �триманні в копрофильтратах IgA >20 мкг/мл, sIgA >20 мкг/мл, IgM >10 мкг/мл, IgG >40 мкг/мл, SC >20 мкг/мл

Наступні приклади підтверджують використання заявляється способу оцінки стану музального імунітету слизових відкритих порожнин різної локалізації при прогнозуванні перебігу інфекційно-запальних процесів.

Приклад 1.

Обстежено 30 клінічно здорових дітей і 77 дітей з гострими і рецидивуючими захворюваннями респіраторного тракту у віці 3-14 років. Діти були поділені на 3 групи: 1 група - контрольна (30 клінічно здорових дітей), 2 група - хворі з гострим бронхітом (51 дитина), 3 група - хворі з хронічним бронхітом (15 осіб). Частота інфікування аденовірусами була достовірно вище при гострому бронхіті у порівнянні з хронічним бронхітом і клінічно здоровими пацієнтами. Відмінності в обсіменіння слизової задньої стінки глотки индигенними мікроорганізмами в контрольній групі хворих на бронхіти дітей не достовірні як за кількісним змістом, так і за частотою зустрічальності, однак, у хворих дітей вони перевищували показники нормоценоза (табл.5). Це свідчить про компенсованій формі дисбіотичних порушень у верхніх дихальних шляхах. Виявлс хронічним бронхітом і клінічно здоровими пацієнтами. Інтенсивність колонізації задньої стінки глотки умовно-патогенними мікроорганізмами (УПМ) достовірно вище при гострому бронхіті, а при хронічному бронхіті зміни достовірні порівняно з клінічно здоровими пацієнтами. Виявлення в слині підвищених рівнів загального IgE при гострому та хронічному бронхітах вказує на активізацію і кількісне підвищення інфекційного компоненту. У клінічно здорових дітей нормоценоз реєструвався у 48,1% пацієнтів, проміжний тип - у 44,4%, дисбіоз - у 7,4% пацієнтів, що достовірно відрізнялося від показників при гострому бронхіті: нормоценоз - у 21,6% пацієнтів при p < 0,05, проміжний тип - у 11,8% пацієнтів при p < 0,01, дисбіоз - у 35,3% пацієнтів при p < 0,05, виражений запальний процес - у 31,4% пацієнтів при p < 0,01; при хронічному бронхіті нормоценоз - у 20,0% пацієнтів при p < 0,05, проміжний тип - у 20,0% пацієнтів при p < 0,01, диебиоз - у 33,3% пацієнтів при p < 0,05, виражений запальний процес - у 26,7% пацієнтів при p < 0,01; достовірних відмінностей між гострим і хронічним бронхітом не виявлено. Отже, при гострому бронхіті порушення мікробіоценозу слизових зсуваються в бік дисбіозу і вираженого запального процесу. Однак високі рівні але�ялинами індексу природної колонізації назофаригеального епітелію (ИЕКНЭ). Висеваемость УПМ в титрі 6 Ig КУО/г і вище може свідчити про придбання нею фенотипових маркерів вірулентності.

Примітки: ИЕКНЕ - індекс природної колонізації назофарингеального епітелію.

При гострому бронхіті у відповідь на виражене бактеріально-вірусне вплив досліджені TLR відреагували достовірним п'ятикратним підвищенням експресії генів у порівнянні з хронічним бронхітом і контрольною групою. Причому, проявилася спеціалізація TLR: TLR-2 і TLR-4 реагували, в основному на бактеріальні патогени, а TLR-3 і TLR-8 - на вірусні патогени. Найбільш високі значення експресії генів мали місце при мікст інфекції, що пояснюється, в певній мірі, перехресним дією лігандів. При хронічному бронхіті рівні експресії генів TLR в основному не відрізнялися від контрольної групи.

При гострому бронхіті у відповідь на достовірно високу інфекційну навантаження (у вигляді микстинфекции вірусними патогенами та УПМ) підвищуються рівні експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3 і TLR-8, запускають у верхніх дихальних шляхах продукцію прозапальних цитокінів IL-8, TNF-α і IL-1β, що приводять, у свою чергу, до збільшення вмісту імуноглобулінів, що�шу гостроту інфекційного процесу і сприяє локалізації інфекційного процесу, а також до стимуляції продукції додаткових цитокінів сусідніми неінфікованими клітинами. У ротоглотці наростання рівнів імуноглобулінів, sIgA та sc обумовлено їх синтезом in situ. Рівні експресії TLR прямо корелюють з показниками рівнів sIgA і лізоциму, що свідчить про їх взаємозв'язку як компонентів колонізаційної резистентності, що відображають стан вродженого імунітету, і не корелюють з підвищеними показниками індексу ИЕКНЕ що свідчить про низьку адгезивної здатності епітелію ротоглотки у отношениии УПМ. Всі разом вказує на високий рівень колонізаційної резистентності як показника мукозального імунітету. Відсутній зв'язок між TLR і IgE. При хронічному бронхіті у відповідь на слабку інфекційну навантаження (у вигляді микстинфекции вірусними патогенами та УПМ) рівні експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 не підвищуються; не виявляється прямий кореляційний зв'язок зі зниженими порівняно з такими при гострому бронхіті, показниками рівнів цитокінів, IgM, sIgA; реєструється хронічний, уповільнений запальний процес. Рівні експресії TLR практично прямо не корелюють з показниками рівнів sIgA і лізоциму; корелюють з підвищеними показниками порушення колонізаційної резистентності як показника мукозального імунітету, сприяє прогресуючому характером перебігу інфекційного процесу і дисбалансу в процесах деструкції і репарації, супутніх запалення. Відсутній зв'язок між TLR і IgE.

При гострому та хронічному бронхітах взаємозв'язок рецепторів вродженого імунітету TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 (контролюють запуск цитокинового каскаду місцевої антиінфекційної резистентності, через який запускаються иммуноглобулиновое ланка і запальна реакція) з мікрофлорою біотопу визначає КР слизових, характеризує перебіг інфекційного процесу, вираженість клінічних і лабораторних проявів і результат захворювання (лікування, хронізація). Встановлено достовірний взаємозв'язок TLR з іншими факторами вродженого імунітету лізоцимом, ИЕКНЕ, sIgA та sc. Рівні IgE незалежні від TLR. П'ятикратне підвищення рівнів експресії генів TLR-2, TLR-4, TLR-3, TLR-8 і цитокінів IL-1β, IL-8, INF-γ, TNF-α свідчить про хорошою місцевої антиінфекційної резистентності, а відсутність підвищення вказує на її порушення і хронічний перебіг захворювання (носить діагностичний і прогностичний характер).

Достовірне підвищення медіани експресії гена TLR-2 регіст�ю групою при p < 0,0001. Медіана експресії гена TLR-4 при гострому бронхіті достовірно нижче при інфікуванні УПМ при зіставленні з хронічним бронхітом (p < 0,0001), достовірно вище при мікст інфекції при зіставленні з хронічним бронхітом та контрольною групою (p < 0,0001), а без інфікування достовірно вище в контрольній групі порівняно з хронічним бронхітом (p=0,007).

Медіана експресії гена TLR-3 при гострому бронхіті достовірно вище при зіставленні з хронічним бронхітом (p < 0,006) при інфікуванні вірусними патогенами і при мікст інфекції (p < 0,0001). Медіана експресії гена TLR-8 при гострому бронхіті достовірно вище при зіставленні з хронічним бронхітом (p < 0,006) при мікст інфекції (p < 0,0001); при хронічному бронхіті вона вище від такої при гострому бронхіті при інфікуванні вірусними патогенами (p < 0,0001), а без інфікування достовірно вище в порівнянні з контрольною групою (p=0,001). Отже, при гострому бронхіті у відповідь на виражене бактеріально-вірусне вплив досліджені TLR відреагували достовірним підвищенням експресії генів у порівнянні з хронічним бронхітом і контрольною групою. Причому, проявилася спеціалізація TLR:

TLR-2 і TLR-4 реагували, в основному на бактеріальні патогени, а TLR-3�бъясняется, певною мірою, перехресним дією лігандів. При хронічному бронхіті рівні експресії генів TLR в основному не відрізнялися від контрольної групи (Табл.6.)

Таким чином, при верифицированном патогенитеческом агента третя ступінь порушення мікробіоценозу ротоглотки - виражений запальний процес відображає виражену запальну реакцію при бронхітах і свідчить про повноцінності мукозального імунітету; друга ступінь порушення мікробіоценозу ротоглотки - біоценоз є проміжною між першою і третьою ступенями і вказує на нормально протікає реакцію мукозального імунітету; перша ступінь порушення мікробіоценозу ротоглотки - проміжний тип свідчить про порушення мукозального імунітету.

Приклад 2.

Клініко-анамнестичні та лабораторні дані 228 хворих на урогенітальний хламідіоз (УГХ) дозволили відібрати 100 пацієнток, які були розподілені на 3 групи. Групу I склала 41 пацієнтка - первинно інфіковані хворі в гострій стадії інфекційного процесу. Групу II становили 29 пацієнток з хронічним перебігом хламідійної інфекції. У ІІІ (група порівняння) увійшли 30 пацієнток - раніше перехворіли (з давно перенесеннонения).

УПМ в піхву (Вл) при гострому урогенітальному хламідіозі (УГГ) визначалися в кількості 8,1±0,4 lg КУО/мл, при загостренні хронічного УГХ - 4,6±1,0 lg КУО/мл, у перехворілих - 2,5±1,2 lg КУО/мл, у клінічно здорових пацієнтів - 2,74±0,94 lg КУО/мл Рівні виявлення УПМ при гострому УГХ відрізнялися (при p < 0,05) від таких інших порівнюваних груп пацієнтів. По частоті виявляється™ УПМ у Вл достовірні відмінності виявлені між I і II (p < 0,01), I і III (p < 0,001), I та IV (p < 0,001), II і III (p < 0,01), II і IV (p < 0,001), III і IV групами (p < 0,01), а між групами I і II відмінності не достовірні. Чим виражений патологічний процес, тим ширший набір мікроорганізмів і в більш високих титрах вони висіваються. Непрямим свідченням придбання патогенних властивостей УПМ може бути виділення з Вл штамів облігатних анаеробів при гострому УГХ в титрі 7 lg КУО/г, а при загостренні хронічного УГХ в титрі 5 lg КУО/р. В I групі у 43,9% пацієнток виявлено бактеріальний вагініт і у 56,1% - дисбіоз, в II групі у 27,5% пацієнток - бактеріальний вагініт і у 72,4% - дисбіоз, в III і IV групі у всіх пацієнток-нормоценоз. УПМ в цервікальному каналі (Цк) у групі I визначалися в кількості 3,70±1,56 lg КУО/мл, у групі II - 3,80±0,27 lg КУО/мл, у групі ІІІ - 1,36±0,37 lg КУО/мл, в групі IV - 1,94±0,73 lg КУО/мл По ча�, а між I і II, II і III групами відмінності не достовірні. В I групі у 19,51% пацієнток реєструвався бактеріальний цервіцит і у 80,48% - дисбіоз, в II групі у 13,79% пацієнток - бактеріальний цервіцит, у 51,7% - дисбіоз і у 34,48% - проміжний тип, в III і IV група у всіх пацієнток - нормоценоз. Непрямим свідченням придбання патогенних властивостей УПМ може бути виділення з Цк штамів облігатних анаеробів в титрі 4 lg КУО/р. УПМ в уретрі (Ур) у групі I визначалися в кількості 4,20±0,51 lg КУО/мл, у групі II - 2,3±0,5 lg КУО/мл, у групі ІІІ - 2,50±0,83 lg КУО/мл, в групі IV - 1,32±0,37 lg КУО/мл По частоті виявлення УПМ в Ур достовірні відмінності виявлені між I і IV (p < 0,001), II і III (p < 0,01), ІІ і ІV групами (p < 0,001), а між групами I і II, I і III, III і IV відмінності не достовірні. Непрямим свідченням придбання патогенних властивостей УПМ може бути виділення з Ур штамів факультативних анаеробів або облігатних анаеробів в титрі 4 lg КУО/р.

При УГХ показники рівнів обсіменіння УПМ Цк, Ур і Вл прямо корелюють з показниками рівнів експресії генів TLR-2 і TLR-4. Підвищення експресії генів TLR-2 і TLR-4, як в Цк, так і в Ур, корелює з тяжкістю клінічних проявів, що залежить як від хламідій, так і від ассоціантів (збудників інфекцій п�а УПМ та збудників ІПСШ. Активація експресії генів TLR-2 і TLR-4 відбувається більш вираз у відповідь на УПМ і менш вираз при контакті з нормофлорой. Вперше встановлена визначальна роль TLR-2 і TLR-4 слизових УГТ у відповіді макроорганізму на інфікування хламідіями та УПМ при УГХ. Рівні експресії генів TLR-2 і TLR-4 служать критеріями оцінки вираженості УГХ і наявності запального процесу у хворих, а при одужанні їх зниження може свідчити про ерадикації збудника. При УГХ виявлення в соскобном матеріалі з Ур рівнів експресії генів TLR-2 більше 14 Е і TLR-4 більше 10 Е, а в соскобном матеріалі з Цк TLR-2 понад 19 Е і TLR-4 більше 14 Е вказує на гострий УГГ;

виявлення в соскобном матеріалі з Ур рівнів експресії генів TLR-2 не більше 5 Е і TLR-4 не більше 5 Е, а в соскобном матеріалі з Цк TLR-2 не більше 6 Е і TLR-4 не більше 9 Е вказує на хронічний УГХ або початок хронізації інфекційного процесу. Однотипні зміни показників рівня експресії TLR-2 і TLR-4 в Цк і Ур пацієнток з хронічною формою хламідіозу вказують на розвиток "феномена рецепторної депресії", що супроводжується дисбалансом між розвитком інфекційного процесу і запальною реакцією. Підвищення рівня експресії mRNA TLR-2 і TLR-4 і активлевания, а низькі рівні є поганим прогностичною ознакою.

При гострому хламідіозі у відповідь на високу інфекційну навантаження (хламідій у вигляді моно - або микстинфекции із збудниками ІПСШ та/або з УПМ) підвищуються рівні експресії генів TLR-2, TLR-4, запускають в Цк виражену продукцію IL-8, TNF-α і IL-1β, що приводять, у свою чергу, до збільшення вмісту лейкоцитів, білка і Ig у пацієнток, що можна розцінювати як виражену місцеву (переважно по клітинному типу) імунологічну реакцію макроорганізму, відображає гостроту інфекційного процесу і сприяє розвитку запальної реакції і локалізації поширення інфекції за межі шийки матки, а також стимуляції продукції додаткових цитокінів сусідніми неінфікованими клітинами. При хронічному хламідіозі поєднання зниженої експресії генів TLR-2 і TLR-4 з придушенням активності локального синтезу IL-8, IL-6, TNF-α, відносно слабко вираженої лейкоцитарної реакції, зниженими рівнями sIgA і sc, підвищеним вмістом загального білка та IgG, зумовлює хронічний, уповільнений запальний процес, сприяє прогресуючому характером перебігу інфекційного процесу і свідчить про дисфункції механізмів мім чином, при верифицированном патогенитеческом агента третя ступінь порушення мікробіоценозу слизових оболонок урогенітального тракту - виражений бактеріальний вагініт (бактеріальний цервіцит) відображає виражену запальну реакцію при урогенітальному хламідіозі і свідчить про повноцінності мукозального імунітету; друга ступінь порушення мікробіоценозу ротоглотки - біоценоз є проміжною між першою і третьою ступенями і вказує на нормально протікає реакцію мукозального імунітету; перша ступінь порушення мікробіоценозу ротоглотки - проміжний тип або нормоценоз свідчить про порушення мукозального імунітету.

Наступним завданням винаходу є розробка способу корекції інфекційно-запального процесу з урахуванням стану мукозального імунітету і прогнозу перебігу інфекційно-запального процесу.

Відомий спосіб лікування інфекційних захворювань (патент РФ №2146531), що включає застосування антибіотиків і імуномодуляторів, відрізняється тим, що при низькому титрі специфічних антитіл у крові та з урахуванням приналежності антитіл до класів імуноглобулінів при підгострому, стертому, инапарантном, повільному або хронічному течі ректальним введенням препаратів біфідумбактерину та/або ацилакта, потім при підвищенні титру антитіл в крові і з урахуванням приналежності антитіл до класів імуноглобулінів призначають протягом 5-14 днів антибіотикотерапію та в кінці лікування повторно застосовують імуномодулюючі засоби у поєднанні з пероральним та/або ректальним введенням препаратів біфідумбактерину та/або ацилакта.

Недоліки способу полягають в тому, що при призначенні даної терапії враховувалися тільки титри специфічних антитіл в крові з урахуванням приналежності антитіл до класів імуноглобулінів при підгострому, стертому, инапарантном, повільному або хронічному перебігу інфекції.

Завдання вирішується таким чином, що хворим з хорошим станом мукозального імунітету, визначеного згідно із заявленим способом оцінки стану мукозального імунітету та з урахуванням прогнозу перебігу інфекційно-запального процесу в слизових різної локалізації призначають коррегирующую терапію з використанням загальноприйнятих антибактеріальних препаратів з підключенням імуномодулятора до моменту лікування і зникнення запальної реакції, а хворим з порушенням мукозального імунітету після першого курсу згаданої терапії повторно через місяць призначають другий �підтверджують ефективність використання заявляється способу корекції інфекційно-запального процесу з урахуванням стану мукозального імунітету і прогнозу перебігу інфекційно-запального процесу.

Приклад 1. У дітей з гострим та хронічним бронхітами верифікована патогенетична асоціація з аденовірусів, S. aureus і грибів роду Candida. При цьому при гострому та хронічному бронхітах (стадія загострення), порівняно з клінічно здоровими пацієнтами, достовірно частіше і з однаковою частотою зустрічалися друга (дисбіоз - у 35,3% і 33,3% випадків, відповідно) і третя (виражений запальний процес - 31,4% та 26,7% випадків, відповідно) ступеня дисбактеріозу ротової порожнини; при цьому, при гострому бронхіті у зіставленні з хронічним бронхітом виявлено більш високі рівні показників експресії генів рецепторів вродженого імунітету TLR і запальної реакції, що в сукупності свідчило про високий рівень мукозального імунітету, найбільш вираженому при гострому бронхіті. Це підтвердилося ефективністю проведеного курсу лікування з використанням загальноприйнятої антибактеріальної терапії з підключенням імунобіологічного препарату Кипферон®: зниження показників обсіменіння вірусними патогенами, S. aureus і грибми роду Candida та відсутність рецидиву протягом півроку (термін спостереження) у пацієнтів з гострим бронхітом, а пацієнтам з хронічним бронхітом через місяць після пе�ма при гострому і хронічному бронхіті у пацієнтів з нормоценозом - у 21,6% і 20,0% випадків, відповідно) та першої (проміжний тип - у 11,8% і 20,0% випадків, відповідно) ступенями дисбактеріозу ротової порожнини, що супроводжуються достовірно більш низькими рівнями показників експресії генів рецепторів вродженого імунітету TLR і запальної реакції і вказують на порушення мукозального імунітету, знадобилося повторне застосування курсу терапії через місяць після першого для досягнення лікувального ефекту - зниження показників обсіменіння вірусними патогенами, S. aureus і грибами роду Candida та відсутність рецидиву через півроку; у 11,8% пацієнтів з гострим бронхітом та 66,7% пацієнтів з хронічним бронхітом через півроку виявлений рецидив захворювання. У всіх випадках одужання супроводжувалося зниженням рівнів експресії генів TLR і вираженості запальної реакції на слизових; збереження виражених експресії генів TLR і запальної реакції після першого курсу терапії вимагало його повторення.

Приклад 2. При гострому і хронічному (у стадії загострення) урогенітальному хламідіозі (УГГ) у пацієнтів в цервікальному каналі верифікована патогенетична асоціація з хламідій, збудників інфекцій, що передаються статевим шляхом (ІПСШ) і умовно-па�мі, достовірно частіше і з однаковою частотою зустрічалися друга (дисбіоз - у 80,5% і 51,7% випадків, відповідно) і третя (цервіцит - у 19,5% і 13,8% випадків, відповідно) ступеня дисбактеріозу урогенітального тракту (УГТ); при цьому, при гострому УГХ в зіставленні з хронічним УГХ виявлено більш високі рівні показників рецепторів вродженого імунітету TLR і запальної реакції, що в сукупності свідчило про високий рівень мукозального імунітету, найбільш вираженій при гострому УГХ. Це підтвердилося ефективністю проведеного курсу лікування з використанням загальноприйнятої антибактеріальної терапії з підключенням імунобіологічного препарату Кипферон®: реєструвалася эррадикация хламідій і рецидив не реєструвався протягом півроку (термін спостереження) у пацієнтів з гострим УГХ, а пацієнтам з хронічним УГХ через місяць після першого курсу терапії знадобилося проведення другого курсу для досягнення зазначеного ефекту. У теж час у пацієнтів з нормоценозом - (0% та 0% випадків,відповідно) та першої (проміжний тип - у 80,5% і 51,7% випадків, відповідно) ступенями дисбактеріозу УГТ, що супроводжуються достовірно більш низькими рівнями показників експресії генів р�комітету, знадобилося повторне застосування курсу терапії через місяць після першого для досягнення лікувального ефекту - эррадикация хламідій і відсутність рецидиву захворювання через півроку; у 0% пацієнтів з гострим УГХ і 60% пацієнтів з хронічним УГХ через півроку виявлено загострення захворювання. У всіх випадках одужання супроводжувалося зниженням рівнів експресії генів TLR і вираженості запальної реакції на слизових; збереження виражених експресії генів TLR і запальної реакції після першого курсу терапії вимагало його повторення.

Приклад 3. При гострому уреаплазмозе у пацієнтів у піхву верифікована патогенетична асоціація з уреаплазм, збудників інфекцій, що передаються статевим шляхом (ІПСШ) і умовно-патогенної мікрофлори (УПМ). При цьому при гострому уреплазмозе, порівняно з клінічно здоровими пацієнтами, достовірно частіше зустрічалися друга (дисбіоз - у 44,0% випадків) і третя (вагініт - у 46,0% випадків) ступеня дисбактеріозу піхви; при цьому, при гострому уреаплазмозе виявлений високий рівень показників запальної реакції, що підтверджувало високий рівень мукозального імунітету. Це також підтвердилося ефективністю проведеного курсу лікування з ирон®: у 68,0% пацієнтів з дисбіозом і у 88,0%

пацієнтів з вагинитом наступило клінічне одужання з эррадикацией уреаплазм після першого курсу лікування, рецидив не реєструвався протягом півроку (термін спостереження); у 32,0% пацієнтів з дисбіозом та у 12,0% з вагинитом через місяць після першого курсу терапії знадобилося проведення другого курсу для досягнення зазначеного ефекту. У теж час у пацієнтів з нормоценозом - 0% випадків) та першої (проміжний тип - у 10,5% випадків) ступенями дисбактеріозу піхви, що супроводжуються достовірно, порівняно з дисбіозом і вагинитом, більш низькими рівнями показників запальної реакції і вказують на порушення мукозального імунітету, знадобилося повторне застосування курсу терапії через місяць після першого для досягнення лікувального ефекту - эррадикации уреаплазм та відсутність рецидиву через півроку; у 68,0% пацієнтів з нормоценозом і 76,0% пацієнтів з вагинитом через півроку виявлено загострення захворювання. У всіх випадках одужання супроводжувалося зниженням запальної реакції слизових; збереження вираженої запальної реакції після першого курсу терапії вимагало його повторення.

Таким чином, науково обґрунтована і підтверджена концепція про те, чт�беспечівает життєво необхідний оптимальний рівень реактивності макроорганізму і його антиінфекційних резистентність. Тим самим, достовірно підтверджена роль мікроорганізмів у навчанні захисних систем макроорганізму в онтогенезі. Зміна антиінфекційної резистентності до гетерологічних патогенів на організменної і місцевому рівнях визначається набором факторів патогенності мікроорганізмів, що є невід'ємною патогенетичної характеристикою збудників інфекцій, що обумовлює, в кінцевому рахунку, прогноз і результат захворювання.

Розширені уявлення про механізм формування запуску інфекційного процесу, який є наслідком взаємодії мікроорганізмів біотопів слизових і збудників інфекційних захворювань з TL-рецепторами, рівень експресії яких взаємопов'язаний з вираженістю показників місцевого імунітету (секреторних імуноглобулінів та цитокінів). Таким чином, TLR є першою ланкою у відповіді організму на патоген, що визначає подальший розвиток інфекційного патологічного процесу. Створення швидкої і неспецифічного захисту проти інфекцій визначається здатністю TLR розпізнавати практично всі патогенассоциированние молекулярні структури на патогенах, запускають інфекційний процес. Порушення механізмів функціонування TLR пр� захворювань.

Вперше представлений алгоритм функціонування КР відкритих слизових порожнин як інтегральної складової місцевої антиінфекційної резистентності та мукозального імунітету в цілому. (Рис.1.)

Технічним результатом цього винаходу є розробка способу комплексної оцінки КР слизових як методу оцінки їх мукозального імунітету. Реєстрація показників рівнів TLR, цитокінів і Ig слизових має діагностичне та прогностичне значення і як результат дозволяє використовувати певну схему корекції при порушенні мукозального імунітету.

Список літератури

1. Бондаренко В. М., Мацулевіч Т. В. Дисбактеріоз кишечника як клініко-лабораторний синдром: сучасний стан проблеми. - М., Видавнича група «ГЕОТАР-Медіа, 2007. - 300 с.

2. Воропаєва Е. А., Байракова А. Л., Бичучер A. M. та ін Протеазная активність мікрофлори ротової порожнини хворих на пародонтит // Біомедична хімія. - 2008. - Т. 54, Вип.6. - С. 706-712.

3. Імунобіологічні препарати, перспективи застосування в інфектології. Р. Р. Онищенко, В. А. Альошкін, С. с. Афанасьєв, В. о. Поспєлова (ред.). - М., ГОУ ВУНМЦ МОЗ РФ, 2002. - 608 с.

4. Кочеровец В. І., Бунятян Н.Д. Нормальна мікрофлора жіночих сечостатевих органів та ін Поведінка Candida tropicalis і Candida krusei у присутності пробіотичних пектинів. // Астраханський медичний журнал. - 2011. - T. 6, №3. - С. 97-101.

6. Самсигина Р. А. Гострий бронхіт у дітей та його лікування // Педіатрія. - 2008. - №2. - С. 25-32.

7. El Feghaly R. E., McGann L., Bonville C. A. et al. Local production of inflammatory mediators during childhood parainfluenza virus infection // Pediatr. Infect. Dis. - 2010, V. 29. - P. 26-31.

8. Козлов Ст. Л., Бичучер A. M., Мішин А. А. та ін. Визначення активності протеїназ крові і мікроорганізмів // Біомед. хімія. - 2008. - Т. 54, №3. - С. 314-321.

9. Фидров А. А., Скрипкін Ю. К., Кулагін в. І. та ін Деякі актуальні питання урогенітальної хламідійної інфекції // Журн. "Успіхи сучасного природознавства". - 2006 - №2. - С. 24-26.

10. Donatella Pellati, loannis Mylonakis, Giulio Bertoloni et al. Генітальний tract infections and infertility // European J. of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology. - 2008. - Vol.140. - P. 3-11.

11. Імунобіологічні препарати та перспективи їх застосування в інфектології /Під ред. Р. Р. Онищенко, С. с. Афанасьєва, В. о. Поспєлова. М.: ГОУ ВУНМЦ МОЗ РФ, 2002. С. 162-169,

12. Афанасьєв С. С., Альошкін Ст. А., Воробйов А. А. та ін Вплив препаратів цитокінів на стійкість бактерій до антибіотиків in vitro. // Журн. микробиол. - 2005. - №3. - С. 95-97.

13. Интерфероновий статус, препарати інтерферону в лікуванні та профілактиці інфекційних захворювань та реабілітація біль.З., Альошкін Ст. А., Лапін Б. А. (ред.) Хламідійна інфекція. Нові аспекти патогенезу, імунології, верифікації та лікування інфекції у людини і приматів. - М. вид-во Першого МГМУ ім. І. М. Сєченова, 2012. - 256 с.

15. Серебрянський Ю. О., Афанасьєв С. С., Альошкін Ст. А. та ін. Проблеми цитокинотерапии інфекційних захворювань. - М., 2000. - 106 с.

16. Хаитов P. M. Фізіологія імунної системи. - М., ВІНІТІ РАН, 2001. - 224 с.

17. Шварцман Я. С., Хазенсон Л. Б. Місцевий імунітет. - Л., Медицина, 1978. - 224 с.

1. Спосіб оцінки стану мукозального імунітету слизових відкритих порожнин різної локалізації при прогнозуванні перебігу інфекційно-запальних процесів, що відрізняється тим, що при встановленому патогномонічно факторі проводять реєстрацію ступенів порушення мікробіоценозу конкретного біотопу відкритих слизових порожнин різної локалізації з використанням комплексу методів оцінки рівнів факторів колонізаційної резистентності як інтегруючої складової мукозального імунітету в мазках і соскобном матеріалі зі слизових, а саме нормальної мікрофлори, умовно-патогенної мікрофлори, імуноглобулінів - G, М, А, секреторного імуноглобуліну А та sc компонента; і залежно від ступеня порушення �ения мікробіоценозів і прогнозують сприятливий результат захворювання з ерадікацією збудника;
- порушення мукозального імунітету при нормоценозе і першого ступеня порушення мікробіоценозів і прогнозують хронічний перебіг інфекційно-запального процесу з персистированием збудника.

2. Спосіб корекції інфекційно-запальних процесів, що відрізняється тим, що проводять оцінку стану мукозального імунітету слизових відкритих порожнин способом по 1 п. і призначають:
- хворим з хорошим станом мукозального імунітету курс лікування з використанням загальноприйнятої антибактеріальної терапії з підключенням імуномодулятора - Кипферон® до моменту лікування і зникнення запальної реакції
- хворим з порушенням мукозального імунітету курс лікування з використанням загальноприйнятої антибактеріальної терапії з підключенням імуномодулятора - Кипферон® і повторно через місяць другий аналогічний курс терапії до моменту лікування і зникнення запальної реакції.



 

Схожі патенти:

Спосіб лабораторного контролю рівня фізичного навантаження на організм спортсмена-волейболіста

Винахід відноситься до області спортивної медицини, а саме до методів лабораторної діагностики рівня фізичного навантаження на організм спортсмена. Для цього визначають вміст кальцію і білка в ротовій рідині до та після фізичного навантаження, а також через день після фізичного навантаження. Критерієм повноцінного відновлення організму спортсмена-волейболіста вважають відновлення вмісту іонів кальцію і білка в ротовій рідині після фізичного навантаження до первинних значень, оцінюючи при цьому часовий інтервал, необхідний для цього процесу. Винахід дозволяє проводити визначення резервних можливостей організму та його адаптованості спортсменів-волейболістів до фізичного навантаження. 2 іл., 4 табл.
Винахід відноситься до галузі ветеринарії і може бути використане для діагностики наявності патологічного впливу железодекстрана на печінку поросят. Сутність способу полягає в проведенні морфологічного системного покрокового аналізу гістологічних зрізів печінки з описом її гістологічної структури, вимірюванням середньої кількості двоядерних гепатоцитів, апоптотичних тілець клітин мононуклеарно-макрофагальной системи. При виявленні комплексу патогномонічних морфологічних змін, що включає наявність кровонаповнення синусних капілярів, набряку простору Бог, набухання ендотелію судин, зернистої дистрофії гепатоцитів, збільшення середньої кількості клітин мононуклеарно-макрофагальной системи, в тому числі гемосидерофагов, в 2 рази і більше, а також збільшення кількості двоядерних гепатоцитів і апоптотичних тілець в 2 рази і більше, вважають вплив железодекстрана на стан печінки поросят патологічним. Винахід забезпечує підвищення точності посмертної діагностики наявності патологічного впливу железодекстрана на печінку поросят. 1 табл.
Винахід відноситься до медицини, а саме до перинатології та педіатрії, і може бути використане для прогнозування тимомегалии в тримісячному віці у доношених новонароджених з внутрішньоутробним грип, ускладнений плацентитом. Сутність способу: у доношених новонароджених після виключення тимомегалии на 3 добу життя визначають на гістологічних препаратах кількість вогнищ запальних змін в балах у плацентарної частини пуповини (А), в плодовій частині плаценти (В), материнської частини плаценти (С), у внеплацентарних оболонках (Д), а потім здійснюють прогноз тимомегалии з допомогою дискримінантного рівняння: D=-0,350×А-1,176×В-1,690×С-1,203×Д, де D - дискриминантная функція з граничним значенням, рівним - 15,00. При D, що дорівнює або більше граничного значення, прогнозують відсутність тимомегалии, при D менше граничного значення прогнозують тимомегалию, а кількість балів приймають з розрахунку: (А) - 1 бал - немає запалення, 2 бали - амнионит, 3 бали - лейкоцитарна інфільтрація в вартоновом студні, 4 бали - флебіт, 5 балів - артеріїт, 6 балів - поєднання двох і більше вогнищ запалення: у кровоносних судинах або в судинах і в вартоновом студні, (В) - 1 бал - немає запалення, 2 бали - хориоамн�оспаления, (З) - 1 бал - немає запалення, 2 бали - виллузит, 3 бали - васкуліт, 4 балів - интервиллезит, 5 балів - децидуит, 6 балів - поєднання двох або більше вогнищ запалення, (Д) - 1 бал - немає запалення, 2 бали - амнионит, 3 бали - хориоамнионит, 4 бали - децидуит, 5 балів хориодецидуит, 6 балів - поєднання двох або більше вогнищ запалення. Завданням пропонованого способу є забезпечення можливості прогнозування тимомегалии в тримісячному віці у доношених новонароджених з внутрішньоутробним грип, ускладнений плацентитом. Ймовірність правильного прогнозу склала 89,1%. 2 пр.

Спосіб визначення вмісту міді в м'язовій тканині риби

Винахід відноситься до галузей тваринництва, екології та ветеринарії, пропонується для використання в якості прижиттєвого неінвазивного тесту оцінки ступеня вмісту міді в м'язовій тканині риб. Спосіб полягає у визначенні в лусці концентрації Mn та/або Cu методом атомно-емісійної спектрометрії. Розраховують рівняння регресії, і за змістом Mn та/або Cu в лусці встановлюють концентрацію міді. Спосіб точний, атравматичен і неинвазивен, простий і зручний у використанні. 3 табл., 1 пр. .
Винахід відноситься до медицини, саме до гематології, і може бути використане для морфометричної оцінки прогнозу перебігу апластичної анемії після спленектомії. Для цього після видалення селезінки визначають її масу, морфометрически вимірюють середню площу маргінальної зони селезінки в гістологічних зрізах при фарбуванні гематоксилином та еозином. Враховуючи ці величини, обчислюють масу маргінальної зони і при її значеннях ≤1,9 м встановлюють сприятливий прогноз перебігу апластичної анемії, а при >1,9 г констатують несприятливий перебіг захворювання. Винахід забезпечує прогноз перебігу апластичної анемії після спленектомії, незалежно від тяжкості захворювання, і дозволяє диференційовано підходити при призначенні терапії. 2 пр.

Спосіб вибору лікувальної тактики пацієнток з олігоменореєю та ожирінням

Винахід відноситься до медицини, а саме до гінекології, і стосується вибору тактики лікування пацієнтів з олігоменореєю і ожирінням. Для цього у дівчаток-підлітків з встановленим діагнозом «олігоменорея» і «ожиріння» вранці натще визначають концентрацію адипонектину та лептину в сироватці крові методом імуноферментного аналізу. Розраховують співвідношення адипонектин:лептин. При значеннях даного співвідношення менш/або рівних 0,3 у пацієнток з олігоменореєю і ожиріння діагностують інсулінорезистентність та лікування починають з призначення сенситайзера до інсуліну метформіну. При значеннях співвідношення адипонектин:лептин більше 0,3 діагностують відсутність інсулінорезистентності та призначають гормональні контрацептиви з дроспиреноном. Спосіб забезпечує ефективне лікування олигоменореи і ожиріння за рахунок вибору адекватного лікування з урахуванням стану вуглеводного обміну. 1 табл., 3 пр.

Спосіб визначення рн шлункового вмісту і оцінки ефективності антисекреторних препаратів

Винахід відноситься до медицини і призначене для оцінки контролю рН шлункового вмісту у пацієнтів відділення реанімації та інтенсивної терапії. Проводять динамічну оцінку рН шлункового вмісту з використанням зонда, визначають сумарну рН шлункового вмісту і ефективність антисекреторних препаратів протягом доби, а при необхідності - більш тривалий час, з інтервалом 3 год. рН визначають з допомогою аналогового індикатора за аналоговою шкалою з кроком 1,0 в діапазоні від 1,0 до 12,0 протягом 15 с з зміною його кольору і зіставляючи з аналоговою шкалою. Пригнічення кислотної продукції вважають ефективним при рН більше 4,0 після планових операції, понад 6,0 після невідкладних операцій. При виявленні неефективності пригнічення кислотної продукції провоизводят заміну антисекреторного препарату або збільшення його дози. Спосіб дозволяє в найкоротші терміни оцінити сумарне значення рН шлункового вмісту і ефективність антисекреторних препаратів у пацієнтів, які потребують проведення інтенсивної терапії. 2 іл., 2 табл., 3 пр.

Портативний аналізатор для дослідження проби

Винахід відноситься до портативного аналізатора для дослідження проби біологічної рідини на предмет значущою з медичної точки зору складової і може бути використане в медицині. Аналізатор включає корпус з магазином, які мають відділення для розміщення використовуваних для аналізу діагностичних смужок або тест-смужок, які мають зону для біологічної рідини та контактні елементи для передачі сигналу на процесор аналізує пристрою. Аналізуюче пристрій виконано з щілиноподібні приймачем для використовуваної діагностичної або тест-смужки. Також аналізатор містить індикаторне пристрій для відображення не менше одного результату аналізу. Магазин або діагностичні смужки або тест-смужки в магазині виконані з електронними елементами, що містять відомості про маркування номера партії та калібрувальних параметрах. У корпусі розміщений ретранслятор для зчитування зазначених параметрів з електронних елементів і передачі їх в процесор аналізує пристрою. Магазин виконаний у вигляді закривається кришкою зниження задньої стінки корпуса, що утворює плоску поверхню, на якій виконані виступи, що розділяють плоску поверхню зниження на �один ряд. Магазин може бути виконаний у вигляді параллелепипедной форми блоку, що закріплюється на поверхні зниження задньої стінки корпуса або на задній частині корпусу. При цьому в закриваемом кришкою блоці виконані виступи, що розділяють дно блоку на відділення для розміщення діагностичних смужок або тест-смужок, розташованих паралельно не менше ніж в один ряд. Магазин також може бути виконаний у вигляді параллелепипедной форми блоку, розташованого в виконаної в корпусі порожнини, завантажувальний отвір якої виведено в бічну або задню стінку і оснащений кришкою. При цьому в цьому блоці виконані виступи, що розділяють дно блоку на відділення для розміщення діагностичних смужок або тест-смужок. Причому в корпусі розміщено приймально-передавальний пристрій ближнього радіусу дії, виконане з функцією отримання сигналів від ретранслятора і процесора аналізує пристрої для прийому-передачі даних в бездротовому режимі на оснащений блоком прийому-передачі медичне обладнання або комп'ютеризоване засіб, або засіб мобільного зв'язку, або мобільний телефон. Досягнутий технічний результат полягає в більш ефективному використанні простору портативного анал�анения всередині приладу. 12 іл.
Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до акушерства. Винахід являє спосіб прогнозування плацентарної недостатності у 2 триместрі вагітності шляхом імунно-ферментного дослідження сироватки крові вагітних, відрізняється тим, що попередньо відомим методом УЗД визначають стать плоду, потім у венозній крові вагітних визначають рівні ангіогенних факторів і цитокінів і якщо встановлено підвищення рівня ІЛ-12 понад 3,2 пг/мл, ЕФР понад 310 пг/мл, зниження рівня ФРП менше 40,0 пг/мл у вагітних, які виношують плід чоловічої статі, і підвищення ЕТ-1 більше 0,42 пг/мл, ІЛ-1β більше 17,6 пг/мл, ФНП-α понад 6,5 пг/мл у вагітних, які виношують плід жіночої статі, то прогнозують у даних вагітних розвиток плацентарної недостатності. Винахід забезпечує підвищення точності прогнозування плацентарної недостатності у II триместрі вагітності з урахуванням статі виношуваного плода. 4 пр.

Спосіб диференціальної діагностики простий і швидкозростаючою міоми матки з нормальною будовою ендометрію

Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до лабораторним методам дослідження, і може бути використане для диференціальної діагностики простий і швидкозростаючою міоми матки. Винахід направлено на спрощення диференціальної діагностики простий і швидкозростаючою міоми матки з нормальною будовою ендометрію. Сутність способу полягає в тому, що супернатант менструальних виділень в кількості 0,2 мл наносять на поверхню предметного скла у формі краплі, накривають покривним склом, висушують при кімнатній температурі, після чого отримані зразки микроскопируют і за наявності в них паралельних структур діагностують швидкорослу міому матки, а при виявленні перехідних форм - просту міому матки. Винахід забезпечує спрощення диференціальної діагностики простий і швидкозростаючою міоми матки з нормальною будовою ендометрію, здійснення диференційної діагностики в короткі терміни з використанням малих обсягів біологічних рідин і з мінімальними матеріальними витратами. 2 іл., 2 пр.
Up!